摘要:目的 使用高场强磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI) 对非人灵长类动物(nonhuman primates,NHPs)急性脑梗死血栓?溶栓模型进行评价?方法 8 只成年雄性恒河猴,年龄(8.2 ± 1.2)岁,体重(9.4±1.0) kg,随机分为梗死组(n =4)和溶栓组(n = 4),采用恒河猴自体血栓制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型(M1 段),栓塞后,溶栓组给予rt?PA 溶栓治疗,梗死组仅接受等量生理盐水?分别于术后4 h 和24 h 进行磁共振T2WI?T2?FLAIR?TOF?MRA?DWI 扫描?结果 成功制备恒河猴血栓?溶栓模型?MRA显示梗死组大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)均未再通,溶栓组MCA 实现血管再通?T2WI 序列显示梗死组梗死体积增量为(12 027 ±5507) mm³ ,溶栓组梗死体积增量为(4910 ±2764) mm³ ;DWI 序列显示梗死组梗死体积增量为(9498 ±5226) mm³ ,溶栓组梗死体积增量为(4854 ± 1792) mm³ ?T2WI 和DWI 序列均显示,两组4 h 梗死体积比较,差异无显著性;溶栓组24 h 梗死体积低于梗死组,差异有显著性;溶栓组的梗死体积增量低于梗死组,差异有显著性?结论 应用MRI 序列成功评估恒河猴血栓?溶栓模型的再通及梗死灶变化?

摘要:目的 研究杏仁核快速电点燃癫痫中神经元限制性沉默因子(repressor element silencing transcription factor,REST)表达变化?方法 成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(S 组)?癫痫模型2 h 组(EP-2 h 组)?癫痫模型14 d 组(EP-14 d 组)和癫痫模型35 d 组(EP-35 d 组);癫痫采用杏仁核快速电点燃刺激法建立大鼠癫痫模型,癫痫模型成功后2 h?14 d 及35 d 时,灌注?固定?冰冻切片,行神经元限制性沉默因子(REST)及神经元核蛋白(neuron specific nuclear protein,NeuN)免疫组化学染色?结果 与S 组比较,EP 各组大鼠海马区REST 表达均上调,且EP-2 h 组上调最明显( P < 0.05);而EP 各组大鼠海马区NeuN 的表达降低,有明显的神经元丢失,35 d 最明显?结论 杏仁核快速电点燃癫痫的形成可能与REST 表达上调有关?

摘要:2D 细胞培养的细胞在体外环境下随着增生会逐渐丧失原来的性状;动物模型实验繁琐,价格昂贵;而3D 细胞培养模型可在一定程度上弥补动物模型和2D 细胞模型的缺陷,越来越受到大家重视?2014 年数据报道阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)65 岁以上人群发病率在5.14%,我国AD 患者2016 年已达800 万,但该病的发病机制尚未明确,对AD 的研究一直是热点及难点?本文将简单介绍2D 细胞培养和3D 细胞培养,并对3D细胞培养近些年在AD 研究方面的应用作一综述?

摘要:由于多项转化研究的失败,卒中治疗专业委员会建议,应该在非人灵长类动物局部脑缺血模型上进行临床前研究?采用血管内介入方法制备局部脑缺血模型与人类卒中发病过程一致,而且还可以进行血管内介入治疗,因此是模拟缺血性脑卒中发病与治疗过程的最佳动物模型?目前研究采用多种血管内介入方法制备模型,结果也不一致,本文将对血管内介入方法制备的非人灵长类动物进行总结,对各种模型的优缺点和潜在应用进行分析?此外,本文还根据不同类型的栓子,不同的闭塞部位,异常的血流动力学和可能的应用范围进行进一步的分析?选择合适的非人灵长类动物模型将有助于推动转化研究开展?

