摘要:目的 通过 CatWalk步态分析系统,对帕金森小鼠模型的步态变化进行分析评估。 方法 用MPTP诱导建立帕金森小鼠模型,在建立模型成功后,利用 CatWalk 步态分析仪进行相关步态参数的测定,并对测定结果 进行统计分析。 结果 与空白对照组相比,模型组小鼠脚步模式混乱;小鼠通过某特定距离的时间( run duration)、最大速率变化( maximum variation)、支撑相时间( stance)、脚步周期( step cycle)显著增加;而平均速度( average speed)、单位时间脚步数(cadence)、摆动速度(swing speed)、步幅( stride length)显著降低。 结论 CatWalk 可以作为评估帕金森小鼠模型行为学变化的一种更直观、精确、有效的新方法。

摘要:目的 通过建立C57BL/ 6小鼠化学诱发性肝癌模型模拟肝癌发生发展进程探索肝癌发生机制。 方法 选取110只C57BL/ 6小鼠,随机分为对照组(30 只)和模型组(80只),对照组小鼠无处理,模型组通过灌胃给药CCl4联合腹腔注射DEN的方法建立肝癌模型;持续测量小鼠体重,不同时间节点解剖小鼠观察肝形态、测定静脉血血清中肝功能相关酶的水平、观察肝组织病理学变化。 结果 与对照组相比,模型组小鼠体重逐渐降低,肝形态失常,血清中肝功能相关酶 ALT、AST升高,有明显的肝癌组织病理学改变。 结论 二乙基亚硝胺(DEN)联合四氯化碳(CCl4 )可诱发C57BL/ 6小鼠肝癌,为研究肝癌发生发展的分子机制提供可靠的动物模型。

摘要:目的 观察心肌梗死大鼠痛阈的可塑性改变,探究烟碱对内脏痛的影响及对缺血心肌是否有保护作用。 方法 选取 SPF级Sprague-Dawlay 健康雄性大鼠 30只,体重180~ 200 g,以随机数字原则分为假手术组、模型组、烟碱治疗组。各组大鼠均观察心电图(ECG)、痛阈(热痛阈 PWL、机械痛阈 PWT)、左心室内压幅度变化、心脏体重指数、肌酸激酶同工酶(CK-MB) 的改变。 结果 模型组较假手术组比,机械痛阈变小,热痛阈变大(P< 0. 05);而血浆 CK-MB 活性、心脏体重指数、左心室内压明显升高(P<0. 05)。烟碱治疗组较模型组比,机械痛阈变大,热痛阈变小;血浆CK-MB 活性、心脏体重指数、左心室内压明显降低 (P<0. 05),差异具有统计学意义。 结论 烟碱对心肌梗死大鼠的心肌缺血症状以及由于缺血造成的内脏疼痛均有一定的缓解作用,其作用机制可能和胆碱 能抗炎通路激活有关,从而起到改善大鼠疼痛和保护大鼠心脏的作用。

摘要:目的 研究人参多糖(ginseng polysaccharides,GSP)对乙醇诱导的行为敏化的影响及可能机制。 方法 KM小鼠80只随机分为五组,空白组、模型组、GSP 低剂量组(100 mg / kg)、GSP中剂量组(200 mg / kg)和GSP高剂量组(400 mg / kg)。除空白组外,其余各组可自由摄取水或乙醇,乙醇浓度随时间逐渐递增(3% ~ 12%,每4天递增3%),经过4 d转化期后给予初始剂量 3%乙醇激发,以此建立主动摄取乙醇的行为敏化模型。实验周期内每天测量各组乙醇消耗量和自主活动;转化期进行开场实验;表达期测定行为敏化的表达。酶联免疫吸附法 (ELISA)检测前额叶皮层MDA含量及SOD和CAT活力。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测前额叶皮层 ERK、p- ERK和c-fos蛋白表达。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测前额叶皮层p-ERK、C-FOS 的 mRNA 表达。 结果 GSP三个剂量显著降低形成期内9%和12%乙醇引起的自主活动增加,并显著抑制初始剂量 3%酒精激发(第 25 天)诱导的自主活动增加和乙醇摄入。GSP 中、高剂量能够显著减少开场实验的爬格数和站立次数。GSP 可显著 抑制乙醇诱导的前额叶皮层 MDA 水平的增加,并提高 SOD 和 CAT 的活性。Western blot 和 Real-time PCR 实验结 果表明GSP 能够下调前额叶皮层p-ERK和c-fos 蛋白和mRNA 的过度表达。 结论 GSP 对乙醇诱导的小鼠行为敏化和乙醇摄取有抑制作用,这种作用可能通过干预 ERK/ c-fos 通路。

