摘要:目的 制备兔抗 17 种哺乳动物的二级抗体，并进行辣根过氧化物酶标记，为哺乳血清学检测系统的建立提供工具。方法 利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后，再利用 protein A 或 protein G 亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的 IgG，免疫大耳白兔制备抗血清，利用免疫双扩散来检测抗血清的效价，并用 Protein A 亲和层析的方法来纯化兔抗哺乳动物的二级抗体，采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗哺乳动物的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记，通过 ELISA 方法测定标记抗体的效价，并利用 Western blot 方法考察标记抗体的特异性。结果 纯化了恒河猴、东北虎、布氏田鼠、黑线姬鼠、斑羚、原驼、果子狸、食蟹猴、梅花鹿、长爪沙鼠、马鹿、骆驼、大仓鼠、豚鹿、熊猴、大耳羊和雪貂等 17 种哺乳动物的血清 IgG，分别免疫大耳白兔制备了这 17 种哺乳动物的兔抗血清，免疫双扩散法测定兔抗这 17 种哺乳动物的抗血清效价均达到 1 ∶ 32，并对纯化的兔抗恒河猴 IgG、兔 抗 东 北 虎 IgG、兔 抗 布 氏 田 鼠IgG、兔抗黑线姬鼠 IgG、兔抗斑羚 IgG、兔抗原驼 IgG、兔抗果子狸 IgG、兔抗食蟹猴 IgG、兔抗梅花鹿 IgG、兔抗长爪沙鼠 IgG、兔抗马鹿 IgG、兔抗骆驼 IgG、兔抗大仓鼠 IgG、兔抗豚鹿 IgG、兔抗熊猴 IgG、兔抗大耳羊 IgG 和兔抗雪貂 IgG等 17 种哺乳动物的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记，ELISA 测定标记抗体的效价达到 1 ∶ ( 2000 ～ 60000) 左右，Western blots 显示标记抗体具有很好的特异性。结 论 成 功 制 备 了 HRP 标 记 的 兔 抗 17 种哺乳动物的二级抗体，为哺乳动物血清学检测体系的建立提供了工具。

摘要:目的 对长爪沙鼠线粒体 ATPase8，ATPase6，COX3 基因全序列进行测定，并对其进行鉴定及进化分析。方法 根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物，采用 PCR 产物测序法，对目的片段进行测序鉴定。结合 已 公 布啮齿类动物 ATPase8，ATPase6，COX3 基因序列，分析其 碱 基 组 成、遗 传 距 离、并基于最小进化法和 UPGMA 法 构 建系统进化树。结果 获得长爪沙鼠线粒体 ATPase8，ATPase6，COX3 基因全序列，其与家鼠、小家鼠和仓鼠均具有较高的同源性( 76 ～ 98% ) ; 进化分析结果显示，长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠遗传距离较近; 碱基 G 的含量分 别 为6. 9% ，10. 7% ，15. 2% ，符合 mtDNA 的特点; A + T 含 量 分 别 为 68. 2% ，64. 1% ，59. 2% ，明 显 低 于 G + C 含 量，符 合哺乳动物的特点。结论 本研究为首次获得长爪沙鼠 ATPase8，ATPase6，COX3 基因全序列，长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠具有较近遗传距离，本研究为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。

摘要:目的 利用荧光素酶基因标记的人胰腺癌细胞株 Capan-2 建立胰腺癌裸鼠移植模型，评价生物发光和小动物超声成像在移植瘤模型建立中的作用。方法 将表达荧光素酶基因的真核表达载体转入人胰腺癌细胞Capan-2，将 1 × 106 人胰腺癌细胞悬液分别接种于裸鼠胰腺和右后肢皮下，使其成瘤。生物发光成像和小动物超声成像系统观察肿瘤的生长情况。结果 肿瘤细胞原位移植成功率为 75% ，皮下移植成功率为 100% 。生物发光成像系统在肿瘤细胞原位接种第 7 天，可以观察到肿瘤发光; 小动物超声成像系统在肿瘤细胞皮下接种第 7 天，可以测量肿瘤的大小，但在肿瘤细胞原位接种的第 7 天不能测量肿瘤的大小。另外肿瘤细胞在裸鼠皮下生长的速度比原位生长速度快 3 倍左右。结论 生物发光成像系统更适用于肿瘤早期监测，为深入研究胰腺癌的发生发展、侵袭转移机制提供理想工具。

