摘要:The use of animals in research will be necessary for scientific advances in the basic and biomedical sciences for the foreseeable future． As we learn more about the ability of animals to experience pain，suffering，and distress，and particularly for mammals，it becomes the responsibility of scientists，institutions，animal caregivers，and veterinarians to seek ways to improve the lives of research animals and refine their care and use． Refinement is one of the three R’s emphasized by Russell and Burch，and refers to modification of procedures to minimise the potential for pain，suffering and distress． It may also refer to procedures used to enhance animal comfort． This paper summarizes considerations for refinements in research animal．

摘要: 目的 探讨环磷酰胺( CP) 对长爪沙鼠精子畸形的影响。 方法 取长爪沙鼠随机分成正常对照组，CP 组( 低、中、高剂量组即剂量分别为 20 mg / kg、30 mg / kg、40 mg / kg) ，环磷酰胺经腹腔注射，连续注射 5 d，药后 30d 麻醉沙鼠，剖腹取出两侧附睾制备精子悬液涂片，用甲醇固定 10 min，用 2% 的伊红染色 30 min，蒸馏水洗片，显微镜观察精子形态。 结果 低、中、高剂量组分别与正常对照组比较，长爪沙鼠精子畸形率差异极显著( P＜0. 01) ;低、中剂量组分别与高剂量组相比较，长爪沙鼠精子畸形率差异极显著( P＜0. 01) ; 低剂量组与中剂量组比较，精子畸形率差异不显著( P＞0. 05) 。形态学观察显示: 环磷酰胺对长爪沙鼠精子影响畸形类型主要为尾折叠、尾 粗 细 /长短 /扭曲和无钩。 结论 环磷酰胺对长爪沙鼠精子有一定的致畸率，且对长爪沙鼠精子尾部影响最大。在 一 定剂量内范围内，环磷酰胺对长爪沙鼠的精子致畸率无明显区别; 当高于一定剂量，随着环磷酰胺用药剂量的增加，长爪沙鼠的精子致畸率也增加。

摘要:b> 目的 分析不同影响因素对新西兰兔的初次筛选合格率、二次筛选合格率的影响。 方法 根 据2005 版《中国药典》进行测定。 结果 初次筛选结果中，不同季节、体重值、性别、湿度新西兰兔的筛选率都有显著性差异，筛选时间在 7 ～ 9 月、体重值为 1. 7 ～ 2. 0 kg、雄性 的 新 西 兰 兔、在 湿 度 为 61 ～ 70% 的条件下初次筛选率较高; 在二次筛选结果中，不同季节、室温、湿度条件下新西兰兔的筛选率都有显著性差异，筛选时间在 1 ～ 3 月、在室温为 22. 1 ～ 23. 0℃ 、湿度为 61 ～ 70% 的条件下新西兰兔的二次筛选率较高。 结论 在不同影响因素的条件下，新西兰兔的初次筛选合格率、二次筛选合格率均受到影响。

摘要: 目的 研究 Cramp 蛋白过表达对小鼠骨髓造血干细胞自我更新和分化能力的影响。 方法 应 用 流式细胞仪分析 Cramp 过表达转基因小鼠及同龄野生型小鼠的骨髓、脾脏、胸腺等组织器官中各种细胞的比例; 分选骨髓造血干细胞，体外培养，观察其克 隆 形 成 能 力。 结果 与野生型小鼠相比，Cramp 过表达转基因小鼠的骨髓、脾脏、胸腺等组织器官中各种细胞的比例、骨髓造血干细胞的克隆形成能力等均无明显变化。 结论 本 研 究 中，Cramp 过表达转基因小鼠骨髓造血干细胞的分化能力、克隆形成能力无明显变化。