摘要:目的 研究有氧运动联合姜黄素对ob/ob糖尿病小鼠胰岛素抵抗及肝病理性变化的影响,同时检测其对肝脂肪酸β氧化信号通路的影响,探讨其作用的具体机制。 方法 将 32 只ob/ob糖尿病小鼠分为糖尿病对照组(ON组),有氧运动干预组(OA组),姜黄素干预组(OC组),有氧运动+姜黄素干预组(OAC组),另外8只C57/BL6J作为正常对照组(NC组)。实验过程中对 OA组和OAC组小鼠实施每周6天的有氧运动游泳训练;对OC组和OAC组小鼠给予姜黄素治疗(50 μg / (g·d));所有小鼠干预均持续8周后,检测小鼠葡萄糖耐受和胰岛素 抵抗情况;肝的病理性变化以及肝中脂肪酸β氧化信号通路的变化情况。 结果 经过实验干预后,OA组、OC组和OAC组胰岛素敏感性显著增强,其中OAC组几乎达到正常对照NC组水平; OA组、OC 组和OAC组血清中反应肝功能的指标TC和TG均低于糖尿病对照ON组,肝功能明显改善;糖尿病小鼠的肝纤维化水平得到明显缓解,OA组、OC组和OAC组显著低于糖尿病对照 ON 组,OAC组与NC组无显著性差异;肝中脂肪酸合成相关基因的表达没有显著变化,但OA组、OC组和OAC组小鼠肝中脂肪酸β氧化相关基因的表达显著高于ON组,并且OAC组显著高于 OA组和OC组; Western blot结果显示OA组、OC组和OAC组小鼠肝中脂肪酸β氧化途径中限速酶肉碱脂酰转移酶Ⅰ(carnitine palmityl transferaseⅠ, CPT-I)的表达显著高于ON组。 结论有氧运动联合姜黄素可以促进 糖尿病小鼠肝中脂肪酸β氧化关键限速酶CPT-I 的表达,从而促进脂肪酸β氧化的发生,增强脂质分解,改善肝的病理变化,并且增强胰岛素敏感性,为 2 型糖尿病的治疗提供了新的思路。

