摘要:目的 制备兔抗 16 种鸟类的二级抗体，并进行辣根过氧化物酶标记，为鸟类血清学检测系统的建立提供工具。方法 采用水稀释法粗纯抗体后，再利用改良的饱和硫酸铵分级沉淀法，或亲和层析结合饱和硫酸铵沉淀法，或饱和硫酸铵沉淀法结合 SDS-PAGE 凝胶切胶纯化的方法进一步纯化鸟类的 IgY，利用纯化的 IgY 免疫大耳白兔制备抗血清，用免疫双扩散来检测抗血清的效价，并用 Protein A 亲和层析的方法来纯化兔抗鸟类的二级抗体，采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗鸟类的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记，通 过 ELISA 方法测定标记抗体的效价，并利用 Western blots 考察标记抗体 的 特 异 性。结 果 纯 化 了 灰 雁、鸬 鹚、鸵 鸟、小鹈、鸽 子、鹅、孔 雀、鹌鹑、贵妃鸡、草鹭、夜鹭、赤嘴潜鸭、燕鸥、长脚鹬、虎皮鹦鹉、翘鼻麻鸭等 16 种鸟类的 IgY，免疫双扩散法测定兔抗这16 种鸟类的抗血清效价均达到 1∶ 32，并对纯化的兔抗灰雁 IgY、兔抗鸬鹚 IgY、兔抗鸵鸟 IgY、兔抗小鹈 IgY、兔抗鸽子 IgY、兔抗鹅 IgY、兔抗孔雀 IgY、兔 抗 鹌 鹑 IgY、兔 抗 贵 妃 鸡 IgY、兔 抗 草 鹭 IgY、兔 抗 夜 鹭 IgY、兔 抗 赤 嘴 潜 鸭IgY、兔抗燕鸥 IgY、兔抗长脚鹬 IgY、兔抗虎皮鹦鹉 IgY、兔抗翘鼻麻鸭 IgY 等 16 种兔抗鸟类 IgY 的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记，ELISA 测定标记抗体的效价达到 1∶ 800 ～ 80000 左右，Western blots 显示标记抗体具有很好的特异性。结论 成功制备了辣根过氧化物酶标记的兔抗 16 种鸟类的二级抗体，为鸟类血清学检测体系的建立提供了工具。

摘要:目的 本实验以小鼠 T 细胞淋巴瘤细胞株 EL-4 细胞株为模型，研究淫羊藿素( icaritin，ICT) 是否抑制瘤细胞增殖，并初步探讨其作用机制。方法 应用 MTT 比色法、透射电镜技术及流式细胞术检测 ICT 对 EL-4细胞增殖能力的影响;用 RT-PCR 技术、比色法分析 ICT 的作用机制。结果 ICT 对 EL-4 细胞增殖具有明显抑制作用，并呈量效及时效关系。透射电镜及流式细胞术结果显示，ICT 可 诱 导 EL-4 细 胞 凋 亡。RT-PCR 显 示，ICT 作用于 EL-4 细胞后，bcl-2、P21 基因的 mRNA 表达下调，Caspase-3、Caspase-9 酶活性显著增强。结论 ICT 可抑制体外培养的小鼠 T 淋巴瘤 EL-4 细胞的增殖并诱导其凋亡，可能系通过下调 bcl-2、P21 mRNA 表 达，激 活 Caspase-3、Caspase-9 蛋白等途径实现的。

摘要:目的 为了进一步完善近交系小鼠遗传生化标记检测方法，对近交系小鼠过氧化氢酶-2 生化标记位点进行研究。方法 将 CBA /Ca 与 BALB / c 交配得到杂交 F1 代动物，同时将 CBA /Ca 与 C57BL /6 交配得到杂交 F1代动物，然后通过 F1 代动物之间的交配，以及 F1 代动物与母代的回交，得 到 F2 代 动 物，对 F2 代动物进行过氧化氢酶-2 生化标记检测。结果 在杂交 F1 代不表现的过氧化氢酶-2 的 b 型基因，在 F2 代出现。结论 近交系小鼠过氧化氢酶-2 遗传生化标记位点的等位基因 a 是完全显性的。

摘要:目的 分析未净化 Z:ZCLA 长爪沙鼠封闭群繁育和生长指标，并利用直接测序法分析其遗传稳定性。方法 随机选择 40 对 Z:ZCLA 长爪沙鼠，记录其繁殖胎次、产子数等指标，分析其仔鼠的生长发育情况。遗传稳定性分析选择 Z:ZCLA 长爪沙鼠非同胞、非亲代个体 33 只，提取肝脏基因组 DNA，PCR 扩增 D-Loop 序列，产物纯化后双向测序，测序结果与 Z:ZCLA 长爪沙鼠标准序列比对。结果 Z:ZCLA 长爪沙鼠每胎产仔 7 只，胎间隔多在20 ～ 60 d 间，雄性体重高于雌性。遗传稳定性分析检测发现 33 只 Z:ZCLA 长爪沙鼠序列与标准序列完全一致。结论 Z:ZCLA 长爪沙鼠群体内未发现遗传多态性，说明该群体具有较好的遗传稳定性。

