摘要:目的　探讨黄芪甲苷与阿魏酸合用调控JAK-STAT 通路对氯化钴所致的缺氧人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖的作用及机制。方法　建立人脐静脉内皮细胞氯化钴缺氧损伤模型,采用CCK-8 和活细胞染色技术,检测药物对细胞的增殖作用;采用荧光染色技术,观察细胞形态的变化;采用划痕实验测定细胞迁移能力;通过成管实验,观察药物对内皮细胞体外成管作用;采用Western blot 法检测各给药组对p-JAK2 和p-STAT3 蛋白表达的影响。结果　与模型组相比,黄芪甲苷与阿魏酸联合作用于氯化钴所致的缺氧HUVECs 24 h,可明显促进HUVECs 的增殖,并改善由于缺氧所致的细胞形态的变化,促进细胞的迁移,有利于血管生成。同时可上调p-STAT3 和p-JAK2 蛋白的表达。结论　黄芪甲苷与阿魏酸合用对氯化钴所致的缺氧HUVECs 有保护作用,其机制可能与激活JAK-STAT 信号通路有关。

摘要:目的　应用抗体芯片技术检测慢性肾脏病(chronic renal disease,CKD)血管钙化大鼠模型血清中的炎症细胞因子水平,并探讨炎症与血管钙化之间的关系。方法　30 只SD 雄性大鼠分成对照组和模型组,每组15只。模型组大鼠联合腺嘌呤灌胃和阿霉素尾静脉注射建立大鼠慢性肾脏病血管钙化模型;对照组大鼠给予相应的生理盐水处理。给药28 d 后取材检测肾功能、电解质等生化指标,天狼猩红染色法检测肾纤维化病变,HE 染色检测血管病理改变,von Kossa 染色法检测血管钙化程度,免疫组织化学染色法检测平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)及Runt 相关转录因子2(Runx2)表达。细胞因子抗体芯片检测两组大鼠血清中27 种细胞因子水平的变化。结果　模型组大鼠血肌酐、尿素氮及钙磷水平升高;天狼猩红染色显示模型组大鼠肾有明显的纤维化病变;HE 染色显示主动脉中膜有弹性纤维断裂;von Kossa 染色显示模型组大鼠主动脉中膜层有大量黑色颗粒沉积;免疫组织化学染色显示模型组较对照组α-SMA 表达减少而Runx2 表达增多。抗体芯片结果显示模型组CINC、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-6、MCP-1、ICAM-1、TIMP-1、L-selectin、IL-2 及IL-10 较对照组均有不同程度的升高,而IL-4、IL-13、fractaikine、IL-1β、TNF-α 较对照组降低。结论　慢性肾脏病血管钙化大鼠发生了明显的炎症反应失衡,其中致炎因子占主导作用。

摘要:目的　研究不同时间睡眠干扰(sleep interruption,SI)后所致小鼠体力疲劳,为缓解体力疲劳产品研发提供稳定可靠的动物模型。方法　使用滚筒睡眠干扰仪对小鼠进行不同时间(5, 10, 15 d)睡眠干扰后,对各组动物进行转轮实验和负重游泳实验,并测定小鼠肝糖原和血清尿素氮的含量。结果　转轮实验中,睡眠干扰5 d、10 d、15 d 组与对照组比较时间有减少的趋势,但差异无显著性( P > 0. 05)。睡眠干扰10 d、15 d 组与空白对照组比较,负重游泳力竭时间明显缩短( P < 0. 05, P < 0. 01),下沉次数和下沉总时间显著减少( P < 0. 01, P < 0. 01)。干扰5 d、10 d、15 d 组与对照组比较,肝糖原含量明显降低( P < 0. 05);干扰10 d、15 d 组与对照组比较,血清尿素氮含量显著升高( P < 0. 05)。结论　滚筒法睡眠干扰(滚动参数3 r/ min,每转1 min,间隔1 min)10, 15 d 均可引起小鼠的体力疲劳行为学表现。

摘要:Effects of Wenjingzhitong decoction on the AKT / mTOR pathway in endometriosis rats