摘要:目的 观察醒脑静注射液对Beagle犬昏迷治疗的量效关系的影响。 方法 雄性 Beagle犬42只,体重 8~ 10 kg,按体重随机分为正常对照组、模型对照组、醒脑静注射液剂量 1 组(0. 43 mL/ kg)、剂量 2 组(0. 86 mL/ kg)、剂量3双次给药组((0. 43+0. 43) mL/ kg)、剂量 4 组(1. 29 mL/ kg)、剂量5双次给药组((0. 65+0. 65) mL/ kg),犬采用陆眠宁(0. 02 mL/ kg)麻醉后固定在自制打击器中,将打击器置于 150 cm 处,垂直打击犬颅脑枕部,连续打击4次,建立犬外伤脑损伤昏迷模型。造模后随即给予不同剂量醒脑静注射液,给药体积10. 0 mL/ kg,观察苏 醒时间,随后进行脑部核磁共振检测,给药14 d后进行核磁共振检查,取血检测血常规及肝肾功能、血清S-100钙结合蛋白(S-100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量。取各组动物心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、脑进行组织病理学检查。 结果 醒脑静注射液剂量1、剂量2(单次给药)、剂量 3(2 次给药)能明显减少犬苏醒时间。醒脑静剂量 1、醒脑静剂量 2、醒脑静剂量4能明显降低血清S100B、NSE 含量。醒脑静剂量1、剂量2、剂量3(2次给药)、剂量 4、 剂量5(2次给药)能明显增加犬脑核磁共振检测损伤恢复面积(P<0. 05)。 醒脑静注射液剂量 1 组、2 能明显降低血常规淋巴细胞、嗜酸性粒细胞数目;醒脑静注射液剂量1能明显降低犬单核细胞数目;醒脑静注射液剂量4、5对犬血常规无明显影响。醒脑静注射液各给药组对肝肾功能指标(ALT、AST、TBil、BUN、CRE)无明显差异。各组动 物心、肝、脾、肺、肾、脑器官组织病理学未见明显差异。 结论 醒脑静注射液能明显改善 Beagle 犬脑外伤致昏迷和 脑损伤程度,且大剂量使用无明显的毒副作用。

摘要:目的 观察白消安(busulfan)对 2 型糖尿病模型 KK/ upj-Ay / J(KKA^y )小鼠的造血系统功能的损伤作用,并与对照C57BL/6J(B6)小鼠进行比较。 方法 雄性KKA^y小鼠,随机分为白消安给药组和溶剂对照组,前者腹腔注射白消安,剂量40 mg/kg,后者注射同等剂量的5%的 DMSO,B6小鼠进行相同处理分组。给药后 15 d称重、计算免疫脏器系数,检测小鼠的外周血计数和分类,流式细胞术检测骨髓中造血祖细胞( hematopoietic progenitor cell,HPC)、造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)和长期造血干细胞(long term-hematopoietic stem cell,LT-HSC) 的比例。通过粒细胞巨噬细胞集落形成单位( colony-forming unit-granulocyte and macrophage,CFU-GM)测定实验评价小鼠造血祖细胞的功能。 结果 白消安给药后 15 d,KKA^y 小鼠的体重、白细胞(white blood cell,WBC)、红细胞 (red blood cell,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(blood platelet,PLT)、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)、中性 粒细胞(neutrophil,NEU)、骨髓中 HPC、HSC 和LT-HSC 的比例均显著降低,CFU-GM 数目明显降低,脾和胸腺细胞 的比例未见明显变化。 白消安给药后,KKAy 小鼠的 WBC、RBC、HGB 和 LYM 明显低于B6小鼠,但PLT和HSC的比例明显高于B6小鼠。KKA^y小鼠的PLT和HSC 的降低幅度显著低于B6小鼠,而HPC的降低幅度明显高于B6小鼠。 结论 40 mg / kg白消安给药能损伤小鼠的造血系统功能。白消安给药后,KKA^y小鼠的WBC、RBC、HGB 和 LYM 损伤较重,但 PLT和HSC损伤较轻且耐受性更强,而造血祖细胞的耐受性低于B6小鼠。

