摘要:目的 建立心脏特异表达的人源 FAM55A 转基因小鼠，为研究该基因在心肌病发病中的作用提供模型。方法 Western blot 检测 FAM55A 在野生型小鼠与 cTnTR141W转基因小鼠心脏组织中的表达变化及其在野生小鼠的组织表达谱。克隆人源 FAM55A 基因入 α-MHC 启动子下游构建 a-MHC-FAM55A 表达载体，显微注射法建立FAM55A 转基因小鼠。PCR 鉴定转基因首建鼠的基因型。Western blot 鉴 定 人 源 FAM55A 在转基因小鼠心脏中的表达，超声检测转基因小鼠心脏的几何构型和功能。HE 染色检测转基因小鼠心脏的病理改变。结 果 FAM55A在野生型小鼠心脏中有少量表达，在扩张型心肌病小鼠的心脏中表达增加。建 立 了 1 个心脏组织特异表达人源FAM55A 转基因小鼠品系。与野生型小鼠相比，FAM55A 转基因小鼠的心脏收缩期和舒张期左室前壁从 1 月 龄 到5 月龄持续增厚，3 月龄转基因小鼠心脏射血分数和短轴缩短率稍有增强，1 月龄和 5 月龄转基因小鼠心脏功能则与同龄野生型小鼠相比无变化。组织学检测显示，转基因小鼠心脏左室心肌细胞不均匀肥大，但 不 发 生 紊 乱。结论 FAM55A 在扩张型心肌病小鼠的心脏中表达上调，建立了心脏特异表达的人源 FAM55A 转 基 因 小 鼠，为 进 一步和心肌病小鼠模型杂交，研究该基因在心肌病发病中的作用提供了工具。

摘要:目的 通过检测垂体肿瘤转化基因( PTTG) 与 腺 病 毒 E2 启 动 子 结 合 因 子 1 ( E2F-1) 在 大 鼠 催 乳 素( PRL) 瘤中的表达来探讨两者在 PRL 瘤发生发展过程中的作用。方法 40 只大鼠随机分为两组: 实验组( E 组，n= 20) : 皮下植入 17β-雌二醇的方法诱发大鼠 PRL 瘤; 对照组( C 组，n = 20) : 皮下植入空白硅胶管。雌激素诱导 10周后处死大鼠，心脏穿刺取血，4% 多聚甲醛体内灌流取出脑垂体，称 重，ELISA 方法检测两组大鼠血清 PRL 水 平，垂体组织行病理组织学观察，免疫组化 SP 方法检测两组大鼠垂体组织中 PTTG 蛋 白 质、E2F-1 蛋 白 质 的 表 达。结果 雌二醇作用 10 周后，据垂体重量、垂体组织学变化和血清 PRL 水平证实 PRL 瘤诱导成功。PRL 瘤组中，PTTG蛋白质、E2F-1 蛋白质均明显高于对照组，差异具有统 计 学 意 义( P ＜ 0. 01) ; 且 PTTG 蛋 白 质 和 E2F-1 蛋 白 质 的 表达呈明显正相关( γ = 0. 764，P ＜ 0. 01) 。结论 PTTG 与 E2F-1 在大鼠 PRL 瘤中共同过度表达，参与了大鼠 PRL 瘤的发生发展。

摘要:目的 研究善释Ⅱ组织补片在植入肌体后的局部组织反应及对腹壁缺损的修复效果，并比较其与另两种不同成分补片的效果差异。方法 将实验家兔分为三组，于下腹正中处切开，在腹膜外分别植入善释Ⅱ组 织补片、善释聚丙烯补片和超普补片。日常观察腹壁缺损修复情况，数周后取出补片及修补处组织，观察补片皱缩和组织病理反应。结果 采用善释Ⅱ补片的实验组较之对照组能够更好的增强腹壁的顺应性，补 片 皱 缩 率 小，组 织炎性反应显著减弱。结论 减少补片中的聚丙烯含量，添加可降解的聚乙交-己内酯成分能够有效地改善补片的修复效果，降低术后组织炎性反应及纤维化程度。