摘要:目的 通过研究大豆异黄酮对雌鼠初情期等生殖性状的影响，为母鼠的安全饲喂提供实验依据。方法 本实验选用 210 只 21 日龄 ICR 雌鼠随机分成 3 组，饲喂含不同浓度大豆异黄 酮(0 mg / kg、50 mg / kg、400 mg /kg)的饲料。每日检查母鼠阴道开张和阴道栓情 况。采 集 母 鼠 45 和 65 日 龄 时 血 清，利 用 ELISA 方法检测血清中雌激素含量，并统计 45、65 日龄体重 和 子 宫 重。利用免疫组织化学方法检测子宫上皮雌激素受体的表达分布情况。结果 雌鼠阴道开张的平均日龄分别为 27. 2 d、26. 1 d 和 25. 8 d，400 mg / kg 组显著早于剂量为 0mg / kg 的 对照组(P ＜ 0. 05) ;雌鼠平均初次配种时间各组间差异不显著( P ＞ 0. 05) ;饲养到 45 日龄和 65 日 龄 时 400 mg / kg 组雌鼠体重显著高于对照组(P ＜ 0. 05)。喂养 8 周后两个试验组在子宫间质细胞上雌激素受体的阳性细胞表达率显著高于对照组;在腺上皮中 400 mg / kg 组显著高于 50 mg / kg 组和对照组(0 mg / kg) ;但是在腔上皮中，各组间 受 体的阳性细胞表达率差异不显著(P ＞ 0. 05)。结论 饲喂每公斤含 400 mg 大豆异黄酮的饲料可以刺激初情期前母鼠阴道的开张，提高雌鼠的体重，降低 65 日龄时血清 雌 激 素 含 量，并 在 饲 喂 8 周后影响子宫间质和腺上皮上雌激素受体的表达分布;而饲喂每公斤含 50 mg 大豆异黄酮的饲料仅对小鼠 45 日龄体重及饲喂 8 周后子宫间质上雌激素受体的表达分布有所影响。

摘要:目的 建立 F344 大鼠自发性非增殖性病变背景数据，为药物安全性评价提供基础。方 法 SPF 级F344 大鼠 336 只，雌雄各半，8 周龄，本中心屏障环境下饲养，随机分为 4 个组，分别于 6、12、18 和 24 个月 4 个时间点处死动物 32、64、64、176 只，常规病理学取材制片后显微镜检查，观察统计四个时间点动物自发性病变的病变类型和发病率。结果 主要的非增殖性病变包括乳头肌纤维化、肺细支气管旁慢性炎症、肾脏病变包括肾小管扩张、蛋白管型、肾小管萎缩和钙沉积等，睾丸精子生成障碍、卵巢生长卵泡数量减少等生殖器官组织的退行性改变等。结论 在本中心现有条件下，随动物生存期的延长，F344 大鼠自发性非增殖性疾病病变程度和发病率均有所增加。本实验丰富了 F344 大鼠自发性病变的背景资料，为药物安全性评价提供基础。

摘要:目的 剑尾鱼是由原良种委员会审定并由农业部公布的水生实验动物，在遗传学 研 究、水 环 境 污 染监测、细菌性疾病研究方面显示出较好的应用前景。为了对剑尾鱼选育系进行种质资源监测、区分选育系与非选育以及鉴定近交系纯度，本研究采用微卫星 DNA 进行水生实验动物剑尾鱼的指纹图谱构建。方 法 根 据 相 关 报道设计合成了 50 对微卫星引物，对几个剑尾鱼品系的种质资源进行检测，筛选品系间差异性引物;确 立 剑 尾 鱼 核心引物，用 EXCEL 散点图绘制 DNA 指纹图谱模式 图;并将数字化指纹数据输入珠江水产研究所鱼类种质鉴定软件 V1． 0，形成剑尾鱼标准化指纹图谱鉴定数据库。结果 共获得剑尾鱼品系间特异标记 5 个可用于剑尾鱼近交系鉴定，确立 46 个微卫星标记为核心引物，构建剑 尾 鱼 选 育 系 RR-B 系、RW-H 系和非选育的野生品种的 DNA 指 纹图谱。结论 本研究筛选出的微卫星标记与构建的指纹图谱，可 用 于 剑 尾 鱼 3 个品种间的品种鉴定、纯 度 检 测 及遗传监测。

