
- 浏览排行
- 引用排行
- 下载排行
2017, 27(12):1-7. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.001
摘要:目的 在小鼠MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法 在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6-/-小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果 在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6-/-小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论 小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。
2017, 27(12):8-15. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.002
摘要:目的 探索子宫内膜异位症盆腔粘连大鼠模型的建立方法及评价指标。方法 采用自体移植法将子宫内膜移植于大鼠肠系膜间,术后1、3、5、7、14、21、28 d分别随机抽取8只大鼠开腹观察病灶生长情况,采用美国生殖学会粘连分级(AFS)分级、Haber粘连评分两种方法同时对盆腔粘连程度进行评分;同时采取各组病灶及周围粘连腹膜组织行HE染色;术后5、7、14、21、28 d组分别采取病灶周围粘连组织,对其组织型纤溶酶原激活剂(tPA)含量进行动态检测。结果 两种粘连评分方法均显示造模后5 d已形成典型的盆腔粘连;与空白对照组及假手术相比,造模5 d后各模型组大鼠盆腔粘连腹膜组织中tPA含量极度降低(P < 0.01),造模28 d后tPA含量有上升趋势,但仍显著低于空白对照组及假手术组(P < 0.01)。结论 采用自体移植法将子宫内膜移植于肠系膜间建立EMs盆腔粘连模型,造模术后5 d即为成熟模型,tPA与EMs盆腔粘连的发生具有相关性。
康爱君 , 李雨薇 , 王学文 , 刘君芳 , 胡建国 , 郑振辉
2017, 27(12):16-20. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.003
摘要:目的 探讨大鼠血清放置时间对14项血生化检测结果的影响。方法 随机选取40只成年SD大鼠,空腹采集静脉血液标本,静置1 h,分离血清并密封分装,存放于4℃和-20℃冰箱内,应用全自动生化分析仪于分离血清后0 h、4 h、24 h、96 h、7 d检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CREA-J)、尿酸(UA)、尿素氮(UREA)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)等14项血生化指标,并进行比较。结果 雌雄大鼠血生化数据变化趋势一致。4℃保存时,与0 h相比,ALP在4 h、24 h、96 h、7d均显著降低(P < 0.05),ALB在96 h和7 d均极显著升高(P < 0.01),CREA-J在96 h和7 d均显著升高(P< 0.05),UA在24 h、96 h、7 d均极显著升高(P< 0.01),其他指标差异无显著性(P> 0.05)。-20℃保存时,与0 h相比,ALT在7 d显著升高(P< 0.01),AST在96 h和7 d显著升高(P< 0.05),TP在4 h和24 h显著降低(P< 0.05),ALB在4 h、24 h、96 h、7 d均显著升高(P< 0.01),CREA-J在24 h、96 h、7 d均显著升高(P< 0.01),UA在4 h、24 h、96 h、7 d均显著升高(P< 0.01),TC在4 h、24 h、96 h、7 d均显著升高(P< 0.05),TG在96 h和7 d显著升高(P< 0.05),CK在96 h和7 d显著升高(P< 0.05),LDH在96 h和7 d显著升高(P< 0.05),其他指标差异无显著性(P> 0.05)。结论 大鼠血生化测定尽可能在采集血清后即刻完成,尤其是ALP的测定,4℃冷藏时,测定UA不宜超过4 h,测定ALB和CREA-J不宜超过24 h,测定ALT、AST、TP、UREA、GLU、TC、TG、LDL-C、CK及LDH等指标不宜超过7 d。
2017, 27(12):21-27. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.004