摘要:帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,现多认为是遗传和环境因素相互作用的结果?典型特征是黑质纹状体中多巴胺神经元丧失以及多巴胺缺乏相关的典型帕金森运动特征?动物模型在阐明PD 的发病机制?测试新的治疗方案及药物的研究中,具有十分重要的作用?啮齿类动物?树鼩和灵长类动物等采用不同造模方法所建立的PD 动物模型都拥有自己的优势和局限性,所表现出的临床特征和病理机制与人类有所不同?因此,在科学研究中选择所需使用的模型时必须仔细考虑?本文就主要神经毒素及转基因PD 动物模型的相关研究进展进行综述?

摘要:目的 通过表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor inhibitors,EGFRIs)———厄洛替尼干预小鼠,与P 物质(substance P,SP)致瘙痒小鼠进行对比性研究,探索瘙痒的发生机制?方法 两组小鼠分别予厄洛替尼和SP 致痒,观察小鼠的行为学表现和皮肤表观状态;取小鼠皮肤,比较二者的皮肤病理形态,免疫组化法检测小鼠皮肤中NK-1R 的表达;ELISA 检测小鼠外周血中白介素(interleukin,IL)-31?IL-33?组胺?白三烯B4?SP 的浓度,比色法检测一氧化氮(NO)的浓度?结果 厄洛替尼致痒表现在给药2 ~5 d 一过性瘙痒,而SP 致痒表现在给药后1 h 瘙痒明显,逐渐缓解,二者的搔抓表现一致;两种致痒各组间IL-31?IL-33?组胺?白三烯?SP 差异有显著性( P < 0.05),且部分神经递质的表达趋势表现出一定的相似性?厄洛替尼致痒小鼠和SP 致痒小鼠皮肤NK-1R 免疫组化呈阳性,分布情况一致?结论 厄洛替尼所致皮肤瘙痒可能与SP/ NK-1R 的结合有关,通过下游的信号因子致痒?

摘要:目的 比较Masson 染色?van Gieson 染色?天狼猩红(Sirius red)染色三种胶原纤维染色方法在大鼠宫腔粘连模型中的评价效果?方法 取24 只成年雌性SD 大鼠,暴露两侧子宫,左侧子宫剪开宫腔后使用机械性刮宫的方法损伤大鼠子宫内膜层,然后关腹,制作大鼠宫腔粘连模型?右侧子宫作为对照?术后14 d 取材,行HE染色?Masson 染色?van Gieson 染色?天狼猩红染色,对子宫组织纤维化进行评估?结果 刮宫后子宫组织HE 染色显示子宫内膜上皮层消失,子宫内膜腺体数量显著减少( P < 0.01)?三种染色法均能清楚地染出胶原纤维?三种染色方法计算出的纤维化面积比,Masson 染色(甲苯胺蓝)高于Masson 染色(亮绿)?van Gieson 染色和天狼猩红染色( P < 0.01)?天狼猩红染色法能够在偏振光显微镜下明确区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维,Masson 及van Gieson 染色法则不能区分?结论 天狼猩红染色较Masson 染色和van Gieson 染色能够更好地显示宫腔粘连组织的纤维化程度,并能区分胶原纤维的类型?

摘要:目的 探讨β?tubulin 在胆囊收缩素B 受体(cholecystokinin B receptor,CCKBR)和多巴胺D5 受体(dopamine D5 receptor,D5R)相互作用的调节机制?方法 选用正常人和高血压患者肾脏近曲小管细胞(renal proximal tubular cells,RPTC),各分为3 组:CCKBR 激动剂(gastrin)处理组;D5R 激动剂(fenoldopam)处理组;gastrin + 微管抑制剂(nocodazole)组?免疫荧光法测定β-tubulin?CCKBR 和D5R 的定位,免疫印迹方法检测CCKBR?D5R 和Na ⁺ , K⁺ -ATP 酶的表达?结果 Gastrin 处理正常RPTC 后D5R 表达显著增加( P < 0.05),Na⁺ , K⁺ -ATP 酶的表达降低( P <0.05),fenoldopam 同样能够刺激CCKBR 表达增加( P < 0.05),但nocodazole 预处理后再加入gastrin 并不能够增加D5R 的表达,也不能降低Na⁺ , K⁺ -ATP 酶的表达?高血压患者RPTC 中CCKBR 和D5R 的相互作用以及Na⁺ , K⁺ -ATP 酶的表达变化并不明显?免疫荧光结果显示,正常RPTC 中CCKBR 和D5R 蛋白能够被诱导转移到细胞膜上,微管抑制剂能够显著阻断转移过程,但高血压患者RPTC 中β-tubulin 杂乱无章,CCKBR 和D5R 蛋白也没能有效转移到细胞膜上?结论 tubulin 通过促进CCKBR 和D5R 从细胞质向细胞膜转运,从而发挥生物学功能,可能在二者相互作用和钠水代谢中起到重要作用?

