摘要: 目的 筛选稳定的高尿酸血症大鼠模型方法。 方法 单用或联合氧嗪酸钾、果糖、次黄嘌呤造模, 观察不同给药方式和时间制备的高尿酸血症大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮水平、黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)活性、肝肾病理切片变化、肾三磷酸腺苷结合转运蛋白 G 超家族成员 2(ATP binding cassette subfamily g member 2,ABCG2)蛋白表达情况。 结果 与正常组相比,单用氧嗪酸钾造模 7 d 大鼠血清尿酸、尿素氮水平、AST、XO 活力显著上升(P<0. 05), 肝肾有轻微损伤,肾 ABCG2 蛋白表达显著下降(P<0. 05)。 果糖和氧嗪酸钾联合造模 7 d 大鼠血清尿酸显著升高 (P<0. 05),血清肌酐、尿素氮水平、AST、ALT、XO 活力、肾 ABCG2 蛋白表达无差异变化(P>0. 05),联合造模 14 d 大鼠血尿酸、尿素氮水平和 XO 活力显著上升(P<0. 05),AST 和 ALT 活力无差异变化(P>0. 05),肝肾损伤不显著。次黄嘌呤和氧嗪酸钾联合造模 7 d,大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮水平、AST、ALT、XO 活性显著升高(P<0. 05),肝肾损伤严重,肾 ABCG2 蛋白表达量下降(P<0. 05)。 结论 单用氧嗪酸钾可建立轻微肝肾损伤的急性高尿酸血症模型,果糖联合氧嗪酸钾可建立肝肾损伤小的慢性高尿酸血症模型,次黄嘌呤联合氧嗪酸钾可建立肝肾损伤严重的急性高尿酸血症模型。

摘要: 目的 探讨针刺对阿尔茨海默症小鼠海马 CA1 区树突结构及认知功能的影响。 方法 24 只雄性快速老化 SAMP8 小鼠,随机分为模型组和针刺组,各 12 只;另选取 12 只雄性正常老化 SAMR1 小鼠为对照(对照组)。 对照组和模型组小鼠不做处理,针刺组小鼠接受为期 8 周(隔日治疗一次)的针刺治疗,针刺部位为百会穴、肾俞穴、太溪穴。 Morris 水迷宫实验检测小鼠认知功能;取小鼠海马 CA1 区,Golgi 染色观察锥体细胞树突结构;免疫组织化学染色法检测 Aβ_1-40和 Tau 表达;Western blot 检测 BDNF、SYN 和 MAP2 蛋白表达水平。 结果 (1)与对照组比较,模型组水迷宫训练第 5 天时逃避潜伏期较高,而跨平台次数较低(P<0. 05)。 与模型组比较,针刺组水迷宫训练第 5 天时逃避潜伏期较低,而跨平台次数较高(P<0. 05)。 (2)与对照组比较,模型组基底树突长度、顶端树突长度、基底树突分数数目和顶端树突分支数目均较低(P<0. 05)。 与模型组比较,针刺组上述指标均较高(P< 0. 05)。 (3)与对照组比较,模型组 Aβ_1-40和 Tau 表达的平均光密度值较高(P<0. 05)。 与模型组比较,针刺组上述 指标较低(P<0. 05)。 (4)与对照组比较,模型组 BDNF、SYN 和 MAP2 蛋白表达水平均较低(P<0. 05)。 与模型组比较,针刺组上述指标均较高(P<0. 05)。 结论 针刺百会、肾俞和太溪穴可能通过激活 BDNF/ SYN/ MAP2 信号通路,改善海马 CA1 区树突长度和分支数目从而改善快速老化 SAMP8 小鼠的认知功能。

