摘要: 目的 探讨家兔颈总动脉血管内膜增生模型的建立方法及影响因素。 方法 30 只新西兰大白兔, 雌雄各半,随机分为假手术组、高脂+单侧套管组(按造模时间分为 2 周、3 周亚组)、高脂+双侧套管组(按造模时间分为 2 周、3 周亚组)。 单侧套管组在左侧颈总动脉外侧置一硅橡胶管(长度 20 mm,内径 1. 0 mm)包裹血管并固定, 双侧套管组在双侧颈总动脉外侧分别置一硅橡胶管包裹血管并固定。 两组均于术后次日给予 2%胆固醇饲料连续喂养 2~ 3 周。 假手术组只行手术分离颈总动脉,不进行血管套管术,并饲喂普通饲料。 分别于手术后第 2 周、 第 3 周取损伤段颈总动脉观察病理形态学改变,采用形态计量学方法测定血管内膜增生指标,免疫组化法测定增生内膜中 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、骨桥蛋白( osteopontin, OPN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、炎性反应因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。 结果 高脂+颈总动脉硅橡胶管套管干预 2 周、3 周后,颈总动脉出现明显的血管内膜增生,内膜面积(IA)、内膜厚度(IT)、内膜面积增生率(HRIA)、内膜厚度增生率(HRIT)均显著增加,其中双侧套管的内膜增生较单侧明显,干预 3 周内膜增生较 2 周严重。 在双侧套管 3 周,血管内膜 α-SMA 表达显著降低、OPN、Col-Ⅰ、IL-1β、TNF-α 表达显著增高。 结论 应用高脂+颈总动脉硅橡胶管套管法可成功建立血管内膜增生模型,以双侧颈总动脉套管干预 3 周以上为宜。

摘要: 目的 空气细颗粒物 PM2. 5 是空气污染物的重要组成部分,能通过多种途径引起呼吸系统及各个器官系统疾病。 值得注意的是,PM2. 5 可引起认知减退,其具体机制尚不明确。 本研究旨在探索空气污染物 PM2. 5 的环境暴露影响动物认知功能的机制。 方法 本研究采用狭缝分离式 PM2. 5 在线浓缩富集系统进行小鼠的 PM2. 5 富集与暴露造模,选用 C57BL/ 6 小鼠,进行每天 4 h、每周 5 d、共 15 周的 PM2. 5 暴露,建立小鼠的 PM2. 5 呼吸暴露模型。 造模成功后,分别检测动物的行为学症状、病理学变化、以及相关分子机制。 结果 实验结果表明,PM2. 5 暴露可造成小鼠肺组织的病理改变,引起小鼠的认知障碍症状,免疫组织化学染色检测到小鼠中枢神经系统海马脑区出现小胶质细胞的激活,小鼠中枢神经系统 IL-6 含量增加。 另外,PM2. 5 暴露未造成小鼠其他主要脏器损伤。 结论 本研究表明,空气细颗粒物 PM2. 5 可导致中枢神经系统炎症,促进小胶质细胞激活,从而引起 C57BL/ 6 小鼠的认知障碍。

摘要: 目的 观察扶肾方对尿毒症腹膜透析大鼠的腹膜功能及腹膜组织 VEGF、TNF-α、IL-12、IFN-γ 的影响。 方法 50 只雄性 SD 大鼠,按随机数字表法分为 5 组:正常对照组,模型组(尿毒症腹膜透析),模型+扶肾方低剂量干预组,模型+扶肾方高剂量干预组,模型+塞来昔布干预组。 采用 5 / 6 肾切除法建立尿毒症模型,腹腔注射腹膜透析液建立腹膜透析模型。 连续给药 4 周后留取各组大鼠腹膜组织。 HE 染色观察腹膜组织形态学变化,腹膜平衡试验检测腹膜转运功能,液相芯片法检测腹膜组织 VEGF、TNF-α、IL-12 和 IFN-γ 的含量。 结果 与正常对照组比较,模型组大鼠腹膜组织 VEGF、TNF-α 表达上调,IL-12、IFN-γ 的表达下调,差异有统计学意义(P<0. 05,P< 0. 01)。 与模型组比较,扶肾方低剂量组 VEGF、TNF-α 表达下调,IL-12、IFN-γ 表达上调,差异有统计学意义(P< 0. 05,P<0. 01);扶肾方高剂量组和塞来昔布组 VEGF 表达下调,IL-12、IFN-γ 表达上调,差异具有统计学意义(P< 0. 01)。 结论 扶肾方可减轻尿毒症腹膜透析大鼠腹膜损伤、改善腹膜超滤功能,该作用可能与下调腹膜组织血管生成促进因子 VEGF、TNF-α 的表达,上调血管生成抑制因子 IL-12、IFN-γ 的表达有关。