摘要:目的 研究自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)下丘脑室旁核促炎性细胞因子是否促进交感神经活动过度增强,以及N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)是否介导其上述作用。方法 本研究采用成年SHR以及正常血压的Wistar-Kyoto (WKY)大鼠。应用蛋白质免疫印迹分析技术(Western blot)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(IL)-1β受体IL-1RI蛋白表达以及TNF-α和IL-1β水平。并应用脑立体定位进行PVN微量药物注射。肾交感神经活动(renal sympathetic nerve activity,RSNA)的测定采用Powerlab系统记录肾交感神经干电活动,并进行积分处理,比较给药前后的RSNA变化。颈动脉插管经压力传感器与PowerLab系统连接记录和分析平均动脉血压(mean arterial pressure,MAP)。结果 与WKY大鼠相比,SHR PVN中TNF-α及IL-1β水平,以及TNF-α受体p55TNFR、p75TNFR和IL-1β受体IL-1RI蛋白表达均显著升高(P< 0.05)。PVN微量注射Etanercept或IL-1ra阻断TNF-α和IL-1β效应在SHR组更显著的降低交感神经活动水平(P< 0.05)。PVN微量注射NMDAR拮抗剂DL-2-amino-5-phosphonovaleric acid (APV)或MK-801(Dizocilpine)在SHR和WKY组大鼠均降低RSNA和MAP (P< 0.05),并且在SHR组该效应更显著(P< 0.05);另外,APV或MK-801预处理阻断PVN中NMDA受体均显著减弱PVN微量注射TNF-α或IL-1β增强SHR和WKY组大鼠RSNA和升高MAP的效应(P< 0.05),与WKY组大鼠相比,该效应在SHR组更显著(P< 0.05)。结论 SHR PVN促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β及其受体均表达增加,PVN中NMDA受体介导SHR大鼠PVN中TNF-α、IL-1β促进交感活动增强和血压升高的效应。
董翔 , 刘江伟 , 王金泉 , 许永华 , 李佳佳 , 马娜
2017, 27(12):28-32. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.005
摘要:目的 探讨姜黄素预处理对沙漠干热环境下大鼠肠黏膜的保护作用。方法 雄性SPF级大鼠80只,随机分为生理盐水对照组(NC组)40只、姜黄素预处理组(HDC组)40只。NC组生理盐水灌胃,HDC组200 mg/kg姜黄素灌胃,连续7 d,每天1次。将各组大鼠置于模拟沙漠干热环境的实验舱中,温度:(41±0.5)℃,相对湿度:(10±2)%。在0、50、100、150 min时间点,分别随机取出NC组、HDC组大鼠(每组10只),腹腔注射戊巴比妥钠麻醉,留取回肠样本进行病理学观察评分及氧化应激指标CAT、SOD、MDA的检测。结果 在0、50 min时间点,HDC组较NC组病理损伤评分无显著性差异(P> 0.05);在100、150 min时间点,HDC组病理损伤评分较NC组显著降低(P< 0.01)。在50、100、150 min时间点,HDC组CAT、SOD活力较NC组显著升高(P< 0.05或P< 0.01),HDC组MDA含量较NC组显著降低(P< 0.05或P< 0.01)。暴露于干热环境中,NC组肠黏膜病理损伤评分与CAT、SOD活力呈负相关(r=-0.9128,r=-0.9125,均P< 0.01),与MDA含量呈正相关(r=0.9258,P< 0.01)。结论 姜黄素预处理对沙漠干热环境下大鼠肠黏膜具有保护作用,其机制可能与姜黄素抑制肠黏膜氧化应激反应有关。
张丽君 , 张丽霞 , 王郝莹 , 张琼 , 李莉红 , 轩瑞晶 , 王昭君 , 郭建红
2017, 27(12):33-38. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.006
摘要:目的 探究D-半乳糖诱导小鼠衰老过程中补充二甲双胍对小鼠学习记忆能力的影响及可能机制。方法 将24只雌性ICR小鼠随机分为3组:对照组、衰老组、衰老+二甲双胍组,每组8只,连续给药16周。监测各组小鼠体重及食物摄取量;行为学检测小鼠学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马组织结构;比色法检测各组小鼠海马组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。结果 与衰老组相比,衰老+二甲双胍组小鼠体重降低(P < 0.05);Morris水迷宫逃避潜伏期、游泳路程明显减少(P < 0.01或P < 0.05),目标象限内游泳时间延长(P < 0.05),游泳速度加快(P < 0.05);穿梭实验中主动回避次数升高(P < 0.05);HE染色显示海马齿状回中核皱缩、深染的海马神经元明显减少;海马组织GSH水平显著升高(P < 0.05)。结论 补充二甲双胍可以明显延缓小鼠衰老过程中学习记忆能力的下降,维持海马神经元正常结构,其机制可能与降低小鼠体重及增强海马组织抗氧化水平有关。