摘要: 目的 研究比较不同浓度干酵母、脂多糖注射诱导兔发热模型的体温变化特点,为基础实验提供参考。 方法 将 30 只 2 月龄新西兰雄兔随机分为 5 组,分别为正常组、20%干酵母组、10%干酵母组、0. 5 μg / mL 脂多糖组、0. 2 μg / mL 脂多糖组,每组各 6 只。 干酵母组于造模前及造模后每 1 h 监测肛温至 26 h、脂多糖组于造模前及造模后每 20 min 监测肛温至造模后 6 h,记录体温与其他症状、体征的变化特点,绘制平均体温曲线,计算各时间点体温变化,比较各组体温变化趋势。 结果 皮下注射干酵母悬浊液,注射后 2 h 内体温下降,低于基础体温。 2 ~ 4 h 体温开始上升,6~ 8 h 达峰值,高温可持续至少 20 h,且随注射浓度的增加,升温值增大,峰值出现的时间延后。耳缘静脉注射脂多糖,40 min 开始发热,体温曲线为双相热或三相热,致热后 60 ~ 80 min 达体温曲线第一峰,发热可持续至致热后 240~ 300 min,且升温值与脂多糖注射剂量无明显关系,随注射剂量增大发热时程增长。 结论 干酵母和脂多糖是诱导兔发热的可靠模型,干酵母模型为长时、高热发热模型,脂多糖模型发热时程较短。 应根据实验需要选择合适的致热模型。

摘要: 目的 探讨环状 RNA 同源域相互作用蛋白激酶 3(circHIPK3)低表达对 β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的 海马神经元凋亡的影响。 方法 采用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证微小 RNA-124(miR- 124)与 HIPK3、信号转导和转录激活因子 3(STAT3)的靶向关系;将体外培养的原代海马神经元分为对照组(正常培养)、Aβ 组(给予 Aβ 刺激)、Aβ+siSTAT3-NC 组(转染 siSTAT3-NC 后给予 Aβ 刺激)、Aβ+siHIPK3 组(转染 siHIPK3 后给予 Aβ 刺激)、Aβ+siHIPK3+antimiR-NC 组(共转染 siHIPK3 和 inhibitor-NC 后给予 Aβ 刺激)、Aβ+ siHIPK3+antimiR-124 组(共转染 siHIPK3 和 miR-124 inhibitor 后给予 Aβ 刺激)、Aβ+siHIPK3+antimiR-124+siSTAT3 -NC 组(共转染 siHIPK3、miR-124 inhibitor 和 siSTAT3-NC 后给予 Aβ 刺激)和 Aβ+siHIPK3+antimiR-124+siSTAT3 组(共转染 siHIPK3、miR-124 inhibitor 和 siSTAT3 后给予 Aβ 刺激)。 采用实时荧光定量 PCR( qRT-PCR) 检测 HIPK3 和 miR-124 表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测 STAT3 蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪 分别检测海马神经元存活率和凋亡率,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(Caspase-3) 活性检测试剂盒检测 Caspase-3 活性。 结果 生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验证实 HIPK3 可与 miR-124 靶向结合;生物 信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验和 Western blot 实验证实,miR-124 可靶向调控 STAT3 蛋白表达。 与对照组比较,Aβ 组海马神经元中 HIPK3 表达水平、STAT3 蛋白表达水平、凋亡率和 Caspase-3 活性明显升高,而海马神经元存活率和 miR-124 表达水平明显降低(P<0. 05);与 Aβ+siHIPK3-NC 组比较,Aβ+siHIPK3 组中上述各指标 明显逆转(P<0. 05);与 Aβ+siHIPK3+antimiR-NC 组比较,Aβ+siHIPK3+antimiR-124 组中各指标呈明显变化(P< 0. 05),且趋势与 Aβ+siHIPK3 组相反;与 Aβ+siHIPK3+antimiR-124+siSTAT3-NC 组比较,Aβ+siHIPK3+antimiR-124 +siSTAT3 组中各指标呈明显变化(P<0. 05),且趋势与 Aβ+siHIPK3+antimiR-124 组相反;而 Aβ 组与 Aβ+siHIPK3- NC 组之间、Aβ+siHIPK3 组与 Aβ+siHIPK3+antimiR-NC 组之间以及 Aβ+siHIPK3+antimiR-124 组与 Aβ+siHIPK3+ antimiR-124+siSTAT3-NC 组之间各指标差异无统计学意义(P>0. 05)。 结论 CircHIPK3 低表达可抑制 Aβ 诱导的海马神经元凋亡,其作用机制与调控 miR-124 / STAT3 轴有关。