摘要: 目的 建立从小鼠微粒骨中获取间充质干细胞( MSC) 方法，并观察比较野生型小鼠( WT 鼠) 和端粒酶基因敲除小鼠( Terc^－/－鼠) MSC 生物学特性的差异。 方法 采用体外细胞培养技术，从小鼠自体微骨片中分离纯化 WT 鼠和 Terc^－/－鼠的间充质干细胞，通过培养和传代，研究其增殖及生长特征。 结果 原代培养及传代培养显示，WT 鼠自体骨间充质干细胞比 Terc^－/－鼠具有活跃的增殖倍增能力。 结论 从鼠的微骨片获取 MSC 的方法重复性好，细胞纯度和细胞数量优于以往从骨髓获取 MSC 的方法，Terc^－/－鼠 MSC 生长增殖能力明显弱于 WT 鼠，其机制的研究有待深入。

摘要: 目的 分析不同周龄 SD 大鼠的脏器重量及其变化趋势，为评判药物毒性反应提供理论参考。 方法 分别选取试验第 13、26、52、78 和 104 周对照组动物脑、脾脏、心脏、肺脏、肝脏、肾脏、肾上腺、睾丸、卵巢的重量数据并分析。 结果 从 13 ～ 104 周 SD 雌鼠脑、脾脏、心脏、肺脏、肝脏、肾脏、肾上腺、卵巢的重量呈升高趋势。从 13 ～104 周 SD 雄鼠脑、脾脏、心脏、肺脏、肝脏、肾脏重量均重于雌鼠，但雌鼠肾上腺重量、脏体比和脏脑比均显著高于雄鼠。 结论 本研究首次在国内建立了符合我国实验动物现状的，不同周龄 SD 大鼠的脏器重量背景数据和参考值范围，并分析了不同周龄 SD 大鼠脏器重量变化趋势。

摘要: 目的 构建 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 和 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 ^M26I重组表达载体，为研究 DJ-1 ^M26I突变与细胞增殖、凋亡的关系及建立转基因动物模型奠定基础。 方法 采用突变试剂盒将 DJ-1 蛋白第 26 位氨基酸进行突变，分别构建 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 和 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 ^M26I重组表达载体，并采用脂质体介导的方法分别将其转染入 NIH3T3 细胞，500 μg /mL G418 压力筛选稳 定 克 隆，对 2 种 转 染 细 胞 在 DNA 水 平、RNA 水 平 和蛋白质水平进行鉴定，采用 MTT 染色方法和 AnnexinV-FITC 试剂盒进行转染阳性克隆细胞的细胞活力与细胞凋亡检测。 结果 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 和 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 ^M26I重 组 质 粒 转 染 NIH3T3 细 胞 经 G418 筛 选 后，PCR 方法检测分别获得 1 个和 3 个阳性细胞克隆，RT-PCR 及 western blot 方法进行 DJ-1-His 基因表达检测，结果均证明外源插入基因的表达，MTT 实验结果初步证明转染 DJ-1 ^M26I基因的 NIH3T3 阳性细胞组细胞增殖速率低于正常NIH3T3 细胞组( P＜0. 05) ，转染 DJ-1 基因的 NIH3T3 阳性细胞组细胞增殖速率与正常 NIH3T3 细胞相比无明显差别; 细胞凋亡检测表明转染 DJ-1 ^M26I基因的 NIH3T3 阳性细胞组细胞凋亡率高于正常 NIH3T3 细 胞，转 染 DJ-1 基因的 NIH3T3 阳性细胞组细胞凋亡率低于正常 NIH3T3 细胞( P＜0. 05) 。 结论 成功构建 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 和 pcDNA3. 1 /myc-His-DJ-1 ^M26I重组表达载体，成功筛选出稳定表达人 DJ-1 及 DJ-1 ^M26I的 NIH3T3 细胞。DJ-1 M26I基因突变更易导致 NIH3T3 细胞的凋亡。