2017, 27(12):39-45. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.007
摘要:目的 探索燕麦β-葡聚糖对脓毒症小肠损伤相关基因表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(NC组),实验对照组(TC组),燕麦β-葡聚糖组(Oglu组)。TC组和Oglu组以盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法建立脓毒症模型。Oglu组以不同剂量燕麦β-葡聚糖灌胃。12 h后收集各组小肠组织,Western blot检测小肠组织损伤基因表达。结果 1)燕麦β-葡聚糖减轻脓毒症诱导的小肠损伤,降低脓毒症大鼠小肠组织中TNF-α、IL-1β及IL-6水平(P < 0.05);(2)脓毒症组小肠损伤相关蛋白Bcl-2表达下调,Bax、caspase-3、Toll样、凋亡基因FAS和FASL、NF-κB表达明显增加;(3)燕麦β-葡聚糖组小肠粘膜Bax、caspase-3、Toll样、凋亡基因FAS和FASL、NF-κB的表达低于明显脓毒症组,而Bcl-2表达较高。结论 燕麦β-葡聚糖调控脓毒症大鼠小肠损伤基因的表达,保护小肠上皮免受脓毒症的损伤。
2017, 27(12):46-50,114. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.008
摘要:目的 探索谷甾醇-3-O-葡萄糖苷对瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KF)抑制作用的研究。方法 0(对照组),3.125、6.25、12.5、25、50、100 μg/mL的谷甾醇-3-O-葡萄糖苷作用KF细胞48 h后,MTT法检测细胞活力,EdU染色法检测细胞增殖,流式细胞术分别检测细胞凋亡及细胞周期,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中COL I、COL Ⅲ含量。结果 3.125、6.25、12.5、25、50、100 μg/mL谷甾醇-3-O-葡萄糖苷能显著的降低KF细胞活力(P< 0.01),提高细胞增殖抑制率(P< 0.01),IC50=(27.54±2.18)μg/mL。与对照组比较,12.5、25、50 μg/mL谷甾醇-3-O-葡萄糖苷能显著的降低细胞增殖率(P< 0.01),提高细胞早期及晚期凋亡率(P< 0.01),使细胞周期阻滞在G1期(P< 0.01),同时还能显著的降低细胞中COL I、COL Ⅲ含量(P< 0.01)。结论 谷甾醇-3-O-葡萄糖苷能显著的抑制KF细胞增殖,诱导细胞凋亡,同时还能抑制胶原的合成。
2017, 27(12):51-55. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.009
摘要:目的 观察飞龙掌血提取物(Toddalia asiatica extract,TAE)对高脂血症心肌缺血小鼠氧化损伤的影响,初步探讨TAE对心血管保护作用的机制。方法 选用雄性KM小鼠,随机分成对照组、模型组、辛伐他汀组、TAE高、低剂量组,除对照组外,其余各组均用牛奶代替水自由饮用,诱导高脂血症。同时灌胃给予相应的药物,每天一次,连续28 d。于试验结束72 h前分3次皮下注射盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline hydrochloride,Iso),造成心肌缺血模型。检测小鼠体重、心电图、心脏和肝脏指数、心肌含水量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)活性。结果 TAE可改善模型小鼠心肌缺血心电图变化,降低体重,抑制心脏、肝脏指数,降低心肌含水量;降低血清TC、TG、LDL-C含量,升高血清HDL-C含量;降低血清MDA含量,升高血清SOD、GPx活性。结论 TAE可能通过调节氧自由基代谢,改善氧化损伤,发挥其保护心血管的作用。
张琪 , 杨光华 , 葛志鹏 , 丁家杉 , 黄志强 , 郑阳 , 张国志 , 王长友
2017, 27(12):56-60. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.010
