摘要:目的 建立呼肠孤病毒Ⅲ型( Reo3) 免疫荧光( IFA) 检测方法，应用于人用动物源性生物材料及生物制品外源 Reo3 的检测。方法 滴定病毒 TCID50，筛选 Reo3 敏感细胞，依据国标 IFA 法制备抗原片，方阵法滴定免疫荧光素最佳工作浓度。并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果 选 取 BSC － 1 细 胞 作 为 Reo3 敏 感 细 胞，病毒感染力滴度( TCID50 ) 为 10 － 5. 8 /mL; 免疫荧光素最佳工作浓度为 1∶ 100; 与小鼠鼠痘( Ect) 病毒、小鼠肝炎( MHV)病毒均无交叉反应; 稳定性和敏感性试验显示，不同时间 IFA 检测灵敏度均为 1∶ 1280; 可检测到的病毒滴度最低为10 － 4. 1 /mL。结论 建立的 IFA 法敏感性、特异性强，稳定性好，可用于人用动物源性生物材料及生物制品 Reo3 的检测。

摘要:目的 建立甲型流感病毒 H3N2 感染的雪 貂 动 物 模 型。方 法 按实验要求筛选出流感抗体反应阴性的雪貂，经兽用氯胺酮轻度麻醉后进行滴鼻感染 H3N2 流 感 病 毒 株 A /Brisbane /10 /07，设立两个稀释度 106 和107 TCID50，每个稀释度接种 3 只雪貂，感染后第 5 天安乐处死。感染前采集鼻甲骨活检，感染后 1 ～ 5 d 鼻甲骨活检检测病毒载量，每天记录雪貂一般临床变化。处死时取雪貂肺、肝、脾、小肠、脑组织作病毒滴度检测，肺组织做病理检查。结果 106 和 107TCID50的 H3N2 病毒分别感染雪貂，没有雪貂死亡。雪貂感染后都出现一过性的体温升高，体重的下降，流涕、打喷嚏等症状。在鼻甲骨活检物中可测到病毒载量，肠组织可分离到病毒。肺 组 织 以 轻 度性间质性肺炎为主要病理变化。结论 雪貂感染 H3N2 病毒株 A /Brisbane /10 /07 后，临床表现、病毒 学、分 子 生 物学、病理学方面的检测都可以证实雪貂感染 H3N2 病毒动物模型已建立，其中 106 TCID50 病毒滴度的是一个建立感染动物模型比较合适的剂量。

摘要:目 的 对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的心肌、肾脏组织中的血管紧张素 Ⅱ1 型 受 体( AT1R) 在 mRNA 和受体水平的表达进行检测，探讨 AT1R 与盐敏感性高血压的关系。方法 用乳鼠皮下注射辣椒辣素法建立模型。哺乳期后，大鼠被随机分成 4 组: 对照 + 正常盐饮食组( CON-NS) ; 对 照 + 高 盐 饮 食 组( CONHS) ; 辣椒辣素 + 正常盐饮食组( CAP-NS) ; 辣椒辣素 + 高盐饮食组( CAP-HS) 。至 7 周龄( 分组 饲 养 后 第 4 周)处死大 鼠，免疫组织化学方法和反转录-聚合酶链式反应 ( RT-PCR) 分别检测大鼠心肌和肾脏 AT1R 蛋 白，以 及AT1R mRNA 的表达。结果 ①Wistar 大鼠在给予不同程度的感觉神经损伤和饲料干预后，各组大鼠尾部收缩压均有明显增加，最终 CAP-HS 组的尾收缩压显著高于其他三组( P ＜ 0. 01) 。②免疫组织化学结果显示，CAP-HS 组 组织有显著的 AT1R 蛋白表达( P ＜ 0. 01) ; CON-HS 组肾 脏、心 肌 组 织 中 AT1R 蛋 白 表 达 高 于 CON-NS 组( P ＜ 0. 05) 。③RT-PCR 检测基因表达，与对照组 CON-NS 相比，实验组 CAP-HS 的 AT1R mRNA 表达显著升高( P ＜ 0. 01) ; CONHS 组肾脏、心肌组织中 AT1R mRNA 表达有显著性( P ＜ 0. 05) 。结 论 感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾 AT1R 表达升高，AT1R 表达水平的差异可能与盐敏感性高血压的形成有关。