摘要: 目的 构建 Prpf40b 基因敲除大鼠,为该基因的生物学研究建立工具动物,同时初步探究该基因缺失后对心脏发育的影响。 方法 利用 CRISPR/ Cas9 技术构建 Prpf40b 基因敲除大鼠,测序及 PCR 技术鉴定敲除大鼠构建成功及仔代大鼠基因型。通过超声影像技术分析敲除大鼠心脏结构形态和功能改变,随后通过病理组织学观察分析该基因敲除后对大鼠心肌显微形态的组织学影响。 结果 经 PCR 鉴定和测序比对,确认 Prpf40b 基因敲除大鼠构建成功。经超声影像学分析,与同窝阴性大鼠相比 2 月龄敲除大鼠心脏结构形态未见明显异常,而 12 月龄敲除大鼠收缩期及舒张期时心室腔内径及容积显著减小,同时射血分数显著减小。 经病理组织学分析,与同窝阴性大鼠相比 12 月龄敲除大鼠心肌出现排列不齐,心肌纤维粗细不均及肌浆网扩张等现象。 结论 Prpf40b 基因缺失可诱发大鼠心脏整体结构形态改变及心肌组织学异常。

摘要: 目的 观察不同剂量丁苯酞(N-butylphthalide,NBP) 对 db / db 小鼠认知功能及海马区突触素 (synaptophysin,SYN)、突触后致密物 95(postsynaptic density-95 protein,PSD-95)的表达以及线粒体结构的影响。 方法 实验共分 5 组,将 20 只 db / db 小鼠随机分 4 组,模型组、低、中、高剂量治疗组,每组 5 只,同窝正常 db / m 小鼠 5 只作为对照组。 在 6 周龄时,分别给予 db / db 小鼠腹腔注射低、中、高剂量(20、40、60 mg / kg)的丁苯酞注射液,对照组和模型组均给予等体积的生理盐水腹腔注射,每日 1 次,连续 6 周。 每周监测体重与空腹血糖水平,运用 Morris 水迷宫实验检测小鼠的空间学习记忆能力,Western blot 技术检测小鼠海马区 SYN、PSD-95 表达,电镜观察海马区线粒体的结构。 结果 与模型组相比,各治疗组对小鼠的体重及血糖影响无显著差异,但水迷宫探索期逃避潜伏时间减少(P<0. 05),测试期跨越平台次数增加(P<0. 01),海马区 SYN、PSD-95 蛋白表达量均升高(P<0. 05), 且认知改善和蛋白表达增加呈剂量依赖关系;电镜下正常组的线粒体结构正常,嵴结构清晰并且排列紧密,膜结构完整;模型组线粒体受损,嵴结构稀疏,融合,逐渐空泡化;各剂量治疗组海马区线粒体大部分结构完整,嵴结构有少量破坏,膜结构也相对完整。 结论 丁苯酞可能通过调节海马突触相关蛋白 SYN、PSD-95 的表达和线粒体结构改善 db / db 小鼠的认知功能障碍,高剂量治疗效果优于低剂量与中剂量组。

摘要: 目的 通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining, ICS)检测 CD8⁺ T 细胞反应强度,探究不同保存条件对 CD8⁺ T 细胞活性影响。 方法 采集 9 只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至-80℃和液氮,冻存 1 周和 1 年再用于检测,检测时用阳性刺激物进行刺激,流式分析活细胞比例,MIP-1β、TNF-α、IL-2、IFN-γ 四种细胞因子分泌情况和细胞脱粒标志物 CD107a 的表达情况。 结果 随着冻存时间的增加,细胞存活率降低,且液氮冻存比-80℃冻存有更高的存活率。在细胞因子分泌和细胞脱粒标志物 CD107a 的表达情况中,冻存一年的细胞 MIP-1β、TNF-α 分泌量显著高于正常细胞,细胞状态发生了改变,冻存一周的细胞与新鲜细胞状态更为相近。 结论 想要保持低的细胞死亡率和正常的 CD8⁺ T 细胞反应,应使用新鲜细胞或短期冻存的细胞进行测量 CD8⁺ T 细胞反应水平的实验。

