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赵玺龙,杨举伦,王 力,李 峰,赵稳兴,李 涛,王 丽,杨丽琳,陈 玥
2011, 21(5):1-4+9+89. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.001
摘要:目的 观察人工饲养条件下实验恒河猴肺脏病理改变,探讨实验猴呼吸系统疾病分布规律和病理改变特点,丰富实验猴自发病变基本研究资料。方 法 对 1998 ~ 2008 年云南地区饲养的自然死亡的 155 只 恒 河 猴(年龄 2 ~ 20 岁)的肺脏进行病理检查,按年龄分为幼年组、成年组、老年 组,并对观察结果进行统计学分析。结 果实验猴肺脏主要病变有大叶性肺炎、支气管肺炎、间质性肺炎、肺气肿、支气管扩张症、胸膜 炎、肺肉芽肿性炎等 12种,出现率最高的为支气管肺炎(18. 71% )和大叶性肺炎(16. 74% )。恒河猴肺脏病变在不同年龄阶段均有发生,老年猴组肺脏病变发生率最高,疾病类型和发生率在不同年组中分布不相同,统计学分析显示:支气管炎病变成年组发病率明显高于幼年组;肺气肿病变老年组明显高于成年组和幼年组,(P < 0. 05)。结论 人工饲养条件下死亡实验猴肺脏病变检出率较高,实验猴肺脏病变在不同年龄阶段存在差异,实验猴肺脏病理改变结果丰富了实验猴的基本研究资料,对实验猴的质量控制和相关动物实验有重要价值。
左 琴,李 波,岳秉飞,王金恒,王 洪,马丽颖,魏 杰,范昌发
2011, 21(5):5-9. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.002
摘要:目的 测定自主建立的致癌性转基因动物模型 C57-ras 小鼠杂交 F1 代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方 法 选 取 同 窝 C57-ras 转基因阳性鼠和 BALB / cJ 小鼠交配后的杂交 1代 CB6F1-Tg 小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果 血液生理指标中,CB6F1-Tg 转基因阳性( + / - )雌鼠 和 阴 性( - / - ) 雌 鼠 间 比 较,MCHC 存 在 极 显 著 性 差 异( P < 0. 01) ;CB6F1-Tg 转基因阳性( + / - )雄鼠和阴性( - / - )雄鼠间比较,PLT、PCT、EOS% 、NEUT、NEUT% 、LYM% 存在显著性差异(P < 0. 05) ,NEUT % 、LYM % 存在极显著性差异( P < 0. 01)。血清生化指标中,CB6F1-Tg 阳 性( + / - ) 雌 鼠 和 阴性( - / - )雌鼠比较,ALT、TP、ALB 存在显著性差异(P < 0. 05) ,TG 存在极显著性差异( P < 0. 01)。主要脏器重量和脏器系数均无显著性差异(P > 0. 05)。结论 测定了新建 C57-ras 致癌性转基因小鼠模型 F1 代阳性小鼠和阴性小鼠的主要生物学特性,为该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用中提供参考。
2011, 21(5):10-13+81. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.003
摘要:目的 探讨孕马血清促性腺激素 ( pregnant mare serum gonadotropin,PMSG) 和 促 卵 泡 激 素 ( follicle stimulating hormone,FSH)同期发情处理的小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体( progesterone receptor,PR) 分布的差异。方法 10 只 8 周龄 KM 系雌鼠,随机分为 PMSG 和 FSH 两个组,第一次处理后 48 h 取其卵巢、输卵管、子宫进行固定,免疫组织化学法观察各组织中 PR 的 分 布。结 果 两 组 小 鼠 卵 巢、输卵管和子宫内膜中均有 PR 表 达;其中 PMSG 组初级卵泡、次级卵泡和输卵管的阳性率均显著高于 FSH 处理组(P < 0. 05) ;PMSG 组各级卵泡的平均吸光度值均显著高于 FSH 处理组(P < 0. 05) ;PMSG 处理组子宫内膜上皮与腺上皮中的阳性率显著高于 FSH 组( P< 0. 05) ,而基质和子宫内膜上皮中的平均吸光度值显著低于 FSH 组( P < 0. 05)。结 论 PMSG 和 FSH 同 期 发 情处理不同程度影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中 PR 的表达分布;其中 PMSG 处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫上皮中PR 表达普遍显著高于 FSH 处理组。