摘要:目的 探索Sestrin2 在吸烟诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用机制?方法 使用香烟烟雾提取物(CSE)处理人肺泡Ⅱ型上皮细胞复制吸烟诱导的肺泡上皮细胞损伤?使用DCFDA 荧光探针检测ROS 的生成,ELISA 方法检测炎症因子TNF-α 和IL-8 的水平,免疫印迹方法检测Sestrin2 的表达以及过氧化物酶(Prx-SO _2/3 H)的氧化情况?同时检测Sestrin2 siRNA 以及阿奇霉素处理后细胞中Sestrin2 和Prx-SO_2/3 H 的表达以及ROS 的生成和炎症因子的分泌?结果 CSE 处理A549 细胞后Sestrin2 的表达降低,Prx-SO_2/3 H 的表达增加,ROS 的产量升高,TNF-α 和IL-8 的分泌增多,阿奇霉素能够显著缓解CSE 诱导的氧化应激及炎症损伤( P < 0.05)?A549 细胞经Sestrin2 siRNA 沉默后,超氧化的Prx-SO_2/3 H 表达增多,ROS 的产量升高,TNF-α 和IL-8 的分泌增多,但额外给予阿奇霉素不能缓解细胞的氧化应激及炎症损伤?结论 Sestrin2 通过抑制细胞内ROS 的生成在吸烟诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中发挥重要的保护作用,其机制与Sestrin2 催化还原超氧化的过氧化物酶有关?

摘要:目的 探讨PSGL-1 在小鼠盐敏感性高血压发生发展中的作用及分子机制?方法 通过对PSGL-1基因敲除(PSGL-1 ^{- / -} )小鼠及其野生型(PSGL-1 ^{+ / +} )对照小鼠,分别给予高盐(6% NaCl)和正常盐(0.4% NaCl)喂养3 个月,麻醉状态下颈总动脉插管测量小鼠血压,利用流式细胞术?免疫组化和免疫印迹方法检测小鼠组织中炎症反应和肾脏损伤情况?结果 与正常盐饮食小鼠比较,PSGL-1 ^{+ / +} 小鼠高盐饮食3 个月后血压明显升高,同时伴有皮肤和主动脉组织炎症细胞的浸润及肾脏炎症因子(IL-6,IL-1β,TNF-α)的表达增加,以及肾脏损伤的标示蛋白结缔组织生长因子(CTGF)表达量增加?而PSGL-1 ^{- / -} 小鼠高盐饮食后血压无明显变化,肾脏组织也没有出现明显的炎症细胞浸润以及炎症因子和CTGF 表达的增加?结论 PSGL-1 通过调节机体炎症反应在高盐诱导的小鼠血压升高和肾脏损伤发生发展过程中具有重要作用?