摘要:目的 建立一种快速高效不需要呼吸机辅助、操作简便的小鼠右心室压力的测定方法,并探讨测定技巧。 方法 23只C57BL/ 6 J小鼠(8周龄)随机分成低氧组(11只)和对照组(12只),低氧组于低氧舱(10% O₂ )内饲养4周制备肺动脉高压模型,对照组在正常空气中饲养,其余条件均相同。模型制备后用0.6×25 mm一次性输液器针头在小鼠胸腔密闭状态下经肋间肌直接穿刺右心室并接多导生理仪测定右心室收缩压( right ventricular systolic pressure, RVSP),开胸验证穿刺点的位置,分离心脏,称右心室(right ventricular, RV)、左心室加室间隔(left ventricular + septum, LV+S)的重量,计算右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index, RVHI =RV/ (LV + S)×100%,取左肺进行病理切片并作苏木精-伊红( hematoxylin and eeosin, HE)及 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)染色,观察肺动脉结构改变。 结果 经肋间肌直接穿刺右心室得到右心室压力曲线,整个过程均在3~ 4 min 内完成,RVSP测定成功率 95. 6%(对照组 1 只失败)。低氧组RVSP和RVHI分别为(30. 48±2. 95) mmHg 和(35. 31±3. 78)%,均显著高于对照组的(17. 50±3. 40) mmHg 和(23. 14±4. 29)%(均为P<0. 05)。低氧组小鼠肺小动脉管壁明显增厚,中膜平滑肌增殖。 结论 经肋间肌穿刺测定小鼠右心室压力曲线的方法,保持动物胸腔密 闭无需呼吸机辅助通气,简便快捷,能够快速评估小鼠右心室的血流动力学状态,成功率高,值得推广使用。

摘要:目的 研究幼年期、成年期和老年期小鼠侧脑室下区( subventricular zone,SVZ)中基因表达的增龄性变化。 方法 分别提取3周龄、6月龄和 20月龄C57小鼠SVZ的mRNA,基于转录组测序及实时荧光定量 PCR 技术,检测 SVZ 中在不同年龄阶段的基因表达差异。 结果 以幼年期小鼠为对照,成年期检测到253个差异表达的基因,老年期检测到 519个,以成年期作对照,老年期检测到147个差异表达的基因。GO 分析发现成年期小鼠 与幼年期相比差异表达基因主要涉及营养和代谢,老年期小鼠与成年期相比主要涉及中枢神经系统神经元分化等。KEGG 分析发现差异表达基因主要涉及通路为蛋白质消化吸收、神经活性配体-受体相互作用等。 结论 该研究提供了不同年龄段SVZ 转录水平基因变化的数据,为探讨SVZ 的功能发育和退化,进一步治疗和抵抗神经衰 老提供新的理论依据和方法。

摘要:目的 对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。 方法 解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种在SS琼脂培养基进行培养,培养时间24 h观察细菌生长情况, 进行生化鉴定和8种药敏试验。 结果 菌落呈白色或乳白色、圆形、湿润、不透明,进一步分离培养,经梅里埃微生物生化鉴定,确定该细菌为阴沟肠杆菌,ID:99. 9%,T:0. 71,ID 编码:35074753311;药敏试验表明该菌对氨苄西林,头孢呋辛中等敏感;对诺氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、头孢曲松、头孢哌酮,头孢噻肟敏感。动物实验表明该分离菌对实验小鼠具有致病性。 结论 该恒河猴肺部感染阴沟肠杆菌,头孢哌酮,头孢噻肟等药物可作为治疗临床用药。

摘要:目的 拟通过建立急性小鼠与慢性大鼠高尿酸血症模型,并采用阳性药验证两种模型的可治愈性,为抗高尿酸药物的研发提供模型工具。 方法 急性痛风模型小鼠采用腹腔注射次黄嘌呤联合皮下注射氧嗪酸钾 的方法造模,造模后半小时阳性组给予别嘌醇片,造模后2 h测定血尿酸、血肌酐、血清尿素氮及肝黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。慢性痛风大鼠每天灌胃腺嘌呤及乙胺丁醇盐酸盐造模,阳性组每天给予别嘌醇片,连续 21 d 后检测 血尿酸、血肌酐、血清尿素氮、肝XOD活性并进行肾组织病理学检测。 结果 急、慢性痛风模型动物血尿酸、血肌酐均显著升高(P<0. 05),慢性痛风大鼠还可见血清尿素氮及肝XOD活性显著升高(P<0. 05),肾小管间质损伤及尿酸盐结晶加重,评分显著升高(P<0. 05)。阳性药别嘌醇可显著降低急、慢性高尿酸动物的血尿酸值,降低慢性高尿酸动物的血肌酐值、肝XOD活性,改善肾损伤及减少尿酸盐结晶(P<0. 05)。 结论 本实验所采用的方法适用于建立急、慢性高尿酸血症动物模型,并可用于药物药效学观察。