摘要:目的　建立5-氟尿嘧啶联合机械划伤致金黄地鼠口腔黏膜炎的模型。方法　雄性金黄地鼠分为对照组和模型组,模型组动物分别在第1 天和第2 天腹腔注射60 mg/ kg、40 mg/ kg 的5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),第4 天将金黄地鼠右侧颊囊外翻,用18 号针头以线性划伤的方式形成口腔浅表划伤。对照组动物分别在第1 天和第2 天腹腔注射等体积的生理盐水。造模后每天观察各组动物右侧颊囊宏观变化并拍照评分,同时记录体重和每只动物日平均进食量。分别在造模后第8 天和第14 天取血测定血清中促炎症细胞因子TNF-α 和IL-1β 的含量,取右侧颊囊组织进行HE 染色并测定丙二醛(malondialdehyde,MDA) 含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果　与对照组相比,模型组金黄地鼠在造模后第3 天右侧颊囊组织出现溃疡面且宏观评分最高,造模后8 d 内动物日平均进食量明显减少且体重下降。造模后第8 天和第14 天金黄地鼠右侧颊囊组织结构存在损伤,呈现炎症反应,血清中TNF-α、IL-1β 的含量均有明显升高,颊囊组织中MDA 含量明显升高,SOD 活性明显降低。结论　5-氟尿嘧啶联合机械划伤可以导致金黄地鼠口腔黏膜炎的形成,在造模后8 d 内炎症反应明显,第3 天最明显,可用于口腔黏膜炎发病机制及治疗药物的研究。

摘要:目的　探讨阿司匹林对大鼠盐敏感性高血压的调节作用及相关机制。方法　2 月龄盐敏感性大鼠(Dahl SS) 及其对照盐耐受性大鼠(SS-13BN)分别给予低盐(0. 12% NaCl,LS)、高盐(8% NaCl,HS)、高盐加阿司匹林灌胃((10 mg/ (kg·d)),HS+ASA)饲养至8 周,期间尾袖法连续测量动脉血压,8 周后颈总动脉插管测量大鼠动脉血压,Real-time PCR 检测肾组织炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α 的表达,免疫荧光检测皮肤M2 型巨噬细胞的数量,免疫印迹检测血管功能代表性蛋白eNOS、vWF 的表达。结果　Dahl SS 大鼠高盐喂养后,血压明显升高,肾组织炎症因子和血管vWF 因子表达量显著增加、皮肤M2 型巨噬细胞数量及血管eNOS 表达量明显减少,阿司匹林能够有效改善Dahl SS 大鼠高盐诱导的血压升高、炎症反应及血管功能的损伤,而SS-13BN 大鼠并未出现上述情况。结论　阿司匹林通过抗血小板功能抑制了Dahl SS 大鼠由高盐诱导的炎症反应,抑制了血管功能损伤及高血压发生发展。

摘要:目的　繁育和鉴定 FOXO 3A 基因敲除小鼠,选育的 FOXO 3A 基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析 FOXO 3A 基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A 基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法　杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR 方法进行基因型鉴定,鉴定获得100 bp/186 bp 两条条带的为杂合型小鼠( FOXO 3A+/ - ),鉴定获得186 bp 条带的为纯合型小鼠( FOXO 3A-/ - ),鉴定获得100 bp 条带的为野生型小鼠( FOXO 3A+/ + ,WT);采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果　 FOXO 3A 基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/ N 小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示, FOXO 3A 基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[(6. 167 ±1. 424) vs. (10 ± 1. 732)],未见明显差异( P =0. 1625);流式分析结果显示: FOXO 3A 基因敲除小鼠骨髓中造血祖细胞(lin-scal-1- ckit+ ,HPC)比例明显升高( P <0. 05),造血干细胞(lin-scal-1+ ckit+ ,HSC)比例没有明显差异;造血干细胞和造血祖细胞数目未发现有明显差异( P >0. 05)。结论　经基因型鉴定已成功获得 FOXO 3A 基因敲除小鼠。初步探讨 FOXO 3A 基因敲除对小鼠骨髓细胞计数及分型未见明显影响, FOXO 3A 基因敲除对小鼠造血细胞的影响需要进一步的实验加以证明。

摘要:目的　探究BDNF、TrkB 受体及BDNF/ TrkB 信号通路在急性低氧与低氧预适应小鼠中的表达变化及作用,进一步完善低氧预适应神经保护的分子机制,为低氧预适应的临床应用提供理论依据。方法　以ICR 小鼠为对象,分别构建急性低氧与低氧预适应小鼠模型,模型构建完成0~4 d 后,通过Western blot、real-time PCR 技术,检测小鼠海马脑区BDNF、TrkB 受体在早期相和晚期相的表达及BDNF/ TrkB 信号通路活性的变化。结果　研究发现随着小鼠低氧次数的增加,耐受时间明显增加( P <0. 05);较对照组,急性低氧和低氧预适应组BDNF 及全长型TrkB 受体表达有增加的趋势,在低氧预适应早期相BDNF 蛋白水平表达显著增加( P <0. 05)。较对照组,截短型TrkB 受体表达则有降低的趋势,在低氧预适应中、晚期相其mRNA 表达显著降低( P <0. 05);较对照组,急性低氧组BDNF/ TrkB 信号通路活性被抑制,而低氧预适应组BDNF/ TrkB 信号通路活性有增加的趋势,且在晚期相差异有显著性( P <0. 05)。结论　低氧预适应可能是通过上调BDNF 表达并增加其与TrkB 受体的结合,以及下调截短型TrkB 受体表达,减少异二聚体形成,从而共同激活BDNF/ TrkB 信号通路,最终对小鼠产生神经保护作用。