摘要:目 的 通过研究吸烟对大鼠肺组织 B7-1 /B7-2 及其相关配体表达的影响，探 讨 专 职 抗 原 提 呈 细 胞(APC)在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中的作用。方 法 将 30 只 健 康 雄 性 Wistar 大鼠随机分为不吸烟组、吸烟 6 周组和吸烟 12 周组，每组 10 只。采用免疫组化半定量法测定大鼠气道周围肺间质中慢性炎症细胞胞膜 B7-1、B7-2、CD28和 CTLA-4 的表达水平。结果 吸烟 6 周组与吸烟 12 周组大鼠肺组织 B7-1、B7-2、CD28和 CTLA-4 表达量较不吸烟组均显著增高( P ＜ 0. 01) ，吸烟 12 周组较吸烟 6 周组表达量也均增高( P ＜ 0. 01) ，随吸烟时间的延长各指标表达量均呈上升趋势。结论 吸烟可引起大鼠肺组织 B7 /CD28 /CTLA-4 表达水平的增高，提示 APC 可能在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中起重要作用。

摘要:目的 研究 Cu2 + 和 SDS 对裸项栉鰕虎鱼仔鱼存活率的影响，了解裸项栉鰕虎鱼的毒性敏感性。方法 实验选取了五个不同日龄的仔鱼，设置了 8 个 不 同 Cu2 + 浓 度 水 平 和 7 个 SDS 浓 度 水 平，实 验 时 间 为 96 h。结果 日龄、Cu2 + 浓度和 SDS 浓度均对裸项栉鰕虎鱼仔鱼的存活率产生影响，随日龄的增加，各处理组仔鱼存活率均升高。结论 实验结果表明裸项栉鰕虎鱼用于生物毒性检测，具有比同类生物更宽的适用范围、更 适 宜 的 毒 性敏感性。

摘要:目的 探讨 IL-19 对哮喘大鼠气道平滑肌细胞( ASMCs) 增 殖 的 作 用。方 法 通过对大鼠进行雾化卵清蛋白，制备哮喘 模 型 大 鼠。提 取 哮 喘 大 鼠 ASMCs 进 行 培 养，分 别 以 1 μg /L、10 μg /L、100 μg /L IL-19 干 预ASMCs 生长。采用流式细胞仪、MTT 法检测 ASMCs 增殖情况，观察不同浓度 IL-19 对 ASMCs 增殖的影响。结果 与正常鼠相比，慢性哮喘大鼠 ASMCs 增殖明显，处于 S 期的细胞比例明显增高。经 10 μg /L、100 μg /L IL-19 干预后，慢性哮喘大鼠 ASMCs 处于 S 期的细胞比例减少，增殖亦减弱。且两组间比较有明显差异。而经 1 μg /L IL-19 干预后，慢性哮喘大鼠 ASMCs 处于 S 期的细胞比例及增殖均无明显变化。结论 一定浓度的 IL-19 可能抑制慢性哮喘大鼠 ASMCs 的增殖。

摘要:目的 研究结核分枝杆菌 Ag85B-Esat6-HspX 融合基因的免疫原性。方法 将 40 只 BALB / c 小鼠随机分成 4 组，NS 组、BCG 组、pcDNA-HspX 组 和 pcDNA-Ag85B-Esat6-HspX 组，每 组 10 只。BCG 组 只 在 0 周 时 皮 内注射卡介苗 1 次。NS 组、pcDNA-HspX 组及融合基因组分别于 0、2、4 周肌肉注射生理盐水和重组质粒 DNA，共 免疫 3 次。在免疫的第 2 周，4 周及最后一次免疫后 2 周检测体血清中的总 IgG 水平。同时，最后一次免疫后 2 周，取脾细胞检测细胞免疫反应。结果 构建的融合基因重组质粒 DNA 免疫动物后能产生针对结核杆菌特定抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答，具有 较 强 的 免 疫 原 性。结 论 结 核 分 枝 杆 菌 Ag85B-Esat6-HspX 融合基因可作为DNA 疫苗进行保护作用的研究。

摘要:目的 研究 WIP1 基因对小鼠骨髓 B 细胞发育及胸腺 T 细胞发育的影响。方法 流式细胞术测定小鼠骨髓 B 细胞及胸腺 T 细胞发育中各阶段的细胞比例。结果 虽然 WIP1 缺失小鼠骨髓 B 细胞发育各阶段比例正常，但骨髓总体 B 细胞比例下降;WIP1 基因敲除小鼠胸腺发育障碍，CD8 /CD4 双阴性细胞比例增高，CD8 /CD4 双阳性细胞比例降低。结论 WIP1 基因在小鼠骨髓 B 细胞及胸腺 T 细胞的发育过程中起重要作用。