摘要:目的 探讨罗格列酮对结肠癌HT29、HCT116细胞增殖、凋亡情况的影响以及AKT/GSK3β信号通路的变化。方法 HT29、HCT116结肠癌细胞经不同浓度罗格列酮(20.0 μmol/L,40.0 μmol/L,80.0 μmol/L)处理后,采用MTT法检测细胞增殖能力的变化,annexin-V FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bcl2、Bax以及Akt、GSK3β表达情况。结果 与空白对照组相比,不同浓度的罗格列酮对HT29、HCT116结肠癌细胞的增殖均有影响(P< 0.01),并且影响呈剂量依赖关系;不同浓度的罗格列酮对HT29、HCT116细胞均有诱导凋亡的作用(P< 0.01),且诱导HT29、HCT116细胞凋亡呈剂量依赖性;罗格列酮处理细胞48 h后,与空白对照组相比Bcl2/Bax表达水平、P-GSK3β、P-Akt表达水平明显下降(P< 0.01),Akt、GSK3β表达水平较空白对照组差异无显著性(P> 0.05)。结论 罗格列酮可能通过抑制Akt/GSK3β通路的激活,改变Bcl2/Bax情况,发挥抑制细胞增殖、诱导凋亡的作用。
仝永娟 , 杨朵 , 李娜 , 束华 , 马刚 , 高娜娜 , 张国英 , 张晓迪
2017, 27(12):61-65. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.011
摘要:目的 探索低温低压环境对小鼠褐色脂肪组织的影响。方法 选取个体健康均一的6周龄成年雄性C57BL/6 N小鼠24只,平均分为4组,每组6只鼠,分别饲养在常温常压(18~22℃、海拔20~60 m)、常温低压(18~22℃、海拔5000 m)、常压低温(0~6℃、海拔20~60 m)、低温低压(0~6℃、海拔5000 m)的环境中。实验周期为4周,在试验开始和结束时分别测量每只小鼠的体重,在实验结束后完整取下试验小鼠背部及腹股沟脂肪,并对背部及腹股沟脂肪组织进行HE染色,对背部脂肪的褐色脂肪的标志物UCP-1进行qPCR分子表达及western blot蛋白表达的测定。结果 低温低压、低温常压和常温低压组小鼠的体重增加量显著低于同期正常对照组小鼠;低温低压、低温常压小鼠背部和腹股沟脂肪组织颜色较深,血运丰富,常温常压组的脂肪组织形态较其他组偏大;染色结果显示小鼠背部脂肪细胞充盈多个脂肪泡,细胞较小,颜色较深,形态上是典型的褐色脂肪细胞;在低温条件下,小鼠背部脂肪组织的褐色脂肪标志物UCP-1在mRNA和蛋白水平上高表达,低压条件下仅在mRNA的水平上有上调。结论 模拟高原环境的低温低压条件对小鼠褐色脂肪组织的形成有刺激作用,这种作用更多的与温度的降低有关。
郭鑫 , 王静 , 王萌 , 路月英 , 贾娜娜 , 刘振刚 , 田景瑞 , 苑杰
2017, 27(12):66-72. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.012
摘要:目的 探讨中介素(intermedin,IMD)与肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对局灶性脑缺血大鼠脑微循环的影响。方法 采用大脑中动脉闭塞法构建脑缺血(cerebral ischemia,CI)大鼠模型,将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组:脑缺血模型+生理盐水[CI+NS (normal saline,NS)]组、CI模型+ADM处理(CI+ADM)组与CI模型+IMD处理(CI+IMD)组,采用激光多普勒测定仪监测脑表面微循环灌注量的变化。结果 CI+NS组、CI+ADM组与CI+IMD组大鼠脑表面微循环灌注量的比较,差异有显著性(P< 0.05),事后多重比较发现,CI+IMD组大鼠脑表面微循环灌注量均高于CI+NS组与CI+ADM组。结论 IMD可以改善局灶性脑缺血大鼠脑微循环,且疗效优于ADM。
2017, 27(12):73-78. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.013
摘要:目的 观察和探索经皮电刺激促进神经端侧吻合后神经再生的效果及其临床价值。方法 选取雄性SD大鼠32只,随机分为正常对照组(A组),肌皮神经损伤后端端吻合至尺神经组(B组),肌皮神经损伤后端侧吻合至尺神经组(C组),肌皮神经损伤后端侧吻合至尺神经+术后经皮电刺激组(D组)。观察各组大鼠患侧肢体的肌力恢复情况以及神经纤维的再生情况。结果 C组和D组大鼠振幅、传导速度低于A组,潜伏期高于A组;而D组大鼠振幅、传导速度低于C组,潜伏期高于C组;B、C、D三组大鼠肱二头肌湿重比以及肌纤维横截面积均低于A组,且C组肌肉恢复最差;B、C、D三组大鼠NF-200表达明显低于A组,D组NF-200表达明显强于C组,但仍显著少于B组,差异均具有显著性(P < 0.05)。电镜检查显示B组神经纤维髓鞘成熟,C组以无髓神经纤维为主,髓鞘成熟度差。D组髓鞘增生情况较C组好转,但仍有部分无髓神经纤维存在。结论 神经端侧吻合术后经皮电刺激能有效促进神经轴突再生以及延缓靶肌的失神经萎缩,尽管较之神经端端吻合存在差距,仍不失为临床修复周围神经损伤的有效方法之一。
2017, 27(12):79-83. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.014