摘要:目的　探讨参一胶囊联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌生长、血管生成的抑制作用及可能的机制。方法　建立BALB/ c 小鼠LoVo 结肠癌模型50 只,随机分为5 组,根据处理方式的不同分为模型组、5-FU 组、参一胶囊低剂量组、参一胶囊高剂量组、参一胶囊+ 5-FU 组。检测记录各组小鼠肿瘤体积、肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)、免疫器官变化,采用Western -Blot 法检测瘤体Gli1、VEGF 蛋白蛋白表达。结果　1)与模型组相比,各治疗组小鼠的肿瘤体积均受到明显抑制。参一胶囊高剂量组、参一胶囊+5-Fu 组的抑瘤率最高,且随着给药时间的延长,这种抑制优势愈加明显。(2)与模型组比较,5-FU 组小鼠的免疫器官质量及指数出现降低,其余各治疗组均有不同程度提高。参一胶囊+5-FU 组的胸腺质量、胸腺指数、脾质量、脾指数改善最为显著,明显好于所有其他治疗组( P <0. 05)。(3)参一胶囊+5-FU 组对MVD 的抑制作用最明显,参一胶囊高剂量组次之,低剂量组抑制更弱,单纯5-FU 组对肿瘤MVD 无明显影响。(4)与模型组相比,5-FU 组、参一胶囊低剂量组小鼠各种类型的结肠癌转移均未表现出明显的抑制作用( P >0. 05)。高剂量参一胶囊组、参一胶囊+5-FU 组小鼠的结肠癌各器官转移率均显著降低( P <0. 05)。(5)Western blot 检测结果显示,与模型组相比,5-FU 组及参一胶囊低剂量组小鼠的Gli1 蛋白、VEGF 蛋白表达量均较低,但差异无显著性( P >0. 05)。参一胶囊高剂量组、参一胶囊+5-FU 组的Gli1 蛋白、VEGF 蛋白表达量则显著降低( P <0. 05)。结论　参一胶囊对结肠癌细胞的生长及血管生成均有明显的抑制作用,这种抑制作用在于5-FU 配伍应用时更为显著,Hedgeog-Glin1 信号通路相关的VEGF 表达可能是其主要的作用靶点。

摘要:目的　测定和比较健康恒河猴与食蟹猴基础血清细胞因子水平。方法　分别采集15 只健康恒河猴和15 只健康食蟹猴血清,采用luminex xMap 技术测定血清43 种细胞因子的浓度,根据正态性检验( W 检验)结果选择随机t 检验或非参数检验(Mann-Whitney test)比较群体间差异。结果　测定的43 种细胞因子中,1 种促炎症因子(IL-15)、3 种抑炎症因子(IL-1RA、IL-6R α 和sCD27)和1 种趋化因子(CCL5/ RNATES)存在显著性群体间差异。结论　研究结果表明,恒河猴与食蟹猴基础血清细胞因子水平差异不显著,用于生物医学研究中具有一定的可比性。同时,本研究结果可为相关研究提供基础数据。