2011, 21(5):14-17+82. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.004
摘要:目的 对五种荧光转基因小鼠造血干细胞中的荧光标记细胞进行分析,筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠,为造血干细胞分化机制体内示踪研究提供理想的动物模型。方法 采用活体荧光影像系统对两种红色荧光转基因小鼠品系 C57BL /6J-TgN( CAG-DsRed-1 和 CAG-DsRed-2) ZLFILAS 和三种绿色荧光转基因小鼠品系 C57BL /6J-TgN(CAG-EGFP-1、CAG-EGFP-2 和 CAG-EGFP-3) ZLFILAS 的荧光标记进行比较;采 用 流 式细胞术检测各转基因小鼠的骨髓 lin( - )c - kit( + )Sca-1 + ( LSK) 造血干细胞荧光标记细胞比率,根据标记比率筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠。结果 活体荧光影像分析表明转基因小鼠均系统性表达红色或绿色荧光。流式细胞术检测表明 LSK 造血干细胞中高度表达红色和绿色荧光,其中,C57BL /6J-TgN( CAG-DsRed-1) ZLFILAS 和 C57BL /6J-TgN(CAG-EGFP-1) ZLFILAS 的造血干细胞全部为荧光标记细胞。结论 筛选获得在造血干细胞中全标记的红色和绿色荧光转基因小鼠,可为造血干细胞体内研究提供有效示踪工具。
2011, 21(5):18-21+17. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.005
摘要:目的 研究普罗布 考( Probucol) 对糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响。方 法 采 用 腹 腔 注 射 链 脲佐菌素( STZ) 建立糖尿病大鼠模型。30 只 Wistar 大鼠分为正常对照组(NC) 、糖尿病组( DM) 、糖尿病普罗布考治疗组(DP)。8 周末称取体重、肾 重、计算肾肥大指数( 肾 重 /体 重) ,检测尿白蛋白排泄率( UAER) ;测 定 各 组 生化指标包括血糖(BG) 、胆固醇( TC) 、三 酰 甘 油( TG)、血 清 肌 酐( SCr) 、血 尿 素 氮( BUN) ;检测肾组织中丙二醛( MDA) 的含量及超氧化物歧化酶( SOD) 、过氧化氢酶(CAT) 与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 活性;肾组织切片行 PAS 染色分析肾小球面积及肾小球体积。结 果 DM 组 大 鼠 肾 重、肾 重 /体 重、UAER、TC、TG、SCr、BUN、肾 小 球面积、肾小球体积较 NC 组均明显增加,DP 组上述改变较 DM 组均明显减轻(P < 0. 05) 。DP 组肾组织中 MDA 含量明显低于 DM 组,SOD、CAT、GSH- Px 活性明显高于 DM 组( P < 0. 05) 。结论 普罗布考可能部分通过减轻肾组织氧化应激反应实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。
2011, 21(5):22-25. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.006
摘要:目 的 利用微卫星技术对辽宁省 6 种近交系小鼠进行遗传质量分析。方 法 根 据 Mouse Genome Database 和相关文献选取 10 个多态信息丰富的位点和引物,进行 PCR 扩增和 PAGE 电泳,对小鼠的遗传多态性进行研究。结果 不同品系小鼠同一位点的扩增结果表现出多态性,同一品系同一位点表现单态 性,所 有 小 鼠 的 10个位点都处于纯合状态;遗传距离分析表明,C57BL /10 与 C57BL /6J 小鼠之间的遗传距离最近,为 0. 1021,遗 传 距离最远的是 BALB / c 与 C57BL /10、C57BL /6J,分别为 0. 1635 和 0. 1614。结论 运用所筛选的 10 个微 卫 星 位 点 可以对近交系小鼠进行遗传质量检测,说明该方法具备可行性。
