摘要:目的 CD8 + T 细胞在一些病毒感染疾病的免疫反应中起着重要的作用，但 CD8 + T 细胞在 HIV 无症状期的作用尚不明确，本研究通过体内 CD8 + T 细胞剔除，研究 CD8 + T 细胞对 SHIV 感染猴的影响，进一步了解艾滋病的发病机制。方法 选择 8 只 SHIV 病毒感染的恒河猴，均处于无症状期，随机分成两组，实验组 4 只恒河猴在 0、3、7 d 注射抗 CD8 + T 抗体 cM-T807，不同的时间取外周血、腹股沟淋巴结。流式细胞术测定恒河猴外周血和淋巴结中CD8 + T 细胞数目，Real-time RT-PCR 法测定实验猴血浆病毒载量，并使用 IFN-γ Elispot 方法测定其对猴细胞免疫的影响。结果 CD8 + T 细胞敲除后，4 只猴的病毒载量都转阳，但反应性不一，HIV-1 的靶细胞 CD4 + T 细胞有轻微下降，后反弹，与病毒载量无相关性;CD8 敲除猴的感染情况(血浆病毒载量和 CD4 细胞)比 SHIV 病毒急性感染轻，这与 ELIPOT 结果一致。结论 CD8 + T 细胞在 HIV 无症状期发挥重要的作用，但其作用具有个体差别。

摘要:目的 研究 C 亚型 SHIVCHN19P4强毒株在中国恒河猴体内传代中病毒学和免疫学等反应的变化特点，分离制备 SHIVCHN19P4中国恒河猴传代适应株病毒。方 法 选 择 4 只健康成年恒河猴，其中两只经后肢静脉感染SHIVCHN19P4病毒，60 d 后，分别采集 EDTA 抗凝全血静脉途径传代至另两只猴，使用流式细胞术、PCR、结 合 抗 体 检测和序列分析等方法研究传代动物病毒学、免疫学和序列变异特点。选择性从传代动物感染急性期外周血中分离PBMC，CD8 + T 细胞敲除后与正常 PBMC 共培养分离病毒。结果 4 只传代动物均获得系统性感染，且传代后病毒毒力明显增强，序列分析发现 SHIVCHN19P4病毒序列在传代过程中发生适应性改变;同 时，成 功 分 离 制 备 SHIVCHN19P4传代适应性病毒株。结论 SHIVCHN19P4 在中国恒河猴体内适应性传代研究为进一步建立 C 亚 型 SHIV 强 毒 株 /SAIDS 模型奠定了良好的实验基础，为研究 C 亚型 HIV-1 流行株致病特点以及预防性黏膜疫苗和杀微生物的有效性评价提供了数据支持。

摘要:目的 确定 SHIV1157ipd3N4 静脉途径感染中国恒河猴的有效病毒浓度，明确 SHIV1157ipd3N4 感染实验猴体内病毒复制和免疫损伤情况。方法 10 只正常中国恒河猴分成 6 组，分别用 10 倍系列稀释的病毒液 1 mL 静脉感染，测定血浆病毒载量，CD4 + /CD8 + ，CD4 + T 淋巴细胞绝对数，分析感染后恒河猴体内病毒复制和免疫损伤情况。结果 5TCID50 /mL 以上浓度的 SHIV1157ipd3N4 能通过静脉途径感染中国恒河猴。结论 该实验的成功进行为SHIV /中国恒河猴疾病及评价模型的建立奠定了良好的基础，为今后使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。