摘要:目的 mir-153 可负调控阿尔茨 海 默 病( Alzheimer’s disease，AD) 主 要 致 病 基 因 APP 及 APLP2 的 蛋白表达，降低其胞内降解片段( intracellular domains，ICDs) 的生成。因 ICDs 具有转录活化及促凋亡活性，本研究旨在探讨 mir-153 对这两个靶基因下游信号分子 GSK-3β 表达水平及细胞抗损伤能力的影响，以期进一步阐明 mir-153 在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法 构建 mir-153 稳转细胞系及 mir-153 转基因小鼠，Western blot 检测该细胞系及小鼠脑内磷酸化 GSK-3β、Tau 及其总蛋白的表达; Aβ42 肽 和 H2O2 分 别 处 理 mir-153 稳 转 细 胞 系，MTS法检测细胞增殖活性的改变，流式细胞术检测细胞凋亡水平的改变。结果 mir-153 稳转细胞系中磷酸化 GSK-3β及其总蛋白的表达下调，Tau 磷酸化水平降低。mir-153 转基因小鼠脑内，磷酸化 GSK-3β 及其总蛋白的表达降低，磷酸化 Tau 及其总蛋白水平均无明显变化。Aβ42 肽 和 H2O2 损 伤 作 用 下，mir-153 稳转细胞系的增殖活性显著降低，凋亡水平增加。结论 mir-153 可负调控靶基因下游信号分子 GSK-3β 的表达; 高表达 mir-153 可降低细胞抗损伤的能力。

摘要:目的 探讨 4 种不同品系小鼠在 3 种实验( 空场实验、悬尾实验及强迫游泳实验) 中的行为学差异，为抗抑郁新药研究中的实验动物选择提供参考。方法 利用空场实验检测 C57BL /6、BALB / c、ICR、和昆明小鼠的自主活动能力和对新奇环境的探索能力; 利用悬尾实验和强迫游泳实验检测它们在应激刺激下的行为绝望状态。结果 在空场实验中，BALB / c、ICR 和昆明小鼠的运动总路程、运动速度和运动时间明显高于 C57BL /6 小鼠( P ＜0. 05) ，ICR 和昆明小鼠的直立次数也明显高于 C57BL /6 小鼠( P ＜ 0. 05) ; 悬尾实验 C57BL /6 小鼠的不动时间显著长于其他 3 种品系小鼠( P ＜ 0. 05) ，但 是 4 种品系小鼠在强迫游泳实验中的不动时间差异无显著性。结 论C57BL /6 小鼠自发活动量低，对新奇环境的探索能力差，并且在急性应激刺激下容易造成行为绝望，因此 C57BL /6 小鼠可能适合作为急性应激抑郁模型动物。

摘要:目的 比较广州地区西藏小型猪、五指山小型猪和巴马小型猪血液生理生化指标的差异。方法 全自动血液细胞和生化分析仪测定 24 个血液生理生化指标。结果 24 个指标中，血红蛋白、白细胞、单核细胞、血细胞比容、葡萄糖指标的测定差异显著; 淋巴细胞、中性粒细胞、平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白、血清总蛋白、血清清蛋白、血尿素氮、血肌酐指标的测定差异极显著。其中血红蛋白、血细胞比容、平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白、血清总蛋白、血清清蛋白、血尿素氮、血肌酐指标以西藏小型猪最高，白 细 胞、淋巴细胞指标以五指山小型猪最高，而中性粒细胞、单核细胞、葡萄糖指标以巴马小型猪最高。结 论 三种小型猪血液生理生化指标的比较，为建立小型猪生物学特性数据库提供了理论依据。

摘要:目的 研究国内食蟹猴种群的遗传背景特性，建立食蟹猴种群遗传质量监测方法。方法 采用微卫星 DNA 遗传标记技术对 50 只食蟹猴种群个体进行遗传质量监测及 DNA 多 态 性 分 析。结 果 从 100 个 微 卫 星DNA 位点中筛选出 20 个多态性高的位点，其食蟹猴种群个体的等位基因数目为 5 － 10 条，个体间均呈现高度的多态性; 其观察等位基因数( Na) 为 5. 0 ～ 10. 0，有效等位基因数( Ne) 为 4. 6118 ～ 8. 3404，基因多样性( H) 为 0. 7832 ～0. 8801 和香隆信息指数( I) 为 1. 5651 ～ 2. 1592。结论 本实验有效地分析了食蟹猴种群的遗传多态性，为 今 后 筛选特异性微卫星位点来建立食蟹猴种群遗传质量监测方法提供了理论依据。