摘要: 目的 观察微小 RNA-574-3p(microRNA-574-3p,miR-574-3p)对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的作用机制。 方法 采用结肠癌细胞 HCT116 作为实验对象,细胞转染 miR-574-3p mimic 和阴性对照分别作为 miR-574-3p mimic 组和阴性对照组,同时以正常 HCT116 细胞作为空白对照组。 RT-qPCR 检测细胞 miR-574-3p 表达;CCK-8 法检测细胞增殖活力;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot 法检测 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 及 P53 蛋白表达变化。 结果 与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic 组 miR-574-3p 表达明显上调(P<0. 01),且在 36~ 72 h 细胞活力明显降低(P<0. 01)。 与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic 组细胞克隆形成率显著降低(P<0. 01),同时 S 期细胞比例显著增加(P<0. 01)。 相较于阴性对照组,miR- 574-3p mimic 组 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 蛋白表达显著下调(P<0. 01),P53 蛋白表达明显上调(P<0. 01)。 阴性对照组与空白对照组上述各指标均无明显差异。 结论 miR-574-3p 可抑制结肠癌 HCT116 细胞增殖,这可能与下调 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 及上调 P53 蛋白表达,最终诱导细胞 S 期阻滞有关。

摘要: 目的 探讨 miR-122 在糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN)小鼠肾组织中的表达变化以及沉默 miR-122 对 DN 小鼠肾组织的影响及可能的机制。 方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立 C57BL/ 6 小鼠 DN 模型。 将造模成功的 30 只 DN 小鼠随机分为模型组、antagomir-NC 组、antagomir-122 组,每组 10 只,另外选取未做任何处理的健康 C57BL/ 6 小鼠 10 只作为正常对照组。 造模成功后,antagomir-122 组和 antagomir- NC 组每 7 d 分别给予尾静脉注射 antagomir-122 和 antagomir-NC 进行干预,模型组和正常对照组给予尾静脉注射等量生理盐水代替。 8 周后收集血清、尿液后处死小鼠取得肾标本,自动生化仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和 24 h 尿蛋白定量水平,过碘酸雪夫(PAS)染色评价肾组织病理学变化,qRT-PCR 检测肾组织 miR-122 的表达水平, 试剂盒检测肾组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)水平,Western blot 检测肾组织 Sirt1、α-SMA、fibronectin 蛋白的表达水平。 结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肾小球硬化评分上升(P<0. 05),肾组织 miR-122 和 α-SMA、fibronectin 蛋白的表达明显升高(P<0. 05),血清 Cr、BUN 水平,24 h 尿蛋白定量水平,肾组织 MDA 水平明显增高(P<0. 05),肾组织 GSH-Px 和 SOD 水平、Sirt1 蛋白表达水平均明显降低(P< 0. 05)。模型组与 antagomir-NC 比较,各项指标差异无统计学意义(P>0. 05)。 与 antagomir-NC 组比较,antagomir- 122 组小鼠肾小球硬化评分下降(P<0. 05),肾组织 miR-122 和 α-SMA、fibronectin 蛋白的表达明显降低(P<0. 05), 血清 Cr、BUN 水平,24 h 尿蛋白定量水平,肾组织 MDA 水平明显下降(P<0. 05),肾组织 GSH-Px 和 SOD 水平、Sirt1 蛋白表达水平均明显升高(P<0. 05)。 结论 miR-122 在 DN 小鼠肾组织中表达升高。沉默 miR-122 通过抗氧化应激和纤维化对 DN 小鼠肾组织起到明显的保护作用,其机制可能与其对 Sirt1 基因的调控有关。