摘要: 目的 研究不同数目的骨髓间充质干细胞 ( mesenchymal stem cells，MSCs) 静脉移植对野百合碱( monocrotaline，MCT) 诱导大鼠肺损伤的抑制作用。 方法 全骨髓贴壁法培养 Wistar 大鼠 MSCs，取第 3 ～ 5 代细胞进行移植。健康雄性 Wistar 大鼠 20 只由颈 外 静 脉 移 植 MSCs，按移植细胞个数分为 5 × 10⁵ 组、1 × 10⁶ 组、5 × 10⁶组和对照( 生理盐水) 组( n= 5) ，测定移植前、移植后 5 min，30 min 及 24 h 的 RVSP。另 40 只随机分组( n=10) : ①MCT /MSCs 5 × 10⁵ 组; ②MCT /MSCs 1 × 10⁶ 组; ③MCT 组; ④对照组，腹腔注射 60 mg / kgM CT( 对照组注射等量生理盐水) ，同时分别移植 MSCs 5 × 10⁵ 个、1 × 10⁶ 个或等量 PBS 液体。4 周后检测大鼠右心室收缩压( right ventricular systolic pressureRVSP) 、RV /( LV + S) 重量比值; 肺组织 苏 木 素 － 伊 红 染 色、地衣红染色和平滑肌 Actin 免 疫 组 织化学染色。统计数据采用 SPSS 11. 0 软件，对各组数据进行单因素方差分析检验。 结果 少于 1 × 10⁶ 个 MSCs 颈外静脉移植是安全的。MSCs 颈外静脉移植 4 周后，MCT /MSCs 1 × 106 组 RVSP( 35. 6 ± 8. 4) mmHg 与 MCT 组( 47. 2± 10. 5) mmHg 相比明 显 下 降 ( P＜0. 05) ，心 室 比 0. 3572 ± 0. 0923 明 显 低 于 MCT 组 0. 4454 ± 0. 0935 ( P＜0. 05) ，而 MCT /MSCs 5 × 10⁵ 组 RVSP 为( 42. 5 ± 11. 3) mmHg，心室比 0. 4003 ± 0. 0725，与 MCT 组相比无明显下降( 两者 P＞0. 05) ; 病理染色可见肺组织肺小动脉中，MCT /MSCs 1 × 10⁶ 组中膜厚度分布为( 19. 2 ± 3. 8) % ，较MCT 组( 26. 4 ± 4. 9) % 明显变薄( P＜0. 05) ; 而 MCT /MSCs 5 × 10⁵ 组( 23. 3 ± 3. 6) % 较 MCT 组相比无显著差异( P＞0. 05) 。 结论 MSCs 颈外静脉移植对 MCT 诱导的肺损伤具有抑制作用，1 × 10⁶ 个细 胞 较 5 × 10⁵ 个 细 胞移植抑制作用显著。

摘要: 目的 研究氟中毒对小鼠睾丸组织的影响。 方法 给小鼠饮用含 0 mg /L、10 mg /L、25 mg /L、50 mg /L氟化钠水，HE 染色观察睾丸组织形态病理学变化，用 TUNEL 法检测小鼠睾丸组织细胞凋亡。 结果 氟 中 毒 能 诱 导小鼠睾丸 TUNEL 阳性细胞，且凋亡细胞率较对照组明显增高。 结论 氟中毒可诱导小鼠睾丸组织细胞凋亡明显，凋亡发生部位与病理改变明显的部位相吻合，氟中毒小鼠睾丸组织细胞凋亡机制参与睾丸损害过程。

摘要: 目的 观察摄食行为对小型猪心脏自主神经功能的影响。 方法 利用大动物无创遥测技术观察清醒活动状态下小型猪摄食前( BI) 、摄食过程中( IP) 、摄食后( AI) 、AI 2 h 和 AI 4h 的 心 电 图( ECG) 和 自 主 活 动，并用 HRV 功率谱分析其自主神经功能。 结果 与摄食前比 较，小型猪摄食过程中心率( HR) 、自主活动和标准化低频成分( LFnu) 明显增加，RR 间期( RRI) 、总功率( TP) 、极 低 频 成 分( VLF) 、高 频 成 分( HF) 明 显 减 少，LF /HF 比 值明显升高; 且随着摄食后恢复时间的延长，小型猪 HR、自 主 活 动、LFnu 均 有 所 降 低，而 RRI、TP、VLF、HF 均 有 所 升高，LF /HF 比值逐渐降低，并在摄食后 2 h、4 h 时变化显著; 相关分析显示摄食行为与 TP、VLF、HF、LF 和 LF /HF 密切相关，多元线性逐步回归分析亦显示摄食行为与 VLF、LF /HF 和 TP 密切相关，且 VLF 起主要作用。 结论 小型猪摄食行为不仅影响心脏活动; 而且能引起小型猪心脏自主神经控制能力发生改变，其中 VLF 在摄食行 为 过 程 中占有重要作用。