2011, 21(5):26-31. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.007
摘要:目的 人工培育 Wistar 无菌大鼠,观测 F1 和 F2 代无菌大鼠血液学及血液生化指标差异。方法 对清洁级 Wistar 大鼠进行子宫摘除,隔离器内剥离子宫壁获得大鼠胎仔,人工哺育为无菌大鼠。待其繁殖后,采用全自动血液生化分析仪、全血细胞计数仪测定 F1 和 F2 代无菌大鼠的血液学及血液生化指标。结果 不同代数无菌大鼠的血液学和血液生化指标存在显著差异,其中有差异的血液学指标包括 RBC、HGB、HCT、MCV、MCHC、RDW、MPV、NE% 、LYM% 、EO% 、BA% 、NE#、LYM#、EO#、BA#(P < 0. 05) ;有差异的血液生化指标包括 ALT、ALB、LDH、CHO、TBIL、HDL-C、LDL-C、GLO、GLU、ALP、A /G、UA、P(P < 0. 05)。同时这些差异又因性别和年龄而不同。结 论代数、性别、年龄对无菌大鼠的血液学及血液生化指标有较大影响。
梁春联,朱 华,黄 澜,许艳峰,邓 巍,马春梅,刘 颖,秦 川
2011, 21(5):32-36+83. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.008
摘要:目的 探讨 mir-153 在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方 法 通 过 microRNA 芯 片 及 Real-time PCR 检测 APPswe /PSΔE9 双转基因小鼠脑内 mir-153 的表达;构建高表达 mir-153 的稳转细胞系,通 过 western-blot 检测稳转细胞系内 RTN4 的蛋白表达;构建野生型 及 突 变 型 RTN4 的 3’UTR 荧光素酶报告载体,分 别 将 其 与 mir-153 表达载体或 microRNA 阴性对照载体共 转 染 入 293T 细 胞 内,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证 mir-153 对RTN4 mRNA 的作用靶点。结果 microRNA 芯片及 Real-time PCR 检 测 均 证 实 3 月 龄 APPswe /PSΔE9 双 转 基 因 小鼠脑内 mir-153 的表达较同龄野生对照显著降低;在 高 表 达 mir-153 的稳转细胞系内 RTN4 的蛋白水平明显降低;共转染野生型 RTN4 的 3’UTR /mir-153 表达载体可使海肾荧光素酶相对活性较共转染野生型 RTN4 的 3’UTR /miRNA 阴性对照质粒组显著降低(P < 0. 05) ,而共转染突变型 RTN4 的 3’UTR /mir-153 表达载体组则较之无明显差异。结论 在 3 月龄 APPswe /PSΔE9 双转基因小鼠脑内存在 mir-153 的异常表达;mir-153 可调控 RTN4 的蛋白表达;mir-153 对 RTN4 的表达调控是通过结合 RTN4 3’UTR 839-845 碱基处的作用位点而实现的。
2011, 21(5):37-40+84. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.009
摘要:目的 建立稳定而可靠的大鼠肾移植慢性排斥反应模型。方 法 选 用 30 只 Wistar 大 鼠 为 供 体,30只 SD 大鼠为受体。取供体左肾,采用 HC-A 离体肾保存液原位灌注,将供肾动、静脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合,以输尿管膀胱植入法行尿路重建,建立大鼠同种异体肾移植模型。分 别 于 术 后 3、6、9 周 取 移 植 肾观察大体和组织形态学变化,观察术后并发症及排斥反应情况。结 果 移植肾脏大体和组织形态学呈渐进性变化,至术后 9 周可出现明显的慢性排斥反应病理改变。移植肾脏可顺利存活,部分出现肾积水并发症,但不影响排斥反应病理变化。结论 本方法可建立稳定、可靠的肾移植慢性排斥反应模型,是研究慢性排斥反应的理想模型。