摘要:目的 了解 RT-SHIV 感染中国恒河猴的感染特点，研 究 RT-SHIV 在中国恒河猴中传代特点;建 立RT-SHIV 中国恒河猴动物模型，为评价 HIV-1 药物有效性提供动物平台。方 法 选 择 4 只 健 康 恒 河 猴，其 中 两 只动物经上肢静脉感染 RT-SHIV 病毒，感染急性期采取外周血分离 CD8 － PBMC，扩增病毒，将新制备的病毒静脉感染另外两只中国恒河猴，通过监测血浆病毒载量，CD4 + /CD8 + 比值，CD4 + T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞的绝对数，了解实验猴的感染状态，同时分析病毒 RT 基因变异情况。结果 4 只动物均获得系统性感染，且传代动物急性期表现更为强烈，RT 基因在感染和传代的过程中共观察到 3 个氨基酸 的 改 变。结 论 本 研 究 为 RT-SHIV 中 国 恒 河 猴 模型的建立提供了基础信息。

摘要:目的 制备具备完整空间构型且纯度在 90% 以 上 的 灭 活 HIV-1 病 毒，用 于 HIV 疫 苗 研 究。方 法应用化学制剂 2，2’-dithiodipyridine ( aldrithiol-2;AT-2) 灭 活 HIV-1 病 毒，对灭活的病毒超速离心浓缩并洗涤去除灭活用的化学制剂 AT-2。采用分子筛技术去除灭活病毒中残存的杂质蛋白质。结果 250 μmol /L AT-2 与 HIV-137℃ 作用 1 h 可以彻底灭活病毒的感染性，同时保留病毒的免疫原性。灭活的病毒纯化后检测不到 AT-2 的残留，检测牛血清蛋白残余量低于 50 ng /mL。结论 灭活的 HIV-1 病毒经过纯化后纯度达到 95. 6% ，可以满足作为 HIV疫苗研究的免疫刺激剂的使用要求。

摘要:目的 通过观察乌司他丁(UTI)对大潮气量机械通气大鼠肺组织 Clara 细胞分泌蛋白(CC16)表达的影响，探讨 CC16 在机械通气所致肺损伤(VILI)发病中作用以及 UTI 对 VILI 的干预作用。方法 24 只雄性 Wistar大鼠随机分为对照组、大潮气量组和 UTI 干预组，观察其肺组织病理学改变，测定肺组织中丙二醛( MDA) 和 BALF中总蛋白( TP)含量，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织 CC16 mRNA 的表达，采用免疫组织化学染色法检测肺组织中 CC16 蛋白表达及 Clara 细胞计数。结果 与对照组比较，大潮气量肺组织 MDA 的含量及 BALF总蛋白含量明显升高(P < 0. 01) ，而肺细支气管上皮细胞 CC16mRNA 及其蛋白表达水平明显降低(P < 0. 01) ;与大潮气量组比较，UTI 干预组大鼠肺组织中 MDA 的 含 量 及 BALF 总蛋白含量明显降低( P < 0. 01) ，而肺细支气管上皮细胞 CC16mRNA 及其蛋白表达水平明显升高(P < 0. 01)。结论 大潮气量机械通气导致肺组织 CC16 mRNA 及其蛋白表达水平降低在 VILI 发病中起重要作用，乌司他丁不但能促进 Clara 细 胞 分 泌 CC16 而抑制肺组织炎症反应，还能抑制脂质过氧化物的产生，对 VILI 有一定保护作用。

摘要:目的 建立荧光素酶标记人胃癌原位异种移植模型。方法 将萤火虫荧光素酶作为标记基因导入人胃癌 MGC803 细胞，建立稳定表达荧光素酶的细胞，将其接种裸鼠胃壁浆膜下，建立胃癌裸鼠原位肿瘤模型。用活体荧光成像系统检测肿瘤的发生发展，并进行小动物超声影像和病理学分析。结果 裸鼠原位成瘤率为 100% ，活体荧光成像观察发现在接种第 7 天，就可以观察到肿瘤发光。21 d 后肿瘤进入对数生长期，28 d 后 肿 瘤 出 现 明显坏死，平均荧光光子数呈现下降趋势。超声成像发现小鼠胃部有直径为 8. 39 mm，面积为 28. 92 mm2瘤块。结论荧光素酶标记可以实时监测原位异种移植人胃癌生长状况。