摘要: 目的 探讨龙胆苦苷对 H₂₂肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及抗血管生成机制。 方法 右腋皮下注射 H₂₂细胞悬液建立 H₂₂肝癌小鼠模型,并随机分为模型组、龙胆苦苷低、高剂量组(50 mg / kg、100 mg / kg)及环磷酰胺组(20 mg / kg),每组 10 只;另选取 10 只健康小鼠,作为正常组;给药 14 d 后,检测体重、瘤重、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量及瘤组织碱性成纤维生长因子( bFGF)、转化生长因子-β (TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇-3 激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶 B(p-Akt)表达水平。 结果 与 H₂₂肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠体重无明显变化(P>0. 05),而瘤重明显降低(P<0. 01), 其抑瘤率分别为 30. 43%及 42. 93%;与 H₂₂肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠胸腺指数、脾指数及血清 IFN-γ、IL-2 含量明显升高(P<0. 05 或 P<0. 01),而瘤组织 bFGF、TGF-β、VEGF、p-PI3K 及 p-Akt 表达明显降低(P< 0. 05 或 P<0. 01)。 结论 龙胆苦苷对 H₂₂肝癌小鼠肿瘤生长及血管生成均有抑制作用,该作用与提高免疫力,增加血清 IFN-γ、IL-2 含量及抑制 PI3K/ Akt 信号通路的活化有关。

摘要: 目的 探讨小陷胸汤对高血脂症(hyperlipemia,HLP)小鼠血管内皮损伤的影响。 方法 选用 36 只 C57BL/ 6 小鼠,随机分为对照组,模型组,低剂量组(0. 03 g / mL 小陷胸汤)、中剂量组(0. 06 g / mL 小陷胸汤)、高剂量组(0. 12 g / mL 小陷胸汤)和洛伐他丁组(2. 5 mg / kg 洛伐他丁),每组 6 只,通过高脂饲料喂养 8 周建立 HLP 模型并给予相应药物进行干预。 给药期间观察各组小鼠一般行为学状态,每周称重一次;HE 染色观察主动脉血管组织病理学变化;免疫组化法检测小鼠主动脉组织血管假性血友病因子( von Willebrand factor,vWF)的表达;qRT-PCR 检测小鼠主动脉组织血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor, VEGF)、酪氨酸蛋白激酶 Eph 受体 B4 (EPH receptor B4,EphB4)及其胞膜附着型配体 B2(EphrinB2)的 mRNA 水平;Western blot 检测小鼠主动脉组织 VEGF、EphB4 和 EphrinB2 蛋白水平。 结果 与对照组相比,模型组小鼠活动量和摄食量减少,毛发较差,体重增加,主动脉组织中 vWF、VEGF、EphB4、EphrinB2 表达水平升高;与模型组相比,小陷胸汤各剂量组和洛伐他丁组小鼠活动量和摄食量增加, 毛发光亮, 体重减少, 主动脉组织 中 vWF、 VEGF、 EphB4、 EphrinB2表达水平降低(P<0. 05);与低剂量组比较,中、高剂量组小鼠主动脉组织中 VEGF、EphB4 和 EphrinB2 mRNA 及蛋白表达水平降低(P<0. 05)。 结论 小陷胸汤可抑制 HLP 的发展,对小鼠血管内皮具有保护作用。