2011, 21(5):41-44. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.010
摘要:目的 沙眼衣原体感染是最常见的性传播疾病,本文拟建立一种准确快速、标准化的感染动物组织衣原体载量检测体系。方法 体外扩增感染用沙眼衣原体血清 E 型,克隆衣原体特异基因 OMP1 基因片段作为标准品,用 Real time PCR 法测定衣原体基因组拷贝数进行衣原体定量。结果 Real time PCR 在 OMP1 基因片段 200至 2 × 108 拷贝检测结果成线性,在模板中加入小鼠基因组未出现非特异扩增,同时未影响扩增效率。结论 针对衣原体特异基因 OMP1 的实时定量 PCR 方法可以较为灵敏的特异的定量检测感染动物样本中的衣原体。
2011, 21(5):45-48+85. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.011
摘要:目的 探讨多种特殊染色法在骨关节组织中的染色规律及其在骨关节炎形态学研究中的应用价值。方法 6 月龄健康新西兰大白兔 20 只,随机分为正常组和造模组各 10 只,根据改良 Hulth 法造模,6 周后膝关节取材。对标本固定、脱钙后进行石蜡包埋和切片。分 别 采 用 HE、番 红-固 绿、AB-PAS、甲 苯 胺 蓝、Van Gieson 染 色 和Mallory 染色,观察骨关节组织的形态学变化,并对几种染色方法进行比较。结果 HE 染色显示关节一般组织形态结构,可见模型组关节软骨和软骨下骨发生骨性关节炎病理变化;番 红-固绿染色法中软骨和软骨下骨的界限( 黏合线)以及潮线显示清晰,软骨基质中糖胺聚糖含量减少,纤维成分增多;AB-PAS 染色显示骨关节炎软骨基质糖胺聚糖尤其是酸性糖胺聚糖含量减少;甲苯胺蓝染色显示骨关节炎软骨的酸性糖胺聚糖减少;Van Gieson 染 色 和Mallory 染色可显示骨关节组织中的胶原纤维,但组织结构界限不够清晰。结论 在骨性关节炎的组织形态学研究中,通过常规 HE 染色,结合番红 - 固绿染色法和 AB-PAS 染色法,能较客观全面地获得关节组织形态学相关信息。
2011, 21(5):49-52+84. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.012
摘要:目的对大鼠血管性痴呆双侧颈总动脉永久性结扎模型 ( permanent bilateral common carotid artery occlusion,2VO)进行改良,以提高模型动物存活率。方法 采取改良造模方法(间隔 7d 分 2 次结扎双侧颈总动脉)和传统的 2VO 方法(同时结扎双侧颈总动脉)建立血管性痴呆模型,观察并比较 2 种方法大鼠的存活率、学习记忆能力改变及病理形态学变化。结果 术后 7 d,改良模型组动物存活率(86. 7% )明显高于传统模型组(40. 0% ) ( P< 0. 05)。术后 8 w 与 12 w,与假手术组比较,两种方法模型组逃避潜伏期均明显延 长( P < 0. 05) ,而 改 良 法 与 传统法造模组之间相比较无显著性差异。HE 染色显示:改良法与传统法造模组的大鼠海马区神经元有相似程度的明显变性、坏死和凋亡。结论 2VO 改良造模法是降低大鼠血管性痴呆模型动物死亡率的成功方法,值 得 进 一 步研究、推广。
2011, 21(5):53-56. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.013
摘要:目的 考察超声波清洗器对大鼠的影响。方法 用 RM6240 多道生理信号采集处理系统,采用标准肢体二导联法测量正常状态和超声波清洗器工作时麻醉大鼠的心电图。结果 超声波清洗器打开后 2 min、15 min和 30 min 时,麻醉大鼠的心率显著增加,心 电 图 的 QRS 波群间期显著缩短。而超声波清洗器停止工作后 30 min时,大鼠心率和 QRS 波群间期基本恢复至正常。结 论 超声波清洗器工作时对大鼠心脏可产生一过性的不良影响。因此,在动物饲养或实验区内,超声波清洗器的放置应远离大鼠饲养室。
2011, 21(5):57-61. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.014