摘要: 目的 探讨吡格列酮对 db / db 小鼠骨骼肌蛋白酪氨酸磷酸酶 1B( protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B) 表达水平的影响。 方法 将 20 只 4 周龄 db / db 小鼠随机分为两组( 吡格列酮组和 db / db 对照组) ，每组 10只，分别给予吡格列酮 10mg / kg·d 和安慰剂灌胃。另设 10 只同周龄 db /m 小鼠，给予安慰剂灌胃作为非糖尿病对照( db /m 对照组) 。每周监测体重、血糖，4 周后用蛋白印迹法检测各组小鼠骨骼肌组织中 PTP1B 蛋白含量。 结果db / db 组小鼠骨骼肌 PTP1B 表达显著高于 db /m 组，给予吡 格 列 酮 干 预，血 糖、胰岛素抵抗指数显著低于 db / db 组( P＜0. 05) ，骨骼肌 PTP1B 表达水平亦显著降低( P＜0. 05) 。 结论 吡格列酮改善胰岛素抵抗，可能与降低骨骼肌PTP1B 蛋白表达有关。

摘要: 目的 观察早期戒烟后大鼠肺组织病理及炎性介质表达变化规律。 方法 选用 Wistar 雄性大鼠80 只，随机分为对照组及早期戒烟后 0 天、1 周、2 周、4 周、6 周、8 周、12 周组。采用酶联免疫吸附方法测定各组大鼠血清中 IL-8 的蛋白质含量，S-P 免疫组化学方法检测肺组织 NF-κB p65 的 表 达，并 光 镜 下 观 察 HE 染 色 切 片、对大鼠气道炎症进行病理学评分。 结果 早期戒烟组大鼠可见气道上皮细胞纤毛发生粘连、倒 伏，上皮细胞空泡变形、坏死、增生，炎症细胞浸润; 其血清 IL-8 浓度、肺组织 NF-κB 的表达及气道炎症病理评分在戒烟后各时相点较未吸烟对照组明显升高，有统计学意义( P＜0. 05) 。早期戒烟组大鼠血清 IL-8 的 浓 度、肺 组 织 NF-κB 的 表 达 及 肺 组织病理炎症评分在戒烟后略有上升、且 在 戒 烟 后 8 周 达 到 高 峰，但 随 后 在 戒 烟 12 周 时 可 见 IL-8 的浓度有下降趋势，肺组织病理炎症反应有所减轻。 结论早期戒烟大鼠在戒烟早期虽可见炎症反应略有加重，但随戒烟时间延长，仍可见炎症反应有所减轻。因此，提倡及早且坚持戒烟。

摘要: 目的 构建重组表达小鼠 MIP-1α 和 B7-1 基因的慢病毒载体，为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定基础。 方法 设计引物扩增获得目的基因小鼠 MIP-1α 和 B7-1 基因的全长编码序列 cDNA，将目的基因与经酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接，其产物转化感受态细胞，对长出的阳性克隆进行 PCR 鉴定和直接测序序列分析。MIP-1α 和 B7-1 目的基因质粒转染 293T 细 胞，观 察 绿 色 荧 光 蛋 白( GFP) 表 达，采 用 Western Blot 法检测其蛋白表达，实时荧光定量 PCR，检测慢病毒浓缩液的滴度。 结果 成功构建了重组表达小鼠 MIP-1α 和 B7-1 基 因 的 慢 病毒载体，实时荧光定量 PCR 证实 MIP-1αB7-1 基因重组慢病毒载体的滴度均达 2. 00E + 8 TU /mL。 结论 本 研 究成功构建并包装出高滴度的小鼠 MIP-1α 和 B7-1 基因重组慢病毒载体，为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定了基础。