摘要:目的 研究白藜芦醇对于大鼠血液高凝态形成的影响及其与NF-κB表达的关系。方法 SD大鼠分空白组、模型组、白藜芦醇高剂量组(60 mg/kg)、白藜芦醇低剂量组(30 mg/kg)和阿司匹林组(10 mg/kg),连续灌胃给药7 d,采用肾上腺素联合冰浴法和凝血酶法建立高凝态大鼠模型,采集血样测凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)及全血粘度;收集血管内皮细胞,采用蛋白印迹法测NF-κB表达情况。结果 空白组、白藜芦醇高剂量组和阿司匹林组较模型组PT、APTT显著延长(P< 0.05),血液粘度显著降低(P< 0.05);白藜芦醇高剂量组血管内皮细胞NF-κB表达较模型组明显降低(P< 0.05)。结论 高剂量白藜芦醇(60 mg/kg)可抑制大鼠血液高凝态形成,这种作用可能与其降低NF-κB的表达有关。
2017, 27(12):84-90. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.015
摘要:目的 应用6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制作帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型,并对大鼠外周血淋巴细胞中salsolinol氮甲基转移酶(SNMT)的活性进行测定。方法 利用单侧双点注射6-OHDA损毁大鼠纹状体,构建PD模型并对模型进行行为学评价;从模型大鼠外周血淋巴细胞中提取SNMT粗酶液,建立酶反应产物N-methyl-salsolinol (NMSal)的高效液相色谱串联三重四极杆质谱检测方法,以NMSal的生成量表征SNMT的活性。结果 18只经过6-OHDA注射的大鼠共有7只经阿朴吗啡诱导后表现为恒定向未损毁侧旋转(>7 r/min),建模成功率为38.9%。建立了基于多反应监测技术的SNMT活性的高选择性、高灵敏度、高重复性的表征方法。该方法中NMSal的检出限和定量限分别达到49 pmol/L和98 pmol/L,日内和日间精密度均在6.0%以下。检测结果显示PD组大鼠外周血淋巴细胞中SNMT的活性与假手术组、正常组相比差异有显著性(P< 0.01,n=5),而正常组和假手术组之间差异无显著性(P> 0.05,n=5)。结论 外周血淋巴细胞中SNMT活性可能反映出PD发病状况,有望成为诊断的指标之一。
李晓波 , 付瑞 , 王淑菁 , 卫礼 , 贺争鸣 , 王吉 , 岳秉飞
2017, 27(12):91-96. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.016
摘要:目的 建立多瘤病毒荧光定量PCR检测方法,并对裸鼹鼠中多瘤病毒感染情况进行调查。方法 比较NCBI中小鼠多瘤病毒(Genbank:NC_001515)的核酸序列,选择保守区域设计引物和探针,建立多瘤病毒的荧光定量PCR方法,对方法的敏感性和特异性进行验证。人工感染9只1日龄KM乳鼠,21 d后采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、盲肠内容物和血液等组织脏器,用建立的荧光PCR方法进行检测,验证方法在应用中的有效性,最后用该方法检测62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本。结果 建立的检测方法特异性好,在以多瘤病毒为模板时出现明显的荧光信号,以猴空泡病毒、小鼠K病毒、小鼠微小病毒和大鼠细小病毒H-1株为模板时无荧光信号出现;方法的最低检出限为100 copies/μL;人工感染小鼠的心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物中均检测到多瘤病毒核酸,其中肺组织中含量最高,脑、胸腺和血液中未检出;62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本经检测多瘤病毒为阴性。结论 建立的多瘤病毒荧光定量PCR方法可有效检测动物组织中的多瘤病毒,对裸鼹鼠自然感染多瘤病毒的调查为实验用裸鼹鼠微生物标准的制定提供了参考。
马芹 , 王元智 , 闫文卓 , 赵丽丽 , 陈洪岩 , 陆涛峰
2017, 27(12):97-101. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.017
摘要:目的 水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。方法 针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。结果 PCR可同时扩增出601 bp (ADV)、205 bp (MEV)和451 bp (CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×104拷贝、MEV每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。结论 建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。