摘要:目的 研究轴突生长抑制因子重组 DNA 疫苗对转基因阿尔茨海默症小鼠的预防治疗。方法 轴突生长抑制因子重组 DNA 疫苗肌肉注射 APP /PS1 双转阿尔茨海默症模型小鼠。设野生对照组、模型对照组、空载体对照组、疫苗组。水迷宫实验检测小鼠行为学差别。结果 疫苗组小鼠在 4. 5 月龄水迷宫实验中学习记忆能力较模型对照及空载体对照组有显著差异( P ＜ 0. 05)。结论 肌肉注射轴突生长抑制因子 DNA 重组疫苗能够改善小鼠学习记忆能力。

摘要:目的 建立白介素 34 转基因小鼠，研究该基因在小鼠中表达对小鼠免疫系统的作用。方 法 把 人的 IL34 基因插入 CMV 启动子下，构建转基因表达载体，通过显微注射法建立 IL34 转基因 C57BL /6J 小鼠。PCR 鉴定 IL34 转基因小鼠的基因表型，Western blotting 检测 IL34 蛋白的表达水平，组织化学染色观察 IL34 转基因小鼠重要器官的病理改变。结果 建立了 2 个品系的 IL34 转基因小鼠。转入的人 IL34 基因在脾脏中的表达水平高于内源性 IL34。组织学分析显示 IL34 转基因小鼠各重要器官如脑，心，肝，肾，肠等的形态结构均正常，但 脾 脏 的 生 发中心比较活跃，白髓的范围比野生型小鼠大。结论 成功建立了 IL34 转基因小鼠，IL34 基因的过度表达对免疫系统作用需要进一步探讨。

摘要:目的 比较关于家兔三种人工气道( artificial airway，AA)建立方法，为实验中快速建立家兔人工气道选择较好的方法提供参考。方法 选用新西兰大耳白兔共 30 只，随机均分为 3 组。分别采用气管切开法、经口明视气管插管法、经口盲探气管插管法建立人工气道，比较各组建立人工气道的时间，首次成功率及并发症发生情况。结果 经口盲探气管插管法建立人工气道的时间明显短于经口明视气管插管法和气管切开法，首次成功率由高到低依次是气管切开法、经口盲探气管插管法、经口明视气管插管法。经口盲探气管插管组并发症发生率最低，为(10 ± 5) % ，气管切开组和经口明视气管插管组并发症发生率分别为(20 ± 10) % ，(30 ± 10) % 。结论 经口盲探气管插管是现阶段建立家兔人工气道时值得优先考虑的方法，简便易行、可操作性强，成功率高。

摘要:猴腺病毒( simian adenovirus，SAdV)是猴类呼吸道和消化道的常在病毒之一，可引起肺炎、咽炎、肠胃炎、结膜炎等以粪口途径传播为主，主要感染猕猴、非洲 绿 猴、黑猩猩和狒狒等［1］ 属 腺 病 毒 科，哺乳动物腺病毒属。有学者认为 SAdV 感染有严格的种属特异性［1］，也有报道认为其种间交叉传播在非人灵长类中可能普遍发生，是动物传染病似的感染［2、3］。SAdV 是否感染人类尚未见报道，但已从猴的分泌物中发现了可能和人腺病毒( human adenovirus，HAdV)发生重组的新型腺病毒［4］。SAdV 与 HAdV 亲缘关系很近，感染引起的临床症状也相 似，是 人 腺病毒研究的理想模型。目前已经制定了研发猴腺病毒模型的目标，用于研究感染机制，促进腺病毒基因治疗和疫苗开发进程［3］。但猴腺病毒自然感染流行情况的研究依然很少。本 文 将 就 SAdV 的 发 现 与 分 类、生 物 学 特 性、感染特点及检测方法做一综述，为研究者提供一些有用参考。

摘要:microRNA 通过转录后水平调控细胞的蛋白质表达，在神经系统的发育、分化及功能行使中发挥着重要作用。阿尔茨海默病是一种以进行性认知功能障碍为特征的神经退行性疾病，患 者 脑 内 microRNA 的 表 达 发 生改变，异常表达的 microRNA 可从多种途径影响疾病的发生与发展，对 microRNA 在阿尔茨海默病中作用的研究不仅有利于疾病发病机制的诠释也有利于 microRNA 调控机制的探讨。

摘要:肝素结合性表皮生长因子( HB-EGF)是表皮生长因子家族成员之一。HB-EGF 是多种细胞的有丝分裂原，参与一系列生理和病理过程，包括心肌细胞肥大，成纤维细胞增生，胶原纤维表达增多，是心肌重塑发生发展过程中的一个重要生长因子。本文综述了 HB-EGF 在心肌重塑过程中的研究进展。

摘要:本文总结了在临床医学八年制的实验动物学科教学中的一些体会，提出了有关教学方法、教学内容、教学重点等方面的建议。希望为八年制医学生未来的科研工作搭建一座有效的桥梁，培养他们出色的科研创新能力。