摘要:目的 以自发突变导致的先天性晚发白内障小鼠为模型,进行遗传方式鉴定和白内障相关基因定位分析。 方法 首先通过显微镜观察组织切片鉴定白内障病理状态,其次通过构建家系确定先天性晚发白内障在FVB小鼠中的遗传方式,其次利用多重PCR靶向测序进行 100只F2代小鼠的全基因组SNP扫描定位,最后利用全外显子测序筛选出候选突变基因。 结果 组织切片表明自发突变引起为典型白内障性状,全基因组扫描定位显示11号染色体上的 rs4228772 SNP位点与白内障表型连锁程度最高;全外显子测序结果进一步表明11号染色体 上有三个基因产生了自发突变,分别是Sfi1,Obscn和Ptrh2。 结论 本研究使用全基因组 SNP 扫描连锁分析与外显子测序相结合的策略,可在已知参考基因组的物种中快速定位基因突变,结果确定了11号染色体上的三个突变基因为先天性晚发型白内障的候选基因,并以显性方式遗传。 该策略亦可应用于其它遗传背景清晰的模式哺乳动物的基因功能研究。

摘要:目的 探讨干扰SOX6基因表达H₂O₂诱导的星形胶质细胞(AS)凋亡、线粒体膜电位及PI3K/AKT信号通路影响。 方法 从乳大鼠大脑皮质分离培养AS细胞,将细胞分为阴性对照组(NC组):A转染无干扰作用siRNA;H₂O₂组:20μmol / L的H₂O₂处理AS细胞24 h;H₂O₂+NC组:无干扰作用的siRNA转染AS细胞24 h,20mol / L的H₂O₂处理细胞24 h;H₂O₂+si-SOX6组:SOX6特异性siRNA转染AS细胞24 h后,20 μmol / L的H₂O₂处理细胞 24 h。通过LDH试剂盒、流式细胞术及JC-1探针分别检测细胞毒性、凋亡率及线粒体膜电位; Western blotting 检测SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和 p-AKT蛋白表达。 结果 H₂O₂ 可明显上调AS细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9和Bax表达,下调Bcl-2和 p-AKT 表达,提高细胞毒性,诱导细胞凋亡,而干扰SOX6 基因表达可明显减弱H₂O₂对细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和p-AKT 表达及细胞毒性和凋亡影响。 结论 干扰 SOX6 基因表达可通过抗凋亡途径保护H₂O₂诱导的AS损伤,此保护作用与线粒体通路及PI3K/ AKT 信号通化激活有关。

摘要:实验动物作为遗传背景明确和微生物质量控制的活体研究材料,是生命科学创新、医药成果转化及 农业产业发展不可或缺的战略资源。近年来,各部门和地方大力加强了实验动物科技工作,组建了完善的科研团 队,承担了大型的科研项目,建设了若干省部级重点实验室和工程(技术)研究中心,但尚缺乏高水平创新团队和国 家级科技创新设施,如国家重点实验室、国家工程(技术)研究中心等。创新能力建设是实验动物平台基地开展科技创新和产业发展的基础支撑条件。在科技部基础司指导下,本文通过对卫健委人类疾病比较医学重点实验室、新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室、北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心以及中国科学院模式与特色动物实验平台等进行调研,了解掌握了我国 实验动物平台基地科技创新能力建设的成效,发现其总体上存在源头创新不足、科研经费紧缺、高层次人才匮乏等 问题,并针对性地提出强化顶层设计、推行管理改革、加强投入和能力建设、组建人才队伍、提升开放共享水平等建议,以供参考。