摘要: 目的 观察不同种属和造模方法对黄褐斑动物模型的影响,为成功复制符合黄褐斑临床病症特点的动物模型提供思路借鉴。 方法 使用 SD 大鼠,KM 小鼠以及 C57BL/ 6 小鼠复制黄褐斑动物模型。 其中 SD 大鼠,随机分为正常组和黄体酮高、中、低剂量造模组(25 mg / kg、15 mg / kg 和 7. 5 mg / kg),KM 小鼠,随机分为正常组和黄体酮高、低剂量造模组(30 mg / kg、20 mg / kg),造模组分别于后肢根部肌内注射黄体酮注射液,正常组于相同部位注射与高剂量造模组等体积的生理盐水,连续 30 d。 此外,C57BL/ 6 小鼠,随机分为正常组、紫外线联合黄体酮造模组和紫外线造模组,紫外线联合黄体酮造模组后肢根部肌内注射 20 mg / kg 的黄体酮注射液,每日一次,同时每 2 d 进行一次紫外线照射,紫外线组每天肌内注射等体积生理盐水,每 2 d 进行一次紫外线照射,正常组注射等体积生理盐水,不做紫外干预,连续 21 d。 各组造模结束后取病变局部皮肤组织做 HE 染色和 Masson-Fontana 染色,光镜下观察黑色素颗粒变化情况。 结果 与正常组相比,SD 大鼠和 KM 小鼠造模组黑色素未见明显变化, C57BL/ 6 小鼠造模组黑色素颗粒明显增多。 结论 黄体酮单独干预 SD 大鼠和 KM 小鼠等白化鼠难以模拟黄褐斑黑色素沉着的典型临床表现,C57BL/ 6 小鼠是一个建立黄褐斑模型相对可靠的动物品系,利用紫外线联合黄体酮以及单独紫外线照射的方法均能成功复制 C57BL/ 6 小鼠黄褐斑动物模型。

摘要: 目的 探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞 HEC-1-B 中 miR-30b 表达促进细胞自噬的作用机制。 方法 实时荧光定量聚合酶链式反应( qRT-PCR)检测 miR-30b 在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细 胞株 HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2 中的表达水平。 取 miR-30b 表达水平最高的 HEC-1-B 癌细胞分为 HEC-1-B 癌细胞组、miR-30b inhibitor NC 组(转染 miR-30b inhibitor NC)、miR-30b inhibitor 组(转染 miR-30b inhibitor)以及 AE 组 (30 μmol / L AE,未转染)和 AE+转染组:AE+miR-30b mimics NC 组(30 μmol / L AE,转染 miR-30b mimics NC)、AE+ miR-30b mimics 组(30 μmol / L AE,转染 miR-30b mimics)。 qRT-PCR 法检测各组细胞 miR-30b 表达水平;CCK-8 法检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色法检测各组细胞自噬率; 蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组细胞自噬相关蛋白 Beclin1、LC3-I、LC3-II 和 p62 表达水平。 结果 与人正常子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A、HEC-1-B 和 RL95-2 癌细胞中 miR-30b 表达水平显著升高(P< 0. 05)。 其中 HEC-1-B 癌细胞中 miR-30b 表达水平最高,所以后续将选择 HEC-1-B 癌细胞进行转染实验。与 HEC-1-B 癌细胞组和 miR-30b inhibitor NC 组相比,miR-30b inhibitor 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著降低(P< 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著升高(P< 0. 05)。 与 HEC-1-B 癌细胞组相比,AE 组和 AE+miR-30b mimics NC 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著降低(P< 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著升高(P< 0. 05)。 与 AE+miR-30b mimics NC 组相比,AE+miR-30b mimics 组癌细胞 miR-30b 表达水平、细胞增殖率以及 p62 蛋白表达水平显著升高(P< 0. 05),细胞凋亡率、自噬率以及 Beclin1 蛋白表达水平和 LC3-II/ I 比值显著降低(P< 0. 05)。 结论 子宫内膜癌细胞中 miR-30b 表达较高,AE 可能通过抑制 miR-30b 表达,促进癌细胞自噬和凋亡,抑制癌细胞 增殖,而过表达 miR-30b 可逆转 AE 发挥的作用。