摘要:目的 利用 APPswe /PSΔE转基因阿尔茨海默病小鼠模型探索治疗痴呆有效的中药单体。方法 根据目前的研究资料，选定 12 种中药单体，加入鼠粮中对 APPswe /PSΔE9双转基因小鼠在 5 月龄开始进行治疗，以安理申作为阳性药对照，4 周后进行水迷宫实验，并与安慰剂组小鼠进行比较。结果 在水迷宫实验中，与安慰剂组相比，吴茱萸碱能够显著缩短寻找平台的潜伏期，显著增加穿过原平台区的次数。结 论 吴茱萸碱能够 显著改善APPswe /PSΔE9痴呆模型小鼠的学习记忆能力。

摘要:目的 了解病料中犬瘟热病毒(CDV)的变异情况，为犬瘟热的预防与治疗提供理论依据。方法 采用 RT-PCR 方法对犬病料中 CDV 的血凝素蛋白( H)、融合蛋白( F)和核衣壳蛋白(N)基因进行扩增，将扩增产物克隆到 pGEM-T-easy 载体中测序，并进行 序 列 分 析。结 果 测 定 一 株 CDV 的 H、F 和 N 基因大小分别为 1863 bp、1653 bp 和 2235 bp。同源性分析 表 明，未发现碱基的插入和缺失。该 病 毒 的 H、F 和 N 基因分别与国内强毒株BJ080127 株的 H 基 因、GN 株 的 F 基 因 和 HL 株 的 N 基因亲缘关系最近，氨基酸同源性分别为 97. 3% 、97. 7% 和99. 3% 。与国外标准野毒株 A75-17 在核苷酸水平上同源性依次为 94. 4% 、93. 8% 和 97. 2% ，与疫苗株 CDV3 在核苷酸水平上同源性分别为 88. 5% 、88. 8% 和 93. 9% 。系统进化树表明该病毒与国内强毒株在同一谱系。糖基化分析显示，该病毒在 F 基因 3 ～ 5 位氨基酸处多出 1 个糖 基 化 位 点。结 论 本研究从犬病料中成功克隆了犬瘟热病毒血凝素蛋白、融合蛋白和核衣壳蛋白，在 F 基因中新增了一个糖基化位点，为犬瘟热的遗传变异和流行学研究提供了分子生物学依据。

摘要:目的 观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD) 兔肝 组 织 硫 化 氢( H2 S)、一 氧 化 氮( NO) 浓 度，探 讨 H2 S、NO 在 NAFLD 发病中的作用。方法 40 只日本大耳白兔数字法随机分为重度 NAFLD 组( 重 度 组)、轻 度 NAFLD组(轻度组)、空白对照组(对照组)。重度组给予高脂饲料 160 g / (兔·d) ，轻度组给予高脂饲料 80 g / ( 兔·d) +普通饲料 80 g / (兔·d) ，对照组给予普通饲料 160 g / (兔·d)。均饲养 13 周。实验前后采集血浆标本，同步检测甘油三酯( TG)、胆固醇( TC) ;肝组织匀浆检测 NO、H2 S 浓 度。肝 组 织 HE 染 色，光镜观察肝脏病理学。结 果 ⑴TC、TG:饲养前重度组、轻度 组、对 照 组 TC、TG 比较差异无统计学意 义( P > 0. 05) ，饲 养 后 重 度 组 TC、TG 分 别 为(32. 12 ± 1. 25)、(6. 02 ± 2. 12) mmol /L，轻度组 TC、TG 分别为(18. 34 ± 2. 10)、(4. 39 ± 1. 93) mmol /L，均高于饲养前(P ﹤ 0. 01) ，饲养后重度组 TC、TG 高于轻度组(P ﹤ 0. 01)。⑵ 肝组织 NO:重度组(132. 4 ± 20. 7μmol / g 蛋白)和轻度组(95. 4 ± 19. 8 μmol / g 蛋白) 肝组织 NO 浓度显著高于对照组(74. 9 ± 34. 7 μmol / g 蛋白，P ﹤ 0. 01) ，重度组又显著高于轻度组 (P ﹤ 0. 01)。⑶ 肝组织 H2 S 浓度:与对照组比较，重度组和轻度组肝组织 H2 S 明显下降 ( P﹤ 0. 01) ，重度组与轻度组比较下降更显著(P ﹤ 0. 05)。⑷ 肝 脏 病 理 学:重度组肝脏病理学改变呈重度 NAFLD，轻度组呈轻度 ～ 中度 NAFLD。结论 NO、H2 S 参与 NAFLD 的发生、发展，通过干预 NO、H2 S 防治 NAFLD 可能是未来方向。