摘要:目的 为了研究经过基因修饰的体细胞导入到禽类胚胎以后，供体细胞及外源基因是否能在受体胚胎中成活并且外源基因是否可以长期表达。方法 筛选得到稳定整合绿色荧光蛋白基因的鸡 DT40 细胞作为外源蛋白的运载工具，通过血管微注射的方法将其导入到于 38. 5 ℃ 温度条件下孵化 65 ～ 70 h 的鸡胚中，并将操作后的鸡胚在原孵化条件下继续孵化。在孵化的不同时期取移植了 DT40 细胞的嵌合体胚胎在荧光显微镜下观察荧光细胞的存活与分布情况。并通过 PCR 以及免疫组织化学方法检测供体细胞在受体中的位置以及绿色荧光蛋白的表达情况。结果 荧光标记的 DT40 细胞可以存活于受体不同的组织器官中，包括: 脑、心脏、肝脏等。导入胚胎的整合外源基因的 DT40 细胞可以存活到胚胎出雏之前，并且外源基因能够正常表达。结 论 可以通过此方法将外源基因导入到受体中，并使目的蛋白在受体胚胎中持续表 达，为胚胎期导入外源蛋白诱导免疫耐受的研究以及将转基因细胞移植到动物体内生产目的蛋白的研究提供科学依据和技术平台。

摘要:目的 研究脱细胞异种面神经移植中环孢素 A( cyclosporin A，CSA) 的作用效果。方法 48 只 Wistar大鼠随机选择一侧作为实验侧，解剖面神经后于颊支制造 1cm 的 神经缺损。按神经移植的种类分为 4 组，A 组: 异种面神经移植组; B 组: 异种面神经移植应用 CSA 免 疫 抑 制 组; C 组: 异种脱细胞神经移植组; D 组: 异 种 脱 细 胞 神经移植应用 CSA 免疫抑制组。各组实验动物分别于术 后 5 周，12 周进行电生理学测试( 潜 伏 期、运动神经传导速度) ，并进行光镜、电镜观察形态学变化。结果 术后 5 周和 12 周时，C，D 组动物在电生理指标及光镜、电镜指标上均优于 A，B 组，术后 5 周和 12 周，D 组面神经颊支传导速度均高于其它各组。结论 1. 0 cm 缺损的异种脱细胞面神经移植动物实验中，应用 CSA5mg /( kg·d) 5 周可以降低排斥反应，提高神经再生能力。

摘要:目的 观察不同年龄自发性高血压大鼠( SHR) 心脏 AT2R 的表达水平及心肌胶原含量，探 讨 AT2R在高血压发生、发展过程中的作用。方法 1 月龄组( S1) 、2 月龄组( S2) 、3 月龄组( S3) 、6 月龄组( S6) 和 9 月龄组( S9) 雄性 SHR 共五组，每组各 6 只，各组均有 相 应 月 龄 的 Wistar-Kyoto 大 鼠( WKY) 作 对 照。采 用 RBP － I 型 大 鼠血压心率测定仪测量大鼠动脉收缩压( SBP) ; 放免法( RIA) 测定血浆血管紧张素Ⅱ( AngⅡ) ; 免疫组化染色结合计算机图像分析方法测定心脏 AT2R 的表达水平，天狼星红胶原染色大鼠的心脏切片。结果 1． SHR SBP 随着月龄的增加呈持续上升( P ＜ 0. 05) ，SHR 的 SBP 均高于相应配对的 WKY 组( P ＜ 0. 05) 。2． 一个月后 SHR 血浆 AngⅡ浓度均高于 S1( P ＜ 0. 05) ，一个月 后 SHR 血 浆 AngⅡ浓度均高于相应配对 的 WKY 组( P ＜ 0. 05) 。3． SHR 心 脏AT2R 免疫染色阳性面积比随着月份的增加而降低，SHR 心脏 AT2R 免疫染色阳性面积比均低于相应配对的 WKY组( P ﹤ 0. 05) 4． SHR 心肌中的胶原含量随着月龄的增加而增加。结论 SHR 心脏 AT2R 表达水平比 WKY 低，并随着年龄的增加而降低。SHR 心肌中的胶原含量随着月龄的增加而增加，而 WKY 无类似趋势。