摘要: 目的 探讨 miR-16-5p 对缺氧复氧诱导的大鼠正常肝细胞系 BRL-3A 焦亡的作用以及作用机制。 方法 通过细胞缺氧复氧的方法构建肝缺血再灌注损伤(HIRI)的体外模型,通过流式细胞术检测细胞焦亡率;通过荧光实时定量 PCR(RT-qPCR)检测 miR-16-5p 的表达水平;运用 miR-16-5p mimic 在细胞中过表达 miR-16-5p 并研究 miR-16-5p 对细胞焦亡的影响;通过蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测焦亡相关蛋白 caspase1、IL-1β、IL-18 的蛋白表达水平;通过生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验预测并鉴定 miR-16-5p 与 NLRP1 的靶向关系; 通过过表达和干扰 NLRP1,研究 NLRP1 及 miR-16-5p / NLRP1 轴对细胞焦亡的影响。 结果 与空白对照组相比,模型组焦亡率极显著上升(P<0. 01),miR-16-5p 表达量显著降低(P<0. 05)。 过表达 miR-16-5p 极显著抑制细胞焦亡 (P<0. 01)并抑制焦亡相关蛋白 caspase1、IL-1β、IL-18 的表达(P<0. 01 或 P<0. 05)。 双荧光素酶报告基因实验显示 NLRP1 是 miR-16-5p 的靶基因,过表达 miR-16-5p 显著降低了 NLRP1 的 mRNA 和蛋白水平( P< 0. 01 或 P< 0. 05)。 此外,过表达 NLRP1 逆转了 miR-16-5p 对细胞焦亡的抑制作用(P<0. 01)和对 caspase1、IL-1β、IL-18 表达的抑制作用(P<0. 01 或 P<0. 05)。 结论 MiR-16-5p 通过靶向 NLRP1 来抑制 caspase1、IL-1β、IL-18 的表达,从而改善缺氧复氧引起的 BRL-3A 细胞焦亡。

摘要: 目的 探讨右美托咪定预处理对大鼠离体缺血再灌注(myocardial ischemia-reperfusion injury, MIRI) 心脏的保护作用以及对缝隙连接蛋白 43 ( connexin43, Cx43) / 线粒体 ATP 敏感性钾通道( mitochondrial ATP- sensitive potassium channel, mito-KATP)信号轴的调控机制。 方法 构建离体心脏 Langendorff 灌注模型。 采用随机数字表法将 50 个离体心脏分为 5 组(n= 10):空白组(Blank 组)、缺血再灌注组(I/ R 组)、缺血再灌注+右美托咪定预处理组(I/ R+Dex 组)、缺血再灌注+右美托咪定预处理+mito-KATP 通道阻断剂 5-HD 组( I/ R+Dex+5-HD 组)、缺血再灌注+mito-KATP 通道阻断剂组(I/ R+5-HD 组)。 采用停灌 30 min,再灌注 120 min 的方法制备大鼠离体心脏心肌缺血再灌注损伤模型。 Blank 组以 K-H 溶液持续灌流 180 min;模型组以 K-H 溶液灌流 30 min,停止 30 min,再以 K-H 溶液灌流 120 min,造成 MIRI 损伤;I/ R+Dex 组以含 10 mg / L 的右美托咪定的 K-H 溶液灌流 30 min,停止 30 min,再以 K-H 溶液灌流 120 min;I/ R+Dex+5-HD 组先以含 10 mg / L 的 mito-KATP 通道阻断剂 5-羟葵酸(5-HD)的 K-H 溶液灌流 15 min,含 10 mg / L 的右美托咪定的 K-H 溶液灌流 15 min,停止 30 min,再以 K-H 溶液灌流 120 min; I/ R+5-HD 组先以含 10 mg / L 的 5-HD 的 K-H 溶液灌流 30 min,停止 30 min,再以 K-H 溶液灌流 120 min。 TTC 染色检测各组心脏心梗死面积比例。 免疫组化检测各组心脏中 Cx43 的表达。 Western blot 检测各组心脏中 p-Cx43 的表达水平。 结果 与 Blank 组相比,I/ R 组、I/ R+Dex 组、I/ R+Dex+5-HD 组、I/ R+5-HD 组心脏的心肌梗死面积明显升高,Cx43、p-Cx43 的表达明显降低;与 I/ R 组相比,I/ R+Dex 组、I/ R+Dex+5-HD 组心脏的心肌梗死面积明显降低, Cx43、p-Cx43 的表达升高,I/ R+5-HD 组心脏的心肌梗死面积明显升高,Cx43、p-Cx43 的表达明显降低;与 I/ R+Dex 组相比,I/ R+Dex+5-HD 组、I/ R+5-HD 组心脏的心肌梗死面积明显升高,Cx43、p-Cx43 的表达明显降低,差异均具有统计学意义(P<0. 05)。 结论 右美托咪定预处理能够促进 Cx43 的表达及磷酸化,促进 mito-KATP 通道的开放, 减轻离体心脏的缺血再灌注损伤。