2017, 27(12):102-108. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.018
摘要:目的 建立IgA肾病小鼠模型,并观察模型的生化及病理指标特点。方法 12只BALB/c小鼠随机分为正常组(6只)和模型组(6只),模型组单次尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B (SEB)0.8 mg/kg,第二周开始,连续注射三周,第四周结束后检测小鼠24 h尿蛋白定量,尿微量白蛋白,肾功能BUN、Scr、UA;蛋白指标TP、ALB;肝功能ALT、AST、ALP;血脂TC、TG、LDL的情况,肾脏免疫荧光IgA的沉积,肾脏病理HE、PAS、PASM、Masson染色以及透射电镜的观察肾脏超微结构,以及肝脏与小肠HE染色、免疫荧光IgA的沉积变化。结果 与正常组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白定量与尿微量白蛋白均升高(P < 0.01);模型组小鼠肾功能指标CREA,UA均高于正常组(P < 0.05),BUN差异无显著性;模型组小鼠蛋白指标TP、ALB差异无显著性;模型组小鼠肝功能指标AST水平高于正常组(P < 0.05),ALT、ALP差异无显著性;模型组小鼠血脂TG水平低于正常组(P < 0.05),LDL水平高于正常组(P < 0.01),TC差异无显著性。肾脏免疫荧光检查可见模型组小鼠肾小球系膜区呈颗粒状、团块状的IgA沉积;模型组小鼠肾脏病理轻中度损伤,系膜区免疫复合物增多;模型组小鼠肝脏HE染色可见少量炎性细胞浸润伴有部分肝细胞坏死,小肠绒毛缺损,肠绒毛变短变细、间距明显增宽,有部分分上皮脱落,中央央乳糜管扩张显著,淋巴细胞增多,明显可见炎性细胞浸润。结论 使用超抗原SEB尾静脉注射小鼠可以成功复制IgA肾病动物模型。
2017, 27(12):109-114. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.019
摘要:唾液酸黏附素(Siglec-1或CD169)是表达于组织的巨噬细胞上免疫球蛋白超家族类黏附分子。在炎症反应中,Siglec-1可调节MIP-1α/β、MCP-1、MIP-2等细胞因子的分泌,促进炎症反应的发生;在病毒感染过程中,Siglec-1可通过介导病原体与巨噬细胞的的结合,促进病毒感染和吞噬;在对免疫的调节过程中,Siglec-1既可也以抑制IFN-α的过量表达,抑制固有免疫,也可抑制DC细胞活性,降低适应性免疫。本文主要阐述了Siglec-1在病原体感染、炎症反应和免疫调节中最新研究进展。
龙隆 , 赵显莉 , 谭红 , 张爱华 , 杨鸿波 , 何锦林
2017, 27(12):115-119. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.020
摘要:支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统及其病变的一种重要的动物实验技术,它可以获得呼吸道及肺部深处多种生化因子、炎症介质和免疫细胞等,为动物实验研究提供重要的评价指标和参考依据,是探讨呼吸系统性疾病的一种有效可靠的方法。目前应用于人的支气管肺泡灌洗术已经逐步标准化并在临床广泛开展,但没有一套针对实验动物大小鼠的支气管肺泡灌洗操作的标准。支气管肺泡灌洗液的检测结果受诸多因素共同影响,如灌洗液、灌注压力、灌洗量和回收量以及灌洗液在肺部停留时间等,成功而高效获取灌洗标本是研究和评价呼吸系统性疾病的关键所在。本文总结了目前国内外研究人员常用的灌洗操作方法,为今后进一步开展相关的实验研究提供参考。
2017, 27(12):120-124. DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.021
摘要:糖皮质激素是由肾上腺皮质束状带分泌的一类甾体类激素,也可由化学方法人工合成,具有调节糖、脂肪和蛋白质合成和代谢的作用,还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、抗休克的作用。但长时间应用糖皮质激素会导致骨量下降,甚至严重的骨质疏松,大大增加了骨折的风险。因此,针对激素诱导骨质疏松机制及治疗的探索显得愈发重要。目前,根据给药方式的不同,激素诱导小鼠骨质疏松模型的构建方法主要有植入缓释药物法,口服法和注射法三种。由于任何一种模型都只能与人体骨质疏松的临床表现部分相似,不能完全模拟人体骨质疏松的病理变化,因此每一种构建模型的方法都有其独特的适应面。现有研究表明,激素诱导骨质疏松模型的构建主要是通过调节内分泌,促进骨吸收和抑制成骨细胞,减少骨生成实现的。与其他动物相比,小鼠具有基因组与人类高度同源,近交突变系发达,基因修饰技术成熟,经济实惠等优点,因此,激素诱导的小鼠骨质疏松模型在骨质疏松研究工作中具有非常重要的意义。本文将对激素诱导小鼠骨质疏松模型的构建方法进行综述。