摘要:目的 测定黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化参数，比较两者的差异，为医学实验研究提供参考。方法 用眼球取血的方法采集动物全血，分别制备抗凝血和血清，应用全自动生化分析仪和全自动血细胞分析仪进行测定。用 SPSS10. 0 软件包对测定结果进行分析。结果 测定了黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化正常值范围，并与其它动物的数据进行了比较。结论 确定了黑线仓鼠与其白化突变系的血液生理生化正常值范围，两者在多项指标上存在差异。而且，黑线仓鼠及其白化突变系的血小板计数均高于小鼠，约 高 出 3 倍，这 一差异可能有利于两者作为血液凝集实验模型的研究。

摘要:目的 建立饮食诱导非酒精性脂肪肝病( NAFLD) 合并高血糖动物模型并观察其特点。方法 将 64只 SD 大鼠随机分为 2 组。正常对照组( 用普通饲料饲喂) 32 只，高糖高脂组( 饲以高糖高脂饲料) 32 只，连续喂养12 个月。于实验第 3 月末、第 6 月末、第 9 月末、第 12 月末观察动物体重、内脏脂肪重量; 比较血液中有关血脂、血糖、炎症介质等方面的生化指标以及组织病理学观察。结果 与正常对照组相比，各阶段高糖高脂组大鼠体重、内脏脂肪重量明显增加; 血清 ALT、FFA、LPS、TNFα、FPG、FINS 和 HOMA-IR 的 水 平 都 升 高，其差异有统计学意义; 而HOMA-β 以第六个月出现代偿性增强后进行性衰退。病理组织学显示肝脏发生严重的脂变、脂肪肝进而发生肝炎、纤维化及肝硬化; 随时间进展胰岛逐渐萎缩并伴有炎性浸润; 脂肪细胞逐渐增大并伴有炎性浸润。结论 高糖高脂饮食可建立大鼠 NAFLD 合并高血糖动物模型，该模型可在 NAFLD 和相关的糖尿病研究中发挥作用。

摘要:目的 克隆及原核表达西藏小型猪瘦素( Leptin) 成熟肽及瘦素受体胞外区片段。方 法 根 据 西 藏小型猪瘦素序列( GenBank 号: GQ240885. 1) 和猪瘦素受体基因胞外 域 序 列( GenBank 号: AF167719. 1) 分 别 设 计 并合成两对引物扩增瘦素、瘦素受体基因胞外域编码区 1654 － 2319 位片段，以西藏小型猪组织总 RNA 为模板，经反转录-聚合酶链反应( RT-PCR) 方法获得了特异性片段。再以该两个特异性片段为模板，另外设计两对带有 BanHⅠ和 HidⅢ酶切位点的套式引物分别扩增瘦素 64-504 位( 成熟肽编码区) 和瘦素受体基因胞外域编码区 1655 － 2314位的 cDNA 片段，将该两片段克隆入 pMD18 -T 载体并转化感受态 细 菌 E． coli DH5α 测序并永久保存。此 两 片 段 经酶切后克隆到表达载体 pRSET A 的 BamHⅠ和 HindⅢ两酶切位点之间，构建重组质粒 pR-OB 和 pR-OBR-a 并在大肠杆菌 E． coli BL21( DE3) 中表达，SDS-PAGE 电泳鉴定表 达 产 物。结 果 在 IPTG 诱导下促使重组菌 pR-OB 表 达了相对分子质量约 18 × 103 左右的融合蛋白; 重组菌 pR-OBR-a 表达了相对分子质量约 27 × 103 左右的融合蛋白。结论 说明重组质粒 pR-OB、pR-OBR-a 在大肠杆菌 BL21 ( DE3) 中分别可表达西藏小型猪瘦素成熟肽瘦 素 受 体片段蛋白，为进一步研究瘦素、瘦素受体功能和应用提供了基础。