摘要: 目的 探讨 miR-338-3p 影响食管癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制及其对 WNK1 的靶向调控作用。 方法 体外培养人正常食管上皮细胞株 Het-1A 与人食管癌细胞 Eca-109、EC-1、EC9706,采用 qRT-PCR 与 Western blot 分别检测 miR-338-3p、WNK1 的表达水平;以 EC9706 细胞为研究对象,分别将 miR-con、miR-338-3p mimics、si-con、si-WNK1、miR-338-3p mimics 与 pcDNA、miR-338-3p mimics 与 pcDNA-WNK1 转染至 EC9706 细胞; MTT 法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、Transwell 小室实验检测迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测 miR-338-3p 与 WNK1 的靶向关系。 结果 与 Het-1A 比较,食管癌细胞 Eca-109、EC-1、EC9706 中 miR-338-3p 的表达显著下调(P<0. 05),WNK1 mRNA 及蛋白表达显著上调(P<0. 05);转染 miR-338-3p mimics 或 si-WNK1 可明显降低 EC9706 细胞的活力、迁移及侵袭细胞数(P<0. 05),增加 EC9706 细胞的凋亡率(P<0. 05);双荧光素酶报告实验证实 miR-338-3 靶向结合 WNK1;共转染 miR-338-3p mimics 与 pcDNA-WNK1 可明显逆转转染 miR-338-3p mimics 对细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的作用。 结论 miR-338-3p 可靶向下调食管癌中的 WNK1,进而抑制食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭,和诱导细胞凋亡。

摘要: 目的 探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子 1 / 叉头状转录因子 O1( Sirt1 / FoxO1)通路对多囊卵巢综合征( PCOS) 大鼠颗粒细胞自噬的影响。 方法 大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体 (FSHR)免疫荧光鉴定,且 CCK8 检测 APS 对卵巢颗粒细胞增殖的影响。 10^-5 mol / L 丙酸睾丸酮、10 μmol / L C2-神 经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞 24 h 诱导 PCOS 大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8 检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中 Sirt1、FoxO1、微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)蛋白表达情况。 结果 免疫荧光检测显示,FSHR 蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量 93. 18% > 90%,可进行接下来实验。 0、100、200、400 μg / mL APS 处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁 0、24 h 比较,细胞 OD₄₅₀差异均无统计学意义(P>0. 05)。与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100 μg / mL APS 组与模型组细胞结构类似,随着 APS 剂量的升高,自噬小体数量减少,在 400 μg / mL APS 组时细胞正常。正常组、模型组、100、200、400 μg / mL APS 组在细胞贴壁 0 h 时,细胞 OD₄₅₀差异无统计学意义(P>0. 05)。细胞贴壁 24 h,与正常组相比,模型组细胞 OD₄₅₀降低(P<0. 05),细胞中 Sirt1、FoxO1、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ蛋白水平升高(P<0. 05);与模型组相比,100、200、400 μg / mL APS 组细胞 OD₄₅₀升高(P<0. 05),细胞中 Sirt1、FoxO1、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ蛋白水平降低(P<0. 05)。 结论 APS 可以抑制 PCOS 大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路 Sirt1 / FoxO1 实现的。