摘要:目的 测定自主建立的转基因小鼠 hTIM4-EGFP 的血液生理生化指标。 方法 分别测定 12周龄各8只雌性和10只雄性的同窝阴性小鼠与转基因 hTIM4-EGFP小鼠的22项血液生理指标和12项血液生化指标,利 用统计学方法分析组间差异。 结果 转基因组与野生组在10项生理指标( WBC、RBC、HGB、HCT、MCH、RDW、 PLT、NEUT、LYM%、NEUT%) 和 4 项生化指标(ALT、AST、TG、P)间存在差异;转基因组在MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、NEUT、NEUT%、ALP、CHO 指标中存在雌雄差异。对照组在RBC、HCT、MCV、LYM、NEUT、LYM%、 NEUT%、AST、ALT、P 指标中存在雌雄差异。 结论 人源化Tim4基因敲入的C57BL/ 6小鼠的部分血液生理生化指标与野生型存在差异,该测定为 hTIM4-EGFP小鼠的研究应用提供了基础数据。

摘要:目的 综合评估大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)模型建立的改良方法。 方法 将 45只SD大鼠随机分 3组:快速操作组、常规开胸组和改良组,每组15只。 分别采用快速 操作、常规开胸造模及改良方法进行大鼠心肌缺血再灌注手术造模,收集大鼠心脏进行TTC+伊文思蓝染色观察, 分别从造模成功率、大鼠存活率、心肌损伤情况三方面进行分析比较。 结果 与快速造模和开胸造模组相比,改良方法造模的成功率、成活率均有所提高,且心肌梗死面积厚度统一。 结论 心肌缺血再灌注损伤模型构建方法改良后的可行性较高,可推广应用。

摘要:目的 利用热管式空气换热器对实验动物设施排放的气体进行换热,回收排放气体中的温度能量,并对回收的能量在新风上进行利用,降低新风的能量消耗,达到节能减排的目的。 方法 使用热管式空气换热器在实 验动物设施进排风系统之间进行热交换。 结果 实验动物设施利用热管式空气换热器进行换热,回收排风中的能量进行利用,全年节约能源约 45%。 结论 热管式空气换热器适合于室内外温差较大、需大量换气、能够产生一定热量 的空调设施,该环境下应用该设备,节能效果显著,能够明显实现节能减排的目的,具有广泛的社会和经济意义。

摘要:转化医学是连接基础学科与实验室、临床学科间的桥梁,是目前国际和国内培养复合型医学人才的主要理念。本文就参加我校生物化学与分子生物学开放式动物实验课程学习的过程和学习效果进行了阐述和探 讨,表明在生物化学与分子生物学开放式动物实验中引入转化医学的理念,将理论知识与实验实践紧密联系,既提 高了理论知识学习的兴趣,又培养和锻炼了科研思维和动手能力。

摘要:PTX3(pentraxin 3,PTX3)是一种可溶性识别分子,在炎症因子和外源微生物刺激下由多种细胞快速产生,在细菌、真菌和病毒感染引发的天然免疫中发挥重要作用。研究发现,PTX3 蛋白在炎症条件下可结合外源 抗原,从而激活补体、启动吞噬等免疫效应;在癌症中PTX3通过与补体C1q(Complement component 1q)H因子(Factor H,FH)相互作用,激活并调节补体级联,可作为外源性抑癌因子,抑制肿瘤相关炎症;在损伤组织中,PTX3 与纤维蛋白结合又能发挥组织修复作用。因此,PTX3 蛋白是抗感染反应、癌症进程和组织修复的关键成分。此 外,PTX3 还可作为多种人类疾病的生物标志物,为临床诊断提供新的依据。本文结合国内外对 PTX3 研究的进展情况,对其在不同生物学过程中的功能作用做详细介绍。