摘要:目的 探讨 microRNA29c ( miR-29c) 在阿尔茨海默病中的作用。方法 采用了 microarray 芯片检测3 月龄、6 月龄 APPswe /PSΔE9 双转基因阿尔茨海默病小鼠大脑中 microRNA 表达情况并利用实时定量 PCR 验证结果可靠性，通过 microRNA 靶基因数据库预测选出与阿尔茨海默病相关的靶基因，构建 miR-29c 表达载体，将 其 转染 SH-SY5Y 及 HEK-293T 细胞，在高表达 miR-29c 的 SH-SY5Y 及 HEK-293T 细胞系中验证 miR-29c 对靶基因的调控作用。将靶基因 APP mRNA 的野生及突变 3’UTR 序列克隆到双荧光素酶报告基因载体，用双荧光素酶报告检测系统检测 miR-29c 与靶基因的结合位点。结果 根 据 microRNA 芯片结果筛选出在 3、6 月 龄 APPSWE /PS1ΔE9双转基因小鼠大脑表达均有差异的 miR-29c，通过实时定量 PCR 证实 miR-29c 在 3 月、6 月、9 月龄小鼠中表达明显升高。通过 microRNA 靶基因数据库预测 miR-29c 可以调控阿尔茨海默病的靶基因 APP，利用 Western blot 检测到高表达 miR-29c 的 SH-SY5Y 细胞及 HEK-293T 细胞中 APP 蛋 白 表 达 减 少。将 miR-29c 表达载体与带有野生及突变 APPmRNA 的 3’UTR 的双荧光素酶报告载体共转染 HEK-293T 细胞，通过双荧光素酶检测系统检测未找到 miR-29c 与 APP mRNA 3’UTR 的结合位点。结论 miR-29c 对 APP 表达的具有负向调控作用，但其调控位点可能不位于其 3’UTR 区域。

摘要:目的 比对实验室常用的 H5N1 禽流感病毒检测方法灵敏性。方法 增殖 H5N1 病毒，蚀斑技术定量待检病毒，应用细胞接种、血凝实验、RT-PCR、Real-time RT-PCR 等方法检测稀释的病毒悬液，比较检测的最低滴度。结果 细胞接种、Real-time RT-PCR、RT-PCR 及血凝实验能检测病毒的最低滴度为 10 PFU /mL、10 PFU /mL、103 PFU /mL 及 3. 52 × 105 PFU /mL。结论 几种检测方法比较而言，细 胞 接 种 与 Real-time RT-PCR 检 测 灵 敏 性 最高; 血凝实验用时最短，但灵敏性低，结果需要进一步确认; RT -PCR 用时较较短，检测灵敏性较高。

摘要:目的 建立一种大鼠肾脏无创伤性局部血管给药的新方法，并对其给药后成活率和损伤性进行观察。方法 16 只 Wistar 大鼠，用 PE10 导管经大鼠左侧颈总动脉-降主动脉-胸主动脉-腹主动脉，抵达肾动脉直接给药。统计其成活率并对给药的肾动脉血管行病理学观察。结果 大鼠成活率可达 87. 5% ，且不会造成肾动脉血栓或血管内皮损伤。结论 该法可以成功的实现大鼠肾动脉远距离插管，零距离无创伤性局部血管给药，同 时 还 可以推广用于腹腔的某些其它脏器甚至更远的后肢。