摘要:目的 探讨小檗碱(berberine,BBR)对H₂ O₂ 诱导神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖作用的影响?方法 采用悬浮培养法分离纯化新生SD 大鼠大脑NSCs?实验分为正常对照组?H₂ O₂ 组?小檗碱组?DAPT (Notch 信号通路阻断剂)组?采用Nestin 免疫化学染色鉴定NSCs,通过CCK8 检测NSCs 细胞活力,测量NSCs 平均直径反映NSCs 增殖能力,Ki67/ Nestin 双标法检测NSCs 增殖情况,Western blot 检测Ki67?Notch1?Hes1 蛋白表达?结果 Nestin 鉴定为阳性,与正常对照组相比, H₂ O₂ 组细胞存活率降低?细胞平均直径降低,Ki67 阳性率降低( P < 0.05);与H₂ O₂ 组相比,小檗碱组(5 μmol/ L)明显增强细胞活力,提高NSCs 的平均直径,上调Ki67?Notch1?Hes1 蛋白表达水平(P < 0.05),小檗碱促进损伤NSCs 增殖作用可以被DAPT 拮抗?结论 小檗碱处理提高H2 O2损伤NSCs 的存活率,可能通过Notch 信号通路发挥促增殖作用?

摘要:目的 探讨氯硝柳胺乙醇胺盐(niclosamide ethanolamine,NEN)对离体大鼠冠状动脉(rat coronary artery,RCA)的舒张作用及其机制?方法 采用微血管张力法测定RCA 血管张力,观察NEN 对预收缩血管的舒张作用;通过抑制剂实验探讨NEN 舒张RCA 与钾通道和MAPK 信号通路的关系;通过观察NEN 对血管收缩剂所致的在去钙和复钙液中收缩的影响,探讨NEN 的作用与细胞内外钙的关系?结果 NEN(0.5 ~ 3.0 μmol/ L)对KCl或U46619 所致的RCA 收缩均具有浓度依赖性的舒张作用?MAPK 抑制剂PD98059 和SB239063 减弱NEN 的舒张作用,而钾通道阻断剂四乙胺?4?氨基吡啶?氯化钡和格列本脲对NEN 的舒张作用无显著影响?NEN 减弱KCl 或U46619 所致的细胞外钙内流依赖性RCA 收缩,而对细胞内钙释放依赖性RCA 收缩无显著影响?结论 NEN 对离体RCA 有显著的舒张作用,其机制可能与其激活MAPK 信号通路?抑制细胞外钙内流有关?

摘要:目的 检测30 只普通绵耳狨猴的血液学?血清生化指标,对雌雄性别组间进行检验,与狨猴和猕猴测定值比对?方法 保持动物清醒状态,后肢静脉采血,应用全自动血细胞分析仪及血液生化分析仪分别测定血液学及血清生化指标,测定结果与狨猴和猕猴相关数据进行比较?结果 血液学指标中,雌雄组间各指标差异无显著性?血清生化检测中雌猴组与雄猴组差异有显著性的指标有高密度脂蛋白胆固醇(HDL?C)?低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)( P < 0.05),其他指标差异无显著性,对比国外狨猴群体,本单位饲养的狨猴群体的血红蛋白(HGB)?红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)?中性粒细胞(NEUT)?丙氨酸氨基转移酶(ALT)?天门冬氨酸氨基转移酶(AST)?球蛋白(GLOB)指标数据明显升高,但与猕猴数据测定值范围相符?结论 对本单位饲养的普通绵耳狨猴的血液学和血清生化指标进行测定,并与狨猴和猕猴相关数据进行比较,为药理?毒理研究以及狨猴疾病诊疗提供基础数据?

摘要:目的 研究正常恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化及可能的原因?方法 正常恒河猴在静脉攻毒后,流式细胞术检测感染前后外周血单核细胞比例及其表面分子CD169 表达量的变化;SIVmac239 直接感染和不同细胞因子刺激流式分选出的正常恒河猴外周血CD14 ⁺ 单核细胞,流式细胞术检测细胞表面CD169 和细胞因子IFN-α 表达量的变化?结果 SIVmac239 感染正常恒河猴后,CD14 ⁺ 单核细胞的比例下降,CD14 ⁺ 单核细胞表面分子CD169 表达量升高;外周血中不同单核细胞亚群CD169 的表达量均显著增加,CD14 ⁺ CD16 ⁺⁺ 单核细胞中CD169 表达量的升高更为明显?正常恒河猴外周血CD14 ⁺ 单核细胞经细胞因子M-CSF?IL-4 和IL-13 刺激后,细胞表面不表达CD169;经细胞因子IFN-α 刺激后,高表达CD169;SIVmac239 病毒直接感染CD14 ⁺ 单核细胞,细胞表面CD169 与胞内细胞因子IFN-α 的表达均无变化?结论 SIVmac239 病毒感染恒河猴后,可引起外周血单核细胞CD169 分子表达量的升高,其表达与病毒直接感染单核细胞无关,与体内其它细胞分泌的细胞因子IFN-α 相关?