摘要:目的 研究医学手术实验用小型猪体外循环下心脏手术的麻醉管理及麻醉效果。方 法 实 验 用 小型猪 34 例，分为 CPB 下停跳组手术组( 停跳组，18 例) 及 CPB 下并行手术组( 并行组，16 例) ，行自体心包片三尖瓣置换术。记录实验中麻醉药物及血管活性药用量，基础 麻 醉、麻醉维持及麻醉苏醒时间，术 后 3 天、一 周 存 活 状 况等，并评价基础麻醉及全麻效果。结果 34 例均在全麻下顺利完成手术，各期血流动力学平稳，仅停跳组一例术后3 天内死亡，存活率 97. 1% ，麻醉效果良好。结论 合理的麻醉药物与血管活性药物的联合应用，仔细的临床观察与正确而迅速的处理是小型猪体外循环下心脏手术麻醉的关键。

摘要:目的 用改进后的方法提取高质量的 RNA，以 此 为 模 板，应 用 T-A 克 隆 法 克 隆 C57BL /6J 小 鼠 周 脂素基因编码区，对其进行测序验证，并与 GenBank 比对。方 法 在试剂说明书基础上，改进提取脂肪组织 RNA 的方法，从 C57BL /6J 附睾脂肪组织提取高质量的总 RNA，用 RT-PCR 扩增出周脂素编码区基因，并将目的基因编码区克隆入 pMD18-T 载体中，转化 E． coli JM109 后，筛选阳性克隆，通过限制性内切酶酶切鉴定后，对其进行测序验证，并与 GenBank 比对。结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总 RNA，并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列，与 GenBank 公布的序列一致。结论 改进的后的脂肪组织 RNA 提取方法是可行的，并获得周脂素基因的 cDNA，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

摘要:目的 研究长爪沙鼠脑底动脉 Willis 环遗传特性，并定向培育脑缺血高发种群。方法 通过对 5 代定向培育的长爪沙鼠高发群动物共 398 只动物的右侧颈总动脉结扎模型进行观察，比较长爪沙鼠亲代与子代间脑底动脉 Willis 环的变异缺失类型，探求其遗传特性，并根据该遗传特性将 Willis 环后交通支缺失且前交通支缺失或细小的同类型的长爪沙鼠父母所生的子代雌雄个体配对繁殖，定向培育长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群。结果 当双亲的 Willis 环类型一致时，其子代大部分与其父母一致; 而当双亲的 Willis 环类型不一致时，Willis 环前交通支与母亲一致率为 60. 4% ，前交通支与父亲的一致率为 48. 2% ，两者的差异有显著性意义( P = 0. 015) 。长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群定向培育 5 代后，行单侧颈总动脉结扎时，一侧脑缺血造模成功率由 F1 代的 40% 提高到 F5 代的 75% 。结论 长爪沙鼠脑底动脉 Willis 环变异有明显的遗传性，初步培育出了长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群。

摘要:目的 分析高脂饮食导致的沙鼠 NAFLD 疾病进展中脂质代谢、肝功能、抗氧化等方面的变化，探讨沙鼠 NAFLD 的形成机理。方法 雄性沙鼠 120 只，随机分为对照组和模型组。对照组给予普通饲料，模型组高脂饮食建立 NAFLD 模型。分别于 1、2、4、6、8、16 周每组各处死 10 只动物，观察肝脏病理变化，计算肝指数，检测血清CHO、TG、LDL-C、HDL-C、GOP、GPT 及肝组织的 SOD、GSH-PX、CAT 活性和 FFA 含量。结果 模型组病理观察 2 周形成单纯性脂肪肝，6 周动物门管区有轻度炎症，8 周出现腺泡Ⅲ带局灶性窦周 /细胞周纤维化，16 周肝脏中度纤维化; 模型组第 1、2、4、6、8、16 周 时 CHO、HDL-C、LDL-C 及 FAA 波 动 性 升 高，但均高于同期对照组 ( P ＜ 0. 05，P ＜0. 01) ，TG 在 1、2、4 周高于同期对照组( P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) ; 16 周末 GOT、GPT 出现了显著性升高( P ＜ 0. 01) 。抗氧化酶 GSH-PX、CAT、SOD 活性模型组在第 8 ～ 16 周显 著 性 降 低( P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01) 。结 论 高脂饮食使沙鼠 2周形成单纯性脂肪肝模型后，随饲喂时间延长，16 周末可发展为中度肝纤维化。脂质代谢紊乱与氧化应激在沙鼠NAFLD 进展中的发挥了不同的作用。