摘要:目的 通过对猕猴脱毛的相关营养学指标的比较分析，为改善人工饲养猕猴脱毛状况及其防治提供参考数据。方法 根据被毛状况分组 A、B、C，采集试验猴被毛和血清，测定其微量元素和氨基酸以及血清矿物元素，对各组相应指标进行比较分析。结果 各组 试 验 猴 被 毛 Cu、Fe 含量无显著性差异( P ＞ 0. 05) ，但 Mn、Zn、Pb、As 则均有极显著性差异( P ＜ 0. 01) 。被 毛 脯 氨 酸、缬 氨 酸、氨 和 精 氨 酸 的 含 量 A 组 和 B 组 极 显 著 低 于 C 组( P ＜0. 01) ，酪氨酸含量则是 A 显著低于 B 组( P ＜ 0. 05) ，且 极 显 著 低 于 C 组( P ＜ 0. 01) ，B 组 又 显 著 低 于 C 组( P ＜0. 05) ; 胱氨酸含量 C 组高于 A 组和 B 组( P ＜ 0. 01) ; 苯丙氨酸含量是 B 组高于 C 组( P ＜ 0. 05) ，且高于 A 组( P ＜0. 01) ，C 组又高于 A 组( P ＜ 0. 05) ; 赖氨酸、组氨酸和氨基酸总量含量是 C 组 高 于 A 组( P ＜ 0. 05) 和 高 于 B 组( P＜ 0. 01) ，A 组高于 B 组( P ＜ 0. 05) ，其余氨基酸均无显著性差异( P ＞ 0. 05) 。A、B 组的血清 Mg、P、Cu 和 Ca 的含量高于 C 组，其余矿物元素的含量基本一致。结论 Mn 过 量、Zn 的供给不足可能是影响人工饲养猕猴被毛质量的因素; 胱氨酸对改善猕猴被毛品质、提高被毛质量应该有一定作用; 高营养水平的 Ca、Mg、P 和 Cu 可能会影响人工饲养的猕猴的被毛质量。

摘要:目的 应用逆行输尿管导管灌注凝血酶溶液观察大鼠肾脏出血肉眼血尿局部止血的疗效。方 法通过单侧肾穿刺配合全身肝素化制备大鼠肾脏出血肉眼血尿模型。32 只 SD 大鼠模型随机分作 4 组，分 别 以 低、中、高三种不同浓度的凝血酶及生理盐水经输尿管导管行该侧肾盂逆行灌注。检测灌注前及灌注后各组大鼠尿红细胞计数值、外周血血色素水平、出血时间、凝血时间及血肌酐水平等指标。结果 三种不同剂量的凝血酶溶液组灌注后尿红细胞计数水平与生理盐水对照组相比均有显著差异( P ＜ 0. 05) ; 其中凝血酶溶液中、高剂量组给药后 5min 及 40 min 尿红细胞计数水平均显著低于低剂量组( P ＜ 0. 05) ; 不同剂量的凝血酶溶液组与生理盐水对照组在灌注后 40 min 检测的大鼠外周血血色素水平比较均有明显差异( P ＜ 0. 05) ; 其 中 凝 血 酶 中、高剂量组灌注后 40min 大鼠外周血血色素水平显著高于低剂量组( P ＜ 0. 05) 。灌注凝血酶溶液前、后的出血时间、凝血时间及血肌酐水平均无明显变化( P ＞ 0． 05) 。结论 逆行灌注凝血酶溶液对大鼠肾穿刺术后严重的肾出血有明显迅速的止血效果，且有一定的量效依存关系; 同时对大鼠凝血功能及肾功能未发现明显影响。