摘要:目的 表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica，Bb)DNT 蛋白，并以此建立检测 Bb 抗体的间接 ELISA 方法。方法 参照 GenBank 公布的猪源支气管败血波氏杆菌 dnt 基因序列( AB020025) 针对其 N-端设计了一对特异性引物，PCR 扩增出相应的 核 苷 酸 片 段。将 PCR 扩增产物连接至原核表达载体 pET-28a( + ) 载 体中，以 E. coli BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达，以纯化重组蛋白 DNT1 作为诊断抗原，通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数，建立检测支气管败血波氏杆菌重组蛋白 DNT1 抗体的 ELISA 方法。结果 成功克隆了 dntN-端的基因序列，并在 E. coli BL21(DE3)中获得高效表达，经 SDS-PAGE、Western blot 分析显 示 重 组 蛋 白 DNT1 具有良好的抗原性。应用重组蛋白 DNT1 为抗原建立了检测 Bb 血清抗体的间接 ELISA 诊断方法。试验确定重组蛋白 DNT1 抗原的包被浓度为 6. 25 μg /mL，最适血清稀释度为 1∶ 100。结论 建立的 ELISA 检测方法，不仅为 Bb 抗体检测提供了一种比较实用的血清学检测手段，也为进一步开发 Bb 检测试剂盒奠定了基础。

摘要:目的 构建结核分枝杆菌 Ag85B-Esat6-HspX 融合基因，并对其在体外真核细胞中进行表达。方 法用 PCR 法从结核分枝杆菌 H37Rv 株基因组中分别 扩 增 Ag85B、Esat6、HspX 基 因，插 入 到 pUC19-T 载 体，序 列 测定正确后，将融合基因再次克隆到真核表达载体 pcDNA3. 1( － )。重组质粒经酶切鉴定并测序正确后，用 MegaTran1. 0 转染 293T 细胞，并用 Western-Blot 检测目的蛋白的表达。结果 Western-blot 检测到分子量大小约 65 kDa 的目的蛋白。结论 成功地构建了结核分枝杆菌 Ag85B-Esat6-HspX 融合基因的真核表达载体，且该重组载体可在体外真核细胞中获得特异性的表达。

摘要:目的 应用无创遥测技术观察运输应激对 Beagle 犬部分生理指标的影响。方法 16 只 Beagle 犬随机分成两组(每组 8 只) ，即对照组和运输应激组，并利用大动物无创生理信号遥测技术，分别监测清醒自由活动状态下对照组和运输应激组应激 4 h 后 Beagle 犬 的 心 电 图、活 动、皮肤温度和呼吸参数的变化。结 果 Beagle 犬 心率、RR 间期、QT 间期、活 动、皮 肤 温 度、呼吸均具有明显的昼夜节律变化 ( P < 0. 01 ) ;与 对 照 组 比，运 输 应 激 后Beagle 犬心率、活动度、呼吸频率、每分钟通气量和潮气量均显著增加(P < 0. 01) ，RR 间期、PR 间期、皮肤温度均显著降低(P < 0. 01) ，相关分析表明运输应激对 Beagle 犬 心 率、活 动、皮肤温度和呼吸频率具有显著的相关性( P <0. 05，P < 0. 01)。结论 运输应激 可 引 起 Beagle 犬生理学指标的明显改变，但除皮肤温度外，运 输 应 激 (4 h) 对Beagle 犬昼夜节律变化破坏不明显;利用无创遥测技术平台可建立理想的 Beagle 犬 生 物 模 型，可用于动物福利和药理毒理学评价研究。