摘要:目的 建立实验犬及相关生物制品布氏杆菌的多重 PCR 检测与分型鉴定方法。方法 选择布氏杆菌 Omp2 基因同源性较高的区域设计引物对布氏杆菌进行多重 PCR 扩增,扩增结果一致的样本进行酶切以区分不同型,同时进行序列测定,以确定该方法的准确性;然后验证该方法的特异性和敏感性。结果 成功扩增得到目的条带,并通过酶切区分五种布氏杆菌;PCR 产物与布氏杆菌 DNA 序列同源性达到 99% ,并验证了该方法的检测结果。实验结果证明该方法特异性较好,灵敏性为 1. 8 × 10 - 7μg /mL。结论 成功建立布氏杆菌多 重 PCR 检 测 与 分型鉴定方法,所建立的方法特异性好,灵敏度高。本研究对保证实验犬群的质量,保 护 饲 养 人 员、实验人员的身体健康具有重要意义。
2011, 21(5):62-65. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.015
摘要:干细胞移植将成为或已经成为治疗多种疾病的一种重要方法,干细胞移植的成功率与干细胞增殖及扩增后干细胞的归巢能力密切相关,其过程受到许多细胞因子的调控。目前的研究发现白介素家族中的细胞因子IL1、IL2、IL3、IL4、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12 在干细胞动员过程中起到非常重要的调节作用。本文综述了这部分白介素家族成员的生物活性特征及其对干细胞动员的作用。
2011, 21(5):66-69. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.016
摘要:C 亚型是世界上流行的 HIV-1 主要亚型,带有 HIV-1 C 亚型 env 区的 SHIV 和相应的非人灵长类模型是研究人类艾滋病的有效工具。SHIV-1157i 及其衍生病毒能够成功地通过黏膜途径感染恒河猴和猪尾猴,并诱发艾滋病类似症状,而且恒河猴缓慢的发病进程与人类感染 HIV-1 相似。因 此,掌 握 SHIV-1157i 及其衍生病毒感染恒河猴的发病规律并探索其机制,将对研究人类 HIV-1 感染和发病机制,以及评价 HIV-1 C 亚型 env 区为靶点的艾滋病候选疫苗具有重要意义。
2011, 21(5):70-73+83. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.017
摘要:目的 调查滇西亚种树鼩体外寄生虫的自然感染状况,为建立树鼩质量控制标准提供依据。方法对野生的滇西亚种树鼩和自繁 F1 代树鼩各 60 只分别用尸检法和活体法检测,随即采用拔毛或用透明胶带粘取腋下、耳根、腹股沟、肛门附近等处的毛发制片,置于体视镜和显微镜下观察虫体和虫卵。结 果 野生滇西亚种树鼩和自繁 F1 代树鼩体外寄生虫自然感染率分别为:虱子 25% /6% 、蚤 5% /0、蜱 1. 6% /0、水 蛭 1. 6% /0、虱 子 和 蚤 混合感染 1. 6% /0。结论 野生树鼩体外寄生虫的自然感染多为虱子和蚤,其次 还 有 蝉、水 蛭,总感染率明显高于自繁 F1 代。使用灭虱灵对于驱除树鼩体外寄生虫具有较好的疗效。
2011, 21(5):74-76. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.018
摘要:目的 对西藏小型猪进行 10 种猪病(猪瘟、伪狂犬病、篮耳病、猪流感、圆环病毒感 染、细 小 病 毒 病、乙型脑炎、弓形体病、衣原体病和布氏杆菌病)的血清学调查。方法 采 用 ELISA 或凝集试验方法对 10 头 已 注 射猪瘟疫苗的原代( F0 代)母猪和 40 头 20 日龄乳猪、50 头 第 一 代( F1 代)3 ~ 5 月 龄 猪 进 行 10 种猪病的血清学检测。结果 猪瘟病毒、细小病毒和乙型脑炎病毒抗体阳性率分别是母猪 为 80. 0% 、80. 0% 、70. 0% ;20 日 龄 乳 猪 为45. 0% 、25. 0% 、45. 0% ;3 ~ 5 月龄猪为 4. 0% 、76. 0% 、80. 0% 。圆环病毒抗体阳性率母猪为 60. 0% ,20 日龄乳猪为 5. 0% 。3 ~ 5 月龄猪为 0% ;篮耳病病毒、伪狂犬病病毒、猪流感病毒、弓形体、衣原体、布氏杆菌在不 同 年 龄 西藏小型猪中抗体阳性率均为 0% 。结论 不同年龄西藏小型猪未受篮耳病病毒、伪狂犬病病毒、猪 流 感 病 毒、弓 形体病、衣原体病、布氏杆菌病感染。
2011, 21(5):77-80. DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2011.05.019
摘要:在艾滋病实验用猴动物实验中,兽医管理起着重要性的作用,包括实验用猴的挑选和质量控制,动物健康档案的建立和记录,兽医护理,麻醉药物和药品的管理和正确使用,实验期间的实验用猴疾病的预防和治疗,以及动物福利计划。