摘要:目的 分析比格犬下丘 脑-垂 体-性 腺 轴，雌 二 醇 β 受体剪切异构体的存在情况。方 法 根 据 NCBI数据库上的比格犬雌二醇受体的基因序列，设计两对特异性引物，以比格犬的卵巢、子宫、下丘脑和垂体的总 RNA为模板进行反转录，并利用两对特异性引物扩增比格犬雌二醇受体的基因，对其中的主要条带进行克隆测序。结果 获得了比格犬雌二醇受体的全长 cDNA 序 列，对主要条带进行克隆测序的结果表明，该序列是一种比格犬雌二醇受体的剪切异构体。结论 比格犬雌二醇 β 受体剪切异构体与小鼠和人的组成有较大的不同，需要进一步系统研究。

摘要:通过对一例恒河猴颊囊肿块临床症状表现、剖检肉眼观察及光学显微镜组织病理形态变化观察，发现该病猴颊囊病灶组织病变具有与人鳞状细胞癌相似的典型特征，确诊为颊囊鳞状细胞癌，可为判断非人灵长类动物肿瘤性疾病提供一定的病理诊断依据。

摘要:目的 通过电子芯片植入与识别技术和计算机管理系统对接，建立每只实验猴的数据档案，其 中 包括遗传谱系、生理数据、实验记录。方法 通过建立实验猴的电子通道，以非接触方式通过计算机管理，应 用 射 频识别信号系统，实现实验猴身份快速自动识别、自动 捕 捉、数 据 读 写、电子档案信息管理、数据远程传输的目的，减少人为因素对实验猴的干扰和引起的应激反应。结果 该系统的建立极大的减少了实验和饲养实验猴过程中捕捉猴的困难，身份识别困难，减少了对工作人员和实验猴的伤害，减 轻 了 工 作 量，减低了人为因素对实验结果的干扰和动物应激反应对实验数据的影响。电子档案具有终身有效，随猴携带，全球唯一序列号，不可复制，不可仿制，标签唯一性。结论 实验猴身份自动识别、自动捕捉、电子芯片数据信息管理系统的研制成功，为实验动物个体电子档案建立和群体数据库的管理提供了一种高速、有 效、科 学、可靠的计算机管理手段，改变通道模式即可应用于大型凶猛动物或不适合人接触捕捉动物的识别和管理，具有广泛的应用前景，目前在国内外尚无同类系统。

摘要:目的 探讨瘦素和转化生长因子 β1 ( transforming growth β1，TGF-β1 ) 在肝纤维化发生、发展过程中的作用。方法 雌性 Wistar 大鼠随机分为正常对照组和纤维化模型 1 周组、2 周组、4 周组、6 周组。纤维化模型各组以 CCl4 造成化学性肝损伤。常规 HE 染色观察肝脏病变; 检测血浆和肝组织瘦素及 TGF-β1 水平; 天狼猩红胶原染色和肝组织羟脯氨酸( Hyp) 含量测定观察肝纤维化程度，并对肝组织瘦素水平、TGF-β1 水平及肝纤维 化 指 数( FI)进行相关性分析; 赖氏法测定血浆丙氨酸氨基转移酶( ALT) 。结 果 与正常对照组比较，纤维化模型各组血清和肝组织瘦素和 TGF-β1 水平显著升高( P ＜ 0. 05) ，且纤维化模型各组肝组织瘦素水平、TGF-β1 水 平 及 FI 之 间 两 两均呈显著正相关。结论 肝组织瘦素在肝纤维化发病过程中具有独立的致病作用，并可能通过激活 TGF-β1 通 路导致肝维化的形成。