摘要: 目的 探究芬戈莫德(Fingolimod, FTY720)对卒中后抑郁( post-stroke depression, PSD)大鼠行为学及单胺类神经递质的干预作用。 方法 50 只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组、卒中组、PSD 组、氟西汀(Fluoxetine, FLU)组及 FLU 联合 FTY720 治疗组。采取大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,联合慢性不可预见的温和性应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)及孤养法制备 PSD 大鼠模型。在应激第 1、8、15、22、29 天评估各组大鼠行为学指标,第 29 天处死大鼠,测定各组大鼠海马中单胺类神经递质的含量及单胺类神经递质合成限速酶的表达。 结果 与假手术组及卒中组比较,PSD 组大鼠同一时间点旷野实验得分、蔗糖水消耗比例显著减少(P< 0. 05);海马中 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、多巴胺( dopamine, DA) 含量显著降低 ( P< 0. 05); 色氨酸羟化酶 2 ( tryptophan hydroxylase2, TPH2) mRNA、酪氨酸羟化酶 ( tyrosine hydroxylase, TH)mRNA 的表达下降(P<0. 05)。 与 PSD 组比较,氟西汀组及联合治疗组大鼠同一时间点旷野实验得分、蔗糖水消耗比例升高(P<0. 05);海马中 5-HT、NE、DA 含量升高(P<0. 05);TPH2 mRNA、TH mRNA 的表达上调(P<0. 05)。 两组间进一步比较发现联合治疗组治疗效果更为显著,差异具有统计学意义(P<0. 05)。 结论 FTY720 对 PSD 大鼠的抑郁样行为具有改善作用,而这种作用与提高单胺类神经递质的水平有关。

摘要: 目的 基于网络药理学和分子对接技术研究柴胡-黄芩药对治疗鼻窦炎的作用机制。 方法 通过 TCMSP 数据库筛选出柴胡-黄芩药对中的化学成分及其对应靶点,将 UniProt 数据库筛选的相关药物靶点和 Genecards 数据库筛选的鼻窦炎疾病靶点相交集;运用 STRING 平台构建靶蛋白相互作用( PPI) 网络;采用 Metascape 平台对靶点进行 GO 富集分析,并借助 DAVID 数据库对靶点进行 KEGG 富集分析。利用 Cytoscape 3. 8. 0 软件构建成分-靶点-通路网络图,最后使用 Autodock 软件对关键靶点及化合物进行分子对接,选择最佳的结合靶点。 结果 筛选出相关化合物 39 个,成分靶点与疾病靶点相交得出 92 个靶标。其主要活性成分为槲皮素、山奈酚、汉黄芩素、黄芩素、刺槐素、β-谷甾醇这六种。其核心基因为 TP53,AKT1,MAPK1,PIK3CG,PTGS2,HSP90AA1 等六个。在分子对接中,其主要活性成分与关键靶点对接结果能量均低于-5 kJ/ mol。 结论 通过网络药理学和分子对接系统研究了柴胡-黄芩药对治疗鼻窦炎的潜在有效成分和作用机制,为今后进行深入机制研究提供了依据。