摘要:目的 对野生成年树鼩的体重和主要脏器重量进行测定，计算其脏 器 系 数。方 法 测 定 60 只 野 生成年树鼩体重及 11 个主要脏器重量，并计算其脏器系数。进 行 脏 器 重 量、脏器系数的性别间比较分析及 Kendall和谐系数分析。结果 性别间比较心、肺重量差异极显著( P < 0. 01) ，脑、肾上腺、胰腺重量之间差异显 著 ( P <0. 05) ;肾上腺、胰腺系数差异有极显著性( P < 0. 01) ，心、肺、肾系数之间差异均达到了显著水平( P < 0. 05)。Kendall 和谐系数(W) 分析表明，动物与其个体各主要器官整体发育协调性较好。结论 野生成年树鼩心重量、肺重量、脑重量、肾上腺重量、胰腺重量、肾上腺系数、胰腺系数、心系数、肺系数、肾系数性别间存在差异。

摘要:目的 分别测定 7 日龄和 56 日龄的 HBK-SPF 鸭的解剖学数据，并分析比较性别之间的差异。方法采用常规方法测定 7 日龄和 56 日龄的雌、雄 HBK-SPF 鸭的解剖数据，并对雌雄差异进行了统计学分析。结果在所测定的解剖数据中，不同日龄、性别之间表现差异显著性的项目不同，其 中 7 日 龄 时，左 肾、右肾存在性别差异，达到极显著(P < 0. 01) ，胫围和盲肠 2 存在显著性别差异(P < 0. 05) ;56 日龄时，只有胸腺存在极显著性别差异(P < 0. 01) ，盲肠 1 和直肠差异显著(P < 0. 05) ，其它解剖数据在雌雄之间差异不显著。结 论 不 同 日 龄 的 HBKSPF 鸭的解剖数据和脏器参数存在性别差异。

摘要:目的 探索不同繁育饲养设施对 Beagle 犬主要生产性能的影响。方法 使用两种不同 Beagle 犬繁育饲养设施(设施Ⅰ、设施Ⅱ)对母犬产仔状况、仔犬初 生 重、60 d 离乳犬只存活率、60 d 离 乳 犬 只 体 重、1 ～ 6 月 龄犬只体重月增长等生产性能进行了比较研究。结果 两种设施比较母犬产仔状况，仔犬初生重无差异(P > 0. 05) ;设施Ⅱ比设施Ⅰ的 60 d 离乳犬只存活率高 18. 4% ，差异极显著( P < 0. 01) ，60 日龄离乳犬只体重平均多(0. 62 ±0. 13) kg，差异极显著(P < 0. 01) ;1 ～ 6 月龄犬只体重月增长平均多 0. 29 ± 0. 14 kg，差异近显著( P = 0. 08 > 0. 05)。结论 设施Ⅱ优于设施Ⅰ。

摘要:在社会需要和科技进步的双重推动下，“3R”原则和动物试验替代方法正在从道德理念向实验技术转变。站在全球科技发展的高度，结合我国实验动物替代领域的现状和未来趋势，利用 MSSQLServer2000 构建中国替代方法研究评价中心共识平台，管理信息数据库，用 WEB 技术将数据库与 internet WWW (WorldWideWeb) 页面连接，构成动态的咨询平台和信息数据网络查询系统。该共识平台的建立为国内从事实验动物及替代方法研究应用的用户提供了便利，起到了国内外替代技术交流的桥梁作用。