摘要:目的 观察在常规剂量下使用何首乌不同炮制品的水煎液?醇提液?配方颗粒对大鼠肾脏的损伤情况及对肾细胞凋亡及相关蛋白表达的影响?方法 SD 大鼠雌雄各半,分别按照体重随机分为7 组,即正常对照组(CG)?生首乌水提组(SW 组)?制首乌水提组(ZW 组)?生首乌醇提组(SA 组)?制首乌醇提组(ZA 组)?生首乌配方颗粒组(SK 组)?制首乌配方颗粒组(ZK 组)?其中正常组给予蒸馏水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃[生药6g/ (kg·d)],连续给药30 d?实验结束时,检测血清尿素氮(BUN)?肌酐(Crea)?尿酸(UA)?β2 -微球蛋白(β2 -MG)的含量变化,并观察肾脏病理组织形态变化?细胞凋亡情况?结果 血清尿素氮含量各给药组均较正常对照组显著降低( P < 0.05, P < 0.01);肌酐?尿酸?β2 -微球蛋白含量各给药组均较正常对照组有升高趋势,制首乌醇提药液组β2 -微球蛋白含量显著升高( P < 0.05)?TUNEL 染色结果表明,各给药组平均光密度值相对于正常对照组均有显著升高( P < 0.01),生首乌醇提药液组BAX 蛋白表达水平升高最明显( P < 0.05, P < 0.01)?结论 何首乌以生药6 g/ kg 的剂量长期给药对肾脏有一定的损伤,其损伤程度为醇提法> 配方颗粒> 水提法?建议临床治疗需谨慎应用何首乌,宜采用水煎剂,需定期检测肾功能(特别是β2 -MG),以免对病人引起不可逆的肾损伤?

摘要:目的 分析正清风痛宁对骨关节炎动物模型膝关节软骨组织聚蛋白多糖酶1(ADAMTs-4)?聚蛋白多糖酶2(ADAMTs-5)蛋白表达的影响,探讨正清风痛宁治疗骨关节炎的作用机制?方法 将32 只成功建模的新西兰兔随机分为观察组和模型组,另选取16 只新西兰兔作为空白组?空白组不接受干预治疗,模型组应用生理盐水灌胃,观察组应用正清风痛宁灌胃?药物干预后4 周分离膝关节软组织,观察关节形态?关节液?关节软骨,同时进行HE 染色和ADAMTs-4?ADAMTs-5 mRNA 检测(RT-PCR 法),利用统计方法分析组间数据?结果 模型组关节软骨分级和Mankin’s 评分高于观察组和空白组,观察组关节软骨分级和Mankin’s 评分高于空白组( P < 0.05)?模型组ADAMTs-4 和ADAMTs-5 mRNA 表达显著高于观察组和空白组,观察组ADAMTs-4 和ADAMTs-5 mRNA 表达显著高于空白组( P < 0.05)?结论 正清风痛宁可改善骨关节炎动物模型关节病变程度,可能与其抑制ADAMTs-4 和ADAMTs-5 表达有关?

摘要:目的 利用血管铸型标本和CT 重建三维模型技术探讨小型猪头颈部血管的解剖结构及其应用?方法 制作一例小型猪头颈部血管铸型标本,通过128 层螺旋CT 扫描铸型标本,并重建小型猪头颈部血管的三维模型?结果 铸型标本清晰显示小型猪头颈部血管的分布及其走行特点,其三维数字化模型逼真?立体感强,能从多角度?多层面地显示小型猪头颈部血管的走行及分布吻合情况?结论 采用铸型标本和三维数字化模型相结合的方式对小型猪头颈部血管的分布及走行特点进行了探究,为建立猪脑血管模型从实体标本与虚拟化模型两方面提供了形态学的参考依据?