摘要: 目的 建立慢性间断性缺氧伴二氧化碳潴留( chronic intermittent hypoxia with carbon dioxide retention，CIH-CR) 小鼠模型。 方法 选取雄性昆明小鼠 22 只，随机分为常氧组( normal control group，NC) 和 CIH-CR 组，每组 11 只。CIH-CR 组小鼠每天 CIH-CR 处理 8 h，共 4 周，实验期间监测箱内 O₂ 和 CO₂ 浓度及小鼠尾部末端血氧饱和度( SO₂ ) 。实验终点测定右室肥厚指数并观察心、肺、肾、脑组织病理改变。 结果 CIH-CR 组箱内 O₂ 浓度、CO₂浓度和小鼠尾部末端 SO₂ 随实验仓的关闭和开启出现周期性的变化; 与 NC 组相比 CIH-CR 组右心 室 明 显 肥 大( P＜0. 01) ; 小鼠心、肺、肾和脑组织均出现明显缺氧改变。 结论 成功建立了 CIH-CR 小鼠模型。

摘要: 目的 对壮阳药效评价方法进行优化，以探求更为有效的候选药物筛选方法。 方法 模型组大鼠均灌胃给予西地那非 10 mg / kg，对照组大鼠给予相同容量的生理盐水灌胃，每天 1 次，连续灌胃给药 14 d。每次给药后连续记录 2 h 内大鼠阴茎勃起、阴部理毛、爬背次数和参与动物数，并计算 PEI 值。采用改良的壮阳药效评价方法，整个过程采用摄像头观察并在不同时间段给予雌鼠诱导。 结果 在雌鼠诱导组中，模型组大鼠给药后 2 h PEI值较对照组明显升高( P＜0. 05) 。在模型组中，与人为观察组相比，摄像头观察组大鼠给药后 2 h PEI 值明显升高( P＜0. 05) ; 与非雌鼠诱导组相比，雌鼠诱导组大鼠给药后 2 h PEI 值 明 显 升 高( P＜0. 05) ; 与持续诱导组相比，间断 诱导组 2h PEI 值无明显差异，但 60 ～ 120 min 时间段 PEI 值明显升高( P＜0. 05) 。 结论 优化后的壮阳药效评价方法能更为有效的评价候选药物的壮阳药效。

摘要:DNA 转座子作为一种遗传工程工具已广泛应用于多物种的转基因及产生插入突变等研究。目 前，在哺乳动物中有转座活性的转座子可分为三类: 1 ) hAT 样 转 座 子; 2 ) Tcl 样 转 座 子 包 括 Sleeping Beauty 和 Frog Prince; 3) PiggyBac 转座子家族。其中甘蓝蠖 度 尺 蛾( Cabbage looper moth Trichoplusia ni) 来 源 的 PiggyBac 转 座 子是目前在哺乳动物中活性最高的转座子，并且可以携带十几 kb 的外源基因转座而不影响其效率，使其在哺乳动物的转基因、癌基因的发现、基因治疗研究方面具有巨大的应用潜力。此外，PB 的无痕迹转座对于无转基因、无遗传物质改变的诱导多潜能干细胞 ( iPS) 研究也具有非常重要的意义。本文主要对针对 PB 在哺乳动物中的应用现状及前景作一介绍。

摘要:眼刺激试验是化妆品安全评价的主要测试项目，目前正尝试建立代替传统动物实验的体外方法，这些方法处于研发、验证和认可的不同阶段。尽管还没有单一体外试验能完全替代兔眼实验，但系统分析替代方法建立的原理、科学相关性和标准化程度的不同，有助于合理选择运用体外方法指导化妆品眼刺激的标识分类、质量检验、产品开发和机制研究。

摘要:自身免疫性疾病 的 特 征 是 B 细 胞 耐 受 丧 失，B 细 胞 激 活 因 子( B cell activating factor belonging to the TNF family，BAFF) 通过与受体结合，对 B 细 胞 的 增 殖、存活起重要作用。BAFF 转基因小鼠易出现自身免疫性疾病。因此，拮抗或抑制 BAFF 的表达可能是治疗自身免疫性疾病的靶点。本 文 主 要 对 BAFF 在自身免疫性疾病方面的研究进展进行综述。