摘要:目的　观察玛咖结合运动疗法对糖尿病大鼠肾线粒体呼吸酶活性及肾功能的影响。方法　将40只糖尿病模型大鼠随机分为模型对照组、玛咖组、运动组和玛咖+运动组。玛咖组和玛咖+运动组每日灌胃玛咖粉剂(5 g/ kg),运动组和玛咖+运动组进行跑台训练。6 周后各组大鼠进行力竭运动(35 m/ min),随后即刻麻醉提取肾线粒体,测定线粒体呼吸链酶RCCI、RCCII、RCCIII、RCCIV 活性及血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)、血糖(blood glucose)含量。结果　与对照组比较,玛咖组大鼠肾线粒体呼吸链酶RCCII,运动组RCCI、RCCII,玛咖+运动组RCCI、RCCII、RCCIV 活性显著升高;与玛咖组比较,玛咖+运动组RCCI、RCCII 活性显著升高;与运动组比较,玛咖+运动组RCCII 活性显著升高。与对照组比较,玛咖组、玛咖+运动组大鼠血尿素氮含量,运动组、玛咖+运动组血清肌酐、血糖水平降低,差异有显著性( P < 0. 05 或 P < 0. 01);与玛咖组比较,玛咖+运动组血清肌酐、血糖水平降低,差异有显著性( P < 0. 05);与运动组比较,玛咖+运动组血尿素氮、血糖水平降低,差异有显著性( P < 0. 05)。结论　玛咖结合运动疗法可以提高老龄糖尿病大鼠肾线粒呼吸功能,提高机体氧化磷酸化水平,改善肾机能。

摘要:目的　探讨右美托咪定调控TLR4 表达对神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及其机制。方法　体外培养PC12 神经细胞,复制氧糖剥夺细胞模型,以低(0. 1 μmol/ L)、中(1. 0 μmol/ L)和高剂量(10. 0 μmol/ L)右美托咪定作用24 h 后,CCK-8 法检测细胞存活率,Western blot 检测Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)、B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2(Bcl-2)和Toll 样受体4(TLR4)蛋白的表达,RT-PCR 法检测TLR4 mRNA 的表达,ELISA 法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量。在复制氧糖剥夺细胞模型中,以TLR4 抑制剂TAK-242 抑制TLR4 表达后,给予右美托咪定作用,观察细胞存活率、Bax 蛋白、Bcl-2 蛋白、TLR4 蛋白、TNF-α 含量和IL-6 含量的变化。结果　低、中和高剂量右美托咪定作用后,PC12 细胞存活率升高,Bax 和TLR4 蛋白表达、TLR4 mRNA 表达以及TNF-α 和IL-6 含量降低,而Bcl-2 蛋白表达升高( P <0. 05),且表现出浓度依赖性。TAK-242 处理后,TLR4 表达降低,PC12 细胞存活率升高,Bax 蛋白表达以及TNF-α 和IL-6 含量降低,而Bcl-2 蛋白表达升高( P <0. 05);给予右美托咪定作用后,TAK-242 的上述作用明显增强( P <0. 05)。结论　右美托咪定可通过抑制TLR4 表达保护神经细胞氧糖剥夺损伤。

摘要:目的　探讨不同剂量全氟辛烷磺酸盐(perfluorooctane sulphonate,PFOS)染毒对大鼠胚胎发育及胎盘胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)表达的影响。方法　将孕12 d 的48 只SD 雌性大鼠,随机分为4 组给予不同剂量的PFOS(0, 5, 10, 20 mg/ kg),连续灌胃7 d,在孕19 d 时处死孕鼠,检测孕鼠和胎鼠的体质量、胎鼠肝系数、孕鼠血清PFOS 和糖皮质激素(glucocorticoid,GC)水平、胎盘IGF-1 表达水平。结果　与对照组相比,随着PFOS 剂量增加,染毒组孕鼠血清PFOS 显著蓄积,孕鼠体质量、胎鼠体质量和体长、胎盘质量均逐渐下降,PFOS 20 mg/ kg 组差异有显著性( P < 0. 001);胎鼠肝系数也表现相同趋势,低中高剂量染毒组均显著低于对照组( P < 0. 05),血液生化丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)与天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)也随着PFOS 给药剂量的增加而增高( P < 0. 05);PFOS 10 mg/ kg 组,孕鼠血清GC 水平升高( P < 0. 05);胎盘IGF-1 表达水平随PFOS 剂量升高而降低。结论　孕期长期暴露PFOS 会导致孕鼠血清PFOS 含量蓄积,进而导致胎鼠肝毒性,GC 含量升高,胎盘IGF-1 表达水平降低,最终影响胎鼠的生长发育。