摘要:目的 建立树鼩副粘病毒(Tupaia paramyxovirus,TPMV)PCR 检测方法,并进行初步应用?方法 根据NCBI 公布的TPMV 基因组序列,选择8231 bp ~8720 bp 区域人工合成一段DNA 序列并转入质粒中,作为阳性标准质粒?根据TPMV 保守区域设计一对特异性引物,考察方法的特异性和灵敏度,并应用于60 份树鼩呼吸道咽拭子cDNA 及12 份树鼩肺组织cDNA 的检测中?结果 所建立的PCR 检测方法特异性好,灵敏度高,可达11.5 × 10 ^-5 μg/ mL?60 份树鼩呼吸道咽拭子cDNA 及12 份树鼩肺组织cDNA 检测均为阴性?结论 建立的树鼩副粘病毒PCR 检测方法特异性强,灵敏度高,可用于树鼩副粘病毒的常规检测中?

摘要:目的 探究C57BL/6 小鼠不同尾静脉注射方法的差异,为小鼠尾静脉注射提供更为安全?可靠?成功率高的基础实验依据?方法 将320 只小鼠按照随机数字法随机分成4 组:空白对照组?白炽灯烘烤法组?三头线法组和联合应用法组?选择穿刺小鼠左侧或右侧外周静脉进行取血,记录各组穿刺成功率,采用SPSS 13.0 统计软件进行分析,比较各组间的统计学差异?结果 与空白对照组相比,白炽灯烘烤法组?三头线法组和联合应用法组穿刺成功率均显著提高( P < 0.001)?其中,三头线法组优于白炽灯烘烤法组( P < 0.001),而联合应用法组成功率则明显高于三头线法组和白炽灯烘烤法组( P < 0.001)?结论 C57BL/6 小鼠尾静脉不同注射方法中,联合应用法操作简单,可重复性高,穿刺成功率很高,值得进一步推广使用?

摘要:中国地鼠是我国具有研究价值的特色实验动物资源,在医学?遗传学和生物制药等研究领域都发挥着重要作用?随着研究的深入,越来越多的中国地鼠生物学特性被发现,目前建立了诸多的中国地鼠模型?本文对中国地鼠的开发研究过程及其在分类学和医学研究中的应用作简要概述?

摘要:接触性过敏性皮炎是由外源化合物引起的多种细胞共同参与的IV 型迟发变态反应,传统动物实验选用豚鼠或小鼠?随着皮肤致敏有害结局通路(AOP)研究的深入,为基于分子起始事件和关键事件的替代方法开发提供了思路?树突状细胞(DC)激活在AOP 通路中起到了承上启下的关键作用,基于DC 开发了多项替代方法,有的方法经过验证已被列入测试指南?本文从树突细胞的筛选,检测参数的特征,方法的局限性和适用性进行了讨论,并对树突细胞与其它细胞之间相互作用?共培养体系?人体芯片等方面的进展作了介绍,为进一步优化致敏检测的体外替代方法提供参考?

摘要:实验动物是生命科学?医学研究的重要组成部分,是国家科技创新的重要支撑?实验动物科学对保障人类健康?食品安全和生物安全具有重要意义?食品安全?药物?疫苗?生物制品开发以及人类疾病发病机理研究等,都离不开实验动物?为适应中国实验动物行业的整体发展需求,本单位自主研发了“实验动物从业人员网络培训系统”,该系统是一套集实验动物实际操作和理论知识于一体的网络教育培训平台,包括动物福利?动物饲养?动物手术等7 个知识模块,以管理人员?实验人员?实验动物医师和饲养人员为培训对象,旨在加速实验动物的人才培养和团队建设,促进行业培训的转型发展?