摘要:综述了皮肤腐蚀和皮肤刺激替代试验的发展,介绍了最近被列入《全球化学品统一分类和标签制度 (全球统一制度)》(Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals,GHS)的试验和评估综合策略(Integrated Approach on Testing and Assessment,IATA)。 重点讨论了各种替代试验的原理、方法和适用范围,详细分析了各种替代试验方法在该策略应用中的优势和局限,为今后有效利用各种替代试验及其数据开展化学品皮肤腐蚀性和刺激性分类工作提供了指引。

摘要:HIV 病毒在全球广泛流行,导致严重传染性疾病———艾滋病(AIDS),对人类生命健康及社会发展造成严重影响。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)虽可抑制 HIV 病毒复制,但无法清除体内病毒。 预防性疫苗是对抗 HIV 的重要工具,但由于该病毒具有遗传多样性和强变异性,此类疫苗必需能诱导出有效中和多种 HIV 病毒株的广谱中和抗体(bNAbs)。 针对 HIV-1 bNAbs 诱导和产生的研究面临许多挑战,需要加强相关方向的科技攻关力度。 本文综述了 HIV-1 bNAbs 生物特征、产生机制、诱导策略等方面的最新进展,希望为后续研究提供基础信息和可能方向。

摘要:应激性胃溃疡(SGU)是由于机体遭受应激,从而出现细胞代谢障碍和损伤,最终引起胃黏膜急性糜烂与溃疡的一种疾病。其发病机制尚不明确,了解与 SGU 相关的信号通路对进一步研究 SGU 的发病机制及寻找潜在的治疗靶点有重要意义。 本文对与 SGU 相关的信号通路研究进展作一综述,发现 SGU 与 JAK/ STAT 信号通路、Nrf2 / HO-1 信号通路、NF-κB 信号通路、ERK1 / 2 信号通路、Hedgehog 信号通路、TLR 信号通路、PI3K/ Akt 信号通路均关系密切。希望据此能够为 SGU 发病机制的研究及新兴治疗手段的提出提供一定的科学依据。

摘要:抗体是机体分泌的用来鉴别与中和外来病原微生物如细菌、病毒等的 Y 形蛋白质,具有保护机体健康的功能。口服抗体进入肠道内能够给予肠道被动免疫,使肠道免受病原微生物的感染。 近些年来,越来越多的研究发现一些特异性抗体可免受胃环境的影响,立即在动物肠道内发挥保护作用。本文介绍了口服抗体的发展过程、作用机制、制备途径、稳定特性,并根据实际应用情况综述了天然抗体、基因工程抗体通过口服摄入的方式对动物肠道感染的保护作用。

摘要:柳叶刀发布的 2019 年中国疾病负担数据显示,饮酒是导致死亡的第 10 大危险因素。 而由喝酒引发的酒精性肝损伤的发病机制十分复杂,至今仍无清晰定论。 Toll 样受体 4 信号途径在酒精性肝损伤的发生发展中有着深远的意义。 因此,本文就 Toll 样受体 4 信号转导通路在酒精性肝损伤中的作用做一综述,为今后酒精性肝损伤的防治提供新的研究思路。

摘要:氧化应激(oxidative stress)是影响衰老和神经系统疾病的重要因素,在多种神经退行性疾病发生发展过程中起重要作用。老年斑的主要成分是 β 淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ),它在脑中的异常沉积是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病的关键因素。 研究表明,Aβ 沉积引发的氧化应激会诱导认知记忆相关脑区的神经元丢失、死亡,最终引起 AD 病理的发生与发展。 本文重点论述 AD 发生发展中淀粉样肽毒性产生的机制,大分子的氧化过程及淀粉样肽与氧化应激相互影响的过程,旨在阐明 AD 发生发展过程中淀粉样肽与氧化应激的关系,为促进 AD 抗氧化剂研究提供有力的理论支持和研究思路。

摘要:本文从理论依据、动物选择、造模应激源、造模时间、评价指标等方面对亚健康动物实验研究的现状及存在的问题进行了阐述,提出加强亚健康动物模型的理论依据及模型考评指标的研究,注重多指标的综合分析, 努力筛选出理想的、成熟的、公认的亚健康动物模型。