摘要:目的 建立检测血清中猴泡沫病毒( SFV) 抗体的间接免疫荧光方法，为检测实验用猴群中 SFV 的感染情况提供参考依据。方法 用 SFV-1 病毒感 染 BHK-21 细 胞，待 50% 细胞出现病变时，用胰蛋白酶消化细胞后以 2 × 107 /mL 浓度 40 μL 的细胞滴到 10 孔镀膜的玻片上，丙 酮 固 定。利用制备的抗原片通过间接免疫荧光法对34 份猴血清标本进行检测。结果 建立了检测 SFV 抗体的间接免疫荧光染色方法，SFV 抗 体 阳 性 19 例，15 例 血清检测为阴性。结论 本方法具有良好的特异性，可作为 SFV 检测的可靠方法。

摘要:目的 建立一种快速定量检测季节性流感病毒 H1N1 核酸的实时荧光定量 PCR 检测方法及试剂盒。方法 选择季节性流感病毒 H1N1 的保守基因 NP 基因作为检测靶目标，应用 Clustal W 软件进行序列同源性比对分析，筛选出季节 性 流 感 病 毒 H1N1 特异性的保守序列作为引物候选区域，然 后 应 用 Primer Express 及 PrimerPremier 5. 0 软件包对候选引物进行进一步配对及筛选，得到最优特异性检测引物。同 时，由 病 毒 全 长 cDNA 扩 增出 NP 基因，琼脂糖凝胶电泳检测 NP 基因的扩增情况并对目的条带进行切胶回收及纯化，对 回 收 后 的 NP 全 长 基因进行核酸浓度测定，并换算成拷贝数，作为定量标准品。结果 应用 ABI 公司的 Power SYBR Green PCR MasterMix 及 StepOne 实时荧光定量 PCR 仪，该检测系统 灵 敏 度 可 达 102 copies/μL，不同梯度标准品间线性关系( R2) 达0. 999，斜率为 － 0. 3433，扩增效率为 95. 572% ，所有标准品 均 在 83. 2℃ 出现尖且窄的特异性熔解峰。结 论 利 用该检测系统可以快速定量检测季节性流感病毒 H1N1，灵 敏 度 高，可用作基础及临床实验室对季节性流感病毒H1N1 感染的辅助诊断方法和临床效果的监测手段，对实验操作者要求相对较低，具有实际的应用价值。

摘要:目的 探索并建立豚鼠光过敏试验的方法。方 法 采 用 TBS 作为阳性对照物，同时设立阴性对照组。分别于第 1 天、第 4 天、第 7 天对豚鼠皮肤进行 UV-A 紫外光诱导，诱导剂量紫外光强度为 30 J/ cm2; 于第一次诱 导后 28 d 对豚鼠皮肤采用 UV-A 紫外光激发，激发强度为 9 J/ cm2。结果 阴性对照组 24 h、48 h、及 72 h 豚鼠光过敏试验阳性率均为 0，阳性对照组为 24 h、48 h、及 72 h 豚鼠光过敏试验阳性率均为 100% 。结论 本研究成功建立了豚鼠皮肤光过敏试验模型，TBS 可作为阳性对照物。

摘要:目的 探讨制作大鼠尾巴标本石蜡切片的方法。方法 采用盐酸脱钙液运用两种脱钙方法制作大鼠尾巴标本石蜡切片。结果 两种方法制作的石蜡切片完整、无 破 碎，HE 染色观察组织结构细胞形态完整，核 浆分明，红蓝适度。结论 两种方法都能制作理想大鼠尾巴标本石蜡切片，可保证病理诊断质量。

摘要:心力衰竭是一种复杂的临床症候群，它是各种心脏病的终末阶段，发病率及病死率均较高，严重危害着人类健康，为了广泛深入地研究和治疗心力衰竭，迫切需要建立该病的动物模型。本综述复习了近年来文献，介绍目前较为成熟的心力衰竭动物模型的应用，同时比较之间的优缺点。