摘要:目 的 建 立 甲 型 H5N1 流感病毒感染雪貂动物模型［1 － 3］ 。方 法 H5N1 流 感 病 毒 株 A /Vietnam /1203 /2004 病毒以 103 和 104 TCID50滴度分别感染雪貂。对 4 ～ 10 月龄去势雪貂经兽用氯胺酮轻度麻醉后进行滴鼻感染，每个稀释度接种 3 只雪貂，感染后第 5 天安乐处死。感染后每天记录雪貂一般临床变化。感染前 0 d 采集鼻甲骨活检，感染后 1 ～ 5 d 鼻甲骨活检检测病毒载量和病毒滴度。处死时取雪貂气管、肺、心、肝、脾、肾、小 肠、脑组织作病毒滴度检测和病理检查。结果 H5N1103 和 104 TCID50的病毒分别感染雪貂，雪貂死亡都率在 33% 。103TCID50和 104 TCID50病毒分别感染雪貂，动物 都 出 现 持 续 3 d 体 温 升 高，104 TCID50 组 出 现 超 过 20% 的 体 重 下 降。上呼吸道排毒呈现上升趋势，并可在除呼吸系统以外的组织器官中分离到病毒。感染的雪貂病理表现为重度肺炎。结论 雪貂感染 H5N1 病毒株后在临床表现、病 毒 学、分 子 生 物 学、病理学方面的检测都可以证实雪貂感染H5N1 病毒动物模型已建立，104 TCID50病毒滴度是一个建立感染动物模型比较合适的剂量。

摘要:目的 检测非离子氨和亚硝酸氮对鱼类的生态毒性效应。方 法 在 水 温( 25 ± 1) ℃ 、溶 氧( 6. 07 ～6. 77) mg /L、盐度 30 ～ 31、pH8. 0 ～ 8. 2 的条件下，采用半静水式生物毒性试验方法研究了非离子氨和亚硝酸氮对裸项栉虾虎鱼( Ctenogobius gymnauchen) 仔鱼的急性毒性效应 ( 非离子氨浓度梯度设置为 0、0. 413、0. 735、1. 309、2. 329、4. 147 mg /L，亚硝酸氮浓度梯度设置为 0、3. 0、4. 14、5. 713、7. 884、10. 88 g /L) 。结果 非离子氨和亚硝酸氮暴露后仔鱼出现呆滞、侧游、呼吸困难、体 色 变 白、身体弯曲等中毒症状，且随着暴露浓度的升高与暴露时间的延长，死亡率逐渐增加，存在明显的剂量效应关系和时间效应关系; 非离子氨和亚硝酸氮对裸项栉虾虎鱼仔鱼 96 hLC50分别为 9. 1 mg /L 和 12. 405 g /L，其安全浓度分别为 0. 91 mg /L 和 1. 2405 g /L。结论 裸项栉虾虎鱼对非离子氨和亚硝酸氮具有较强的耐受力，非离子氨对裸项栉虾虎鱼仔鱼的毒性显著大于亚硝酸氮。

摘要:目的 应用 CT 技术对成年实验猕猴胸部肺窗进行断层扫描观察，探 讨 CT 技术对猕猴肺部疾病的临床诊断意义，建立正常猴肺部 CT 断层扫描图谱，为 CT 技术在猕猴解剖学的研究、疾病的临床诊断及科学实验方面的应用，提供影像学的基础资料。方法 经过触诊、叩诊、听诊、体温、呼吸率、心率、呼吸运动、血液常规等检查，选择健康猴 10 只，雌雄各半，年龄分别为 5 ～ 10 岁，进行肺部 CT 断层扫描检测。试验猴全身麻醉后，置于 CT 诊断床上，取头前尾后仰卧位进行肺部扫描，获取肺窗扫描 图 像。对具有解剖意义的扫描图像的每个层面的主要结构( 肺叶、气管、动脉血管、静脉血管等) 进行标注。结果 ( 1) 获得具有解剖意义的肺窗扫描图像 13 张。( 2) 在断层扫描的图像中，肺、气管、较大血管等组织器官界面清晰。肺 为 左 右 两 侧，左 肺 分 为 上 叶、中 叶、下 叶，右 肺 分 为 上叶、中叶、下叶、奇叶四部分。不同的断层面分别可见肺部左主支气管、右主支气管、支气管、血管等组织。( 3) 肺部较小或细小的血管、神经组织界面不清晰。结论 ( 1) 应用 CT 获得的正常猕猴胸部肺窗断层扫描图像表明，正常健康猴双肺纹理清晰，走行自然，肺野透光度良好，双肺无异常实质病变影像。( 2) 获得了健康猕猴肺部的 CT 影像学资料，为猕猴肺部疾病的诊断，提供了一种安全、方便又准确的新依据，建立了成年健康猕猴肺部 CT 断层解剖研究的背景资料。