摘要:目的 建立简单有效的内毒素 ( lipopolysaccharide，LPS) 致多脏器功能障碍综合征 ( multiple orgen dysfunction syndrome，MODS) 绵羊模型，观察其血气、血常规和血清生化等的变化特点。方法 绵 羊 全 麻 后，3 μg / kg 和 6 μg / kg LPS 分别于 30 min 和 60 min 内静脉泵入实验 I 组和实验 II 组。以不同时点测定血气、血常规和血清生化的变化。结果 LPS 静注后，实验 I 组和 II 组绵羊的死亡率分别为 33. 3% 和 50% ; 两实验组 3 h 内氧合指数明显降低( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ; 不同时点天冬氨酸转氨酶( AST) 、丙氨酸氨基转移酶( ALT) 、总胆红素( TBIL) 和 肌酐( CRE) 明显升高 ( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ; 白 细 胞( WBC) 数 目 在 2 h 明 显 降 低，之 后 明 显 升 高( P ＜ 0. 05 或 P ＜0. 01) 。结论 两种剂量的 LPS 均能成功地建立绵羊 MODS 模型; 血气、血常规和血清生化等均有明显的变化。

摘要:目的 使用上肢精准测试系统对脊髓间充质干细胞治疗脑缺血的疗效进行行为学分析评价。方 法成年食蟹猴 18 只，手术前 2 个月用上肢精准测试系统对动物进行训练并采集本底数据。采用光化学法制作局部脑缺血模型，造模后 4 周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组，分别在缺血灶周围注射生理盐水、脊髓间充质干细胞 5 × 106 /只和 1 × 106 /只，造模后 1 d、3 d、1、2、3、4 周及干细 胞 注 射 后 1d、3 d、1、2、3、4、5、6、8 周采集行为学实验数据。比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢抓取水果块的时 间，结 合 神 经 功能评分评价造模和干细胞治疗效果。结果 18 只动物手术后均出现与梗死部位对应的行为学症状。在 术 后 采 集数据的各个时间点损伤侧上肢行为学数据与手术前差异均存在极显著性 ( P ＜ 0. 01) 。神经功能评分术后 24 h 最高，随后出现渐进性恢复。干细胞治疗后 3 d 到治疗后第 8 周，模型组动物与高、低剂量组动物间精准上肢运动测试结果差异均存在显著性 ( P ＜ 0. 05) 。神经功能评分在治疗 2 周后出现显著性差异( P ＜ 0. 05) 。高、低剂量 组 间差异未见显著性。结论 上肢精准测试系统能客观准确的反应动物神经功能，在非人灵长类脑卒中动物模型建立和药效学评价方面有广泛应用前景。

摘要:目的 评估经股动脉穿刺超选造影、静脉造影、心脏穿刺造影和左侧耳中央动脉穿刺造影方法显示弹性酶诱导的兔囊状动脉瘤的可行性。方法 取 10 只 新 西 兰 兔，采用弹性酶诱导方法制作兔右侧颈总动脉起始部囊状动脉瘤模型。术后 3 周对所有动物分别进行经股动脉穿刺超选造影、静 脉 造 影、心脏穿刺造影和左侧耳中央动脉穿刺造影，根据造影结果测量动脉瘤短径、长径 和 瘤 颈 宽。采用重复测量设计的方差分析方法比较不同造影方法显示的动脉瘤相关参数测量结果差异。结果 采用经股动脉穿刺超选造影、静 脉 造 影、心脏穿刺造影和左侧耳中央动脉穿刺造影方法均能较清楚的显示的动脉 瘤，比较不同造影方法测量的动脉瘤短径、长径和瘤颈宽均无统计学差异( P 值分别是 0. 646，0. 427 和 0. 625) 。结论 不同的造影方法均能较准确显示弹性酶诱导的兔囊状动脉瘤大小，根据不同的实验目的和条件可选用不同的造影方法。