摘要:目的　采用小鼠局部淋巴结实验(BrdU-ELISA)法检测25%氰氟草酯乳油的致敏性。方法　1. 选用雌性BALB/ C 小鼠进行实验,受试样品设为100%、50%、25%,同时设阴性对照组[丙酮:橄榄油(acetone: olive oil,AOO)= 4∶1]、阴性对照组(橄榄油)及阳性对照组(25%已基肉桂醛),连续双耳背面染毒3 d,第6 天腹腔注射BrdU 溶液(5 mg/ 只),24 h 后采集耳后淋巴结称重等并通过BrdU-ELISA 实验方法检测淋巴增殖情况。结果　各剂量组的小鼠体重与对照组比较,差异均无显著性( P > 0. 05);各剂量组的耳厚度增加和耳重均不超过25%;溶剂和空白对照组的刺激指数SI₁和SI₂ <1. 6,阳性对照组(25%已基肉桂醛)的刺激指数SI₁和SI₂ >1. 6,实验系统可靠;25%氰氟草酯乳油低、中、高剂量组的刺激指数SI₁和SI₂ <1. 6,无剂量反应关系。结论　25%氰氟草酯乳油的小鼠局部淋巴结实验结果为阴性,即25%氰氟草酯乳油为无致敏性。

摘要:目的　验证团体标准中微卫星标记检测法应用于实验动物遗传质量检测,在3 家实验室是否具有较好的重复性。方法　3 家实验室同时应用12 个微卫星位点对6 份实验小鼠DNA 进行PCR 扩增,扩增产物经琼脂糖电泳和测序。结果　北京实验室获得清晰电泳条带,获得等位基因数72 个;浙江实验室获得清晰电泳条带,获得等位基因数72 个;广东实验室获得清晰电泳条带,获得等位基因数72 个。测序结果表明3 家实验室获得片段大小一致的等位基因。结论　微卫星标记检测法可以实现对实验动物的遗传质量评价,并在不同实验室获得较好的重复性。

摘要:近些年大量的文献对实验大小鼠采血方法进行了比较研究,以探究出最适合的采血方法,从而获得高质量的血液样本。本文主要介绍了几种实验大小鼠常用的采血方法,及不同采血方法对动物福利的影响,为选择最适的采血方法提供相关的理论依据,提高实验效率,降低实验影响。

摘要:目的　针对实验动物设施建设中主流应用的两种独立通风笼具(individually ventilated cage,IVC)系统送风方式的特点进行总结,分析其不同的适用性。方法　根据典型案例,从安全可靠性、空间利用率、运行能耗、监控调节、初投资这五方面对两种送风方式的具体特点进行详细分析。结果　针对每一对比项,比较得出了两种送风方式各自的优缺点。结论　两种送风方式各具优势。送风方式A 适用于较小规模的设施,适用于对笼盒参数需要分散、灵活调控的项目;送风方式B 适用于中大型的设施。

摘要:手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)是一种常见的儿童传染病,在世界范围内爆发流行,严重危害儿童健康。HFMD 由20 多种肠道病毒引起,其中最主要的为肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)型。大量的研究表明,手足口病取决于病毒、宿主和环境等因素的共同作用。病毒入侵后逃逸宿主天然免疫或获得性免疫反应的监视,引起各种病理反应。这不仅涉及病毒自身的感染特性,也与宿主相关基因,如受体基因、免疫反应基因有密切关系。最近几年,手足口病致病相关宿主基因的研究成为热点,但是这些基因多与地域、种族、人群密切相关,不同地域或者相同地域的不同人群的研究结论常常不尽一致。因此,寻找与HFMD 密切关联,广泛适用的致病相关宿主基因很有必要。遗传多样性小鼠(genetic diversity mice)是模拟人群基因多样性、研究复杂性状或疾病的新型工具。本文对已报道的HFMD 致病相关宿主基因的研究工作作综述,并对遗传多样性小鼠在HFMD 研究的重要作用和意义作展望。

摘要:针对实验目的不同选择合适的小鼠肝损伤动物模型对于临床上肝病的防治、发病机制的研究和护肝药物的筛选都有着重要意义。依据国内外参考文献将肝损伤小鼠模型归纳为化学性、药物性、免疫性、酒精性、肝部分切除术等几类。以小鼠肝损伤动物模型分类为切入点,对其发病机制、药物剂量、成模时间、适用范围及优缺点进行综述,以期为小鼠实验性肝损伤模型的选择提供一个参考。

摘要:神经系统疾病是发生于中枢神经系统、周围神经系统、植物神经系统并以感觉、运动、意识、植物神经功能障碍为主要表现的疾病,其给患者的生活和工作带来了重大的影响。传统中医认为肉桂具有“补元阳、暖脾胃、除积冷、通血脉”的作用。现代研究认为其具有抗氧化、清除自由基、抗炎和抗溃疡等作用。近年许多研究表明,肉桂对痴呆、帕金森、多发性硬化等神经系统疾病均有良好的药用效果。因此,本文就国内外关于肉桂治疗神经系统疾病的研究进展及潜在药用价值作一综述。