摘要:目的 制备猪细小病毒( PPV) 杂 交 瘤 细 胞 株，并 对 其 分 泌 的 PPV 单克隆抗体进行鉴定。方 法 按常规方法制备并获得 2 株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定，用间接 ELISA、免疫过氧化物酶单层试验( IPMA) 和间接免疫荧光试验( IFA) 对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果 得到 2 株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 2H9、1F9，染色体数目介于 90 ～ 110 之间。细胞上清效价均达1∶ 1 × 104，腹水效价 均 达 1 ∶ 1 × 107，其 亚 型 分 别 为 IgG1、IgM，均 为 kappa 链。2H9、1F9 单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV) 、猪瘟病毒( CSFV) 、猪伪狂犬病毒( PRV) 、猪圆环病毒 I 型( PCV-1) 、猪圆环病毒Ⅱ型( PCV-2) 、乙脑病毒( JEV) 等均无交叉反应。IPMA 和 IFA 检测结果显示 2H9、1F9 单抗均能与接种于 PK-15 细胞的 PPV 发生特异性反应。结论 成功制备了 2 株抗 PPV 杂交瘤细胞株，证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。

摘要:目的 对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察，使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法 成年食蟹猴 12 只，用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型，造模后 1 周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组，分别在出血灶周围注射生理盐水、脊 髓间充质干细胞 5 × 106 /只和 1 × 106 /只，造模 6h，1d，3 d，1w 后及干细胞注射后 1d，3d，1w，2w，3w，4w 在每天的固定时间使用文献中的表格和 /或改进的表格进行评分，比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢神经功能缺损情况评价造模和干细胞治疗效果。结果 造模手术前，所有动物的行为表现均正常，神经功能评分为 0。造模手术后 6h，用修改前后的表格评分均为 31 分左右。但从术后 3d 开始出现评分上的差异。用修改后的表格对动物的神经功能进行评分结果显示干细胞注射后 1 周开始到动物被安乐时，剂量组与对照组之间的神经功能评分出现显著性差异( P ＜ 0． 05) 。高、低剂量组间未见显著性差异。结论 改进的表格克服了旧表格中分差大，评价标准模糊的缺点，提高了量表评价的敏感性，具有良好的临床相似性和可操作性。为建立标准化神经功能评价量表进行了有益尝试。

摘要:小鼠是生物医学研究中使用数量最多的哺乳类实验动物。人类利用小鼠模型进行癌症研究已有100 多年的历史，小鼠大量的遗传变异可作为研究人类癌症的借鉴。特别是近年来，培育成功的转基因、基 因 敲 除等遗传工程小鼠模型，使我们对人类癌症发生有了深刻的认识，为评估癌症的诊断方法，革新预防和治疗方案提供了一个很有价值的平台。本文着重介绍了癌症研究中常用的小鼠模型、GEM 模型及取得的最新进展等，分 析 了 小鼠肿瘤模型的局限性，并对其发展趋势进行展望。

摘要:实验动物设施是医院科学研究的技术平台。如何利用有限的资源，全面提高实验动物中心科研服务水平是管理者亟待解决的问题。本文通过总结第四军医大学口腔医院实验动物中心的规范化建设及管理，探索提高实验动物中心运行效率和科研服务质量的方法。

摘要:当前新现病毒性疾病的研究最大的“瓶颈”在于没有胜任动物模型。建立在非人灵长类动物基础上的模型，虽然可以部分复制人类疾病特征，但其经济性欠佳且与动物权益的保护有所冲突; 而啮齿类动物对新现病毒的易感性往往较低，也不能很好地复制人类疾病。本 文 对 营 养、免疫及疾病易感性关系研究的进展进行文献回顾，以发现解决当前难题的线索。

摘要:采用红外传感、减速马达和光电传感组合、压力传感、51 系列单片微机控制和记忆等技术，研制一种检测动物饮食行为的仪器，用于药物和食品研制中的动物实验。经 30 例小鼠实验证明，效 果 良 好，该 仪 器 为 测 定动物饮食行为提供了一种全新的先进方法。