摘要:目的 研究比格犬垂体囊肿自发性病变的发生情况，以 建 立 适 用 于 GLP 的实验动物背景资料。方法 采用常规组织学方法，对 60 只 8 ～ 10 月龄实验对照组比格犬垂体进行组织病理学检查，光学显微镜下描述垂体囊肿的组织形态学特点并统计其发生率。结果 囊肿多出现在垂体的远侧部，囊壁由一层扁平或立方状上皮构成，囊腔内可见黏液状物; 囊肿总体发生率为 23. 3% ，其中雌性为 13. 3% ，雄性为 33. 3% 。结论 应加强比格犬自发病变的病理监测，为药物安全性评价提供实验动物的背景资料。

摘要:目的 观察同种异体骨髓间充质干细胞( MSCs) 移植对放射性空肠的修复作用。方法 全骨髓贴壁体外培养大鼠 MSCs 并进行 DAPI 标记。对大鼠行 5 Gy X 线全腹部照射，每隔 72 h 照射 1 次，共 5 次，制备放射性空肠损伤动物模型。取 40 只大鼠，随机分成正常对照组、模型及 MSCs 治疗组及 DAP 标记组。激光共聚焦显微镜下观察 DAPI 标记的 MSCs 在空肠组织中富集情况。病理学 观 察 MSCs 对放射性空肠损伤的修复作用。结 果 正常大鼠空肠黏膜结构清楚，隐窝深遂，腺体丰富，模型组 7 d 黏膜上皮细胞坏死脱落，隐窝几乎完全破坏，治疗组 7 d黏膜坏死组织较少，黏膜增厚，30 d 治疗组核分裂相增加，较模型组增加明显。结论 成功建立放射性空肠损伤动物模型，MSCs 可以促进空肠再生与修复。

摘要:目 的 分析结核急性感染小鼠脾脏和肺脏的组织荷菌量以及病理的动态变化。方 法 以 3 × 105CFU 结核分枝杆菌标准株 H37Rv 尾静脉途径感染雌性 C57BL /6J 小 鼠，测 定 感 染 后 1 d、1 周、2 周、3 周、4 周、6 周和 8 周肺脏及脾脏组织的荷菌量，脾脏和肺脏组织经 HE 染色分析病理变化。结果 感染动物的脾脏荷菌量在前3 周逐步提高，在 4 ～ 8 周脾脏荷菌量维持稳定，肺脏组织在 2 ～ 8 周组织荷菌量逐步升高。病理分析显示动物感染3 周后肺脏和脾脏出现肉芽肿，在 6 ～ 8 周病理损伤加重。结论 小鼠经尾静脉感染高剂量结核分枝杆菌在 8 周前表现为急性感染状态，适用于抗结核药物的体内药效学评价。

摘要:目的 应用高保真酶( Pfu) 和 3’末端修饰引物在单管双向等位基因特异性扩增( SB-ASA) 中 区 分SNP 基因型，建立高保真酶特异性检测 SNP 基因型的新 方 法。方 法 选取近交系大鼠 SNP 位 点，以 RS8149053 为例，设计两个外部引物和两个等位基因特异性引物，四引物 3’末端进行硫代磷酸化修饰，应用高保真聚合酶( Pfu)进行特异性扩增，扩增结果测序验证其可靠性。结 果 在 RS8149053 SNP 位 点( C /T) 上，等 位 基 因 型 CC 扩 增 出179 bp 目的片段，基因型 TT 扩增出 597 bp 目的片段，基因型不同则扩增出分子量不同的片段，目的条带测序结果与 Rat Genome Database 数据库基因型结果一致，高保真酶扩增结果稳定且特异性强。结论 高保真酶等位基因特异性扩增技术能有效降低假阳性率，是一种快速、特异的 SNP 基因分型新方法。

摘要:实验动物细菌学质量控制标准是评价实验动物质量的重要指标，本文在分析发达国家实验动物质量标准的基础上，结合目前的检测现状，对我国实验动物细菌学监测标准在检测项目、检测方法、检测频率、取样要求等方面存在的问题进行了分析并提出建议。