摘要: 目的 本研究探讨栀子苷(GNP)对大鼠蛛网膜下腔出血( SAH)后早期脑损伤(EBI)氧化应激的保护作用。 方法 采用视交叉前池注血法制备蛛网膜下腔出血大鼠模型,将雄性 Wistar 大鼠随机分为假手术组、模型组、GNP 低、高剂量组,造模后一次腹腔内注射。 24 h 后进行蛛网膜下腔出血量评分及死亡率计算;免疫荧光染色检测颞叶皮层脑组织核因子 2 相关因子 2( nuclear factor erythroiD-2-related factor 2,Nrf2)表达情况;Western blot 测定颞叶皮层血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶-1(NADPH quinineoxidoreductase-1,NQO-1)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)蛋白含量;TBA 比色法检测颞叶皮层中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,TUNEL 染色法检测神经细胞凋亡情况。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠死亡率百分比增加;颞叶皮层 Nrf2 阳性细胞数目、HO-1、NQO-1、GST 蛋白水平略有增加;MDA 水平显著升高、大量细胞发生凋亡(P<0. 05)。 与模型组比较,GNP 两剂量组大鼠颞叶皮层 Nrf2 阳性细胞数目、HO-1、NQO-1、GST 蛋白水平均显著增加( P< 0. 05),MDA 水平,细胞凋亡率明显下降(P<0. 05);其中高剂量组死亡率百分比并出现下降。 结论 本研究发现 GNP 对大鼠 SAH 后 EBI 具有一定保护作用,其作用机制可能与通过激活内源性抗氧化系统 Nrf2 通路,上调下游抗氧化酶发挥对神经细胞的保护作用密切相关。

摘要: 目的 本研究旨在探索松果菊苷(EA)对抑郁症模型大鼠线粒体损伤的影响。 方法 斯普拉格-杜勒鼠(SD)大鼠随机分为 5 组:对照组、单纯 EA 组、模型组、治疗组和氟西汀组。 采用实施慢性不可预知的轻度压力(CUMS)构建大鼠抑郁症模型。 治疗组大鼠腹腔内注射 EA 30 mg / (kg·d),记录大鼠体重、检测大鼠糖水偏好指数评估大鼠行为。 HE 染色检测脑组织损伤情况;TUNEL 检测脑组织细胞凋亡情况;JC-1 法检测线粒体膜电位; ELISA 检测炎症因子血清中 IL-6、IL-1β、TNF-α 和 IL-10 水平;Western blot 检测胞质内磷酸化线粒体动力相关蛋白 (p-Drp1)蛋白的表达;试剂盒检测氧化应激标记物 SOD、MDA 和 LDH 的含量。 结果 与对照组相比,单纯 EA 组的各项检测指标差异无统计学意义。 而与对照组相比,模型组大鼠表现出体重降低(P<0. 01);糖水偏好降低(P< 0. 01);血清促炎症因子 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 水平增加;脑组织损伤加重;p-Drp1 表达减少(P<0. 01);脑组织氧化应激水平增加(P<0. 01);而治疗组表现出治疗作用,能回救 CUMS 造成的上述病理损伤。 结论 松果菊苷可减轻 CUMS 抑郁症模型大鼠线粒体损伤。

摘要: 目的 探讨 mmu-miR-672-5p 调控大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞凋亡的分子机制。 方法 过表达或敲低 mmu-miR-672-5p 后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 过表达或敲低 mmu-miR-672-5p 后,通过 RNA-seq 检测 mmu-miR-672-5p 调控的基因。 设定阈值后,通过 siRNA 敲低相关基因后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 通过荧光素酶报告实验验证 mmu-miR-672-5p 是否靶向此基因。 过表达此基因后,通过免疫印迹检测 CLEAVED-CAS3 的表达水平,以及大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。 结果 过表达 mmu-miR- 672-5p 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0. 05);敲低 mmu-miR-672-5p 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养 层细胞的凋亡水平上升(P<0. 05)。 分别敲低和过表达 mmu-miR-672-5p 后,高通量测序发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞中多种基因的表达被调节,包括 Zfp229、Zfp503、 Slc4a5、 Stk24、Tmem106b、Bax、Adgrb3、Tmem63b、Pmp22、 Mroh2a、Dsn1、Pramef25、Naaladl2、Clk2、Stx16、Usp28、Clint1、Jph4、Msl2、Krtap8-1、Pkp2、Mllt3、Rai14。 敲低上述基因后,发现仅敲低 Bax 时,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0. 05)。 过表达 Bax 后,CLEAVED-CAS3 的表达水平上升,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平上升(P<0. 05)。 过表达 mmu-miR-672-5p 后,Bax 的 mRNA 和蛋白水平均下降(P<0. 05);敲低 mmu-miR-672-5p 后,Bax 的 mRNA 和蛋白水平均上升(P<0. 05)。 此外,mmu- miR-672-5p 靶向 Bax 的 3 端非编码区(P<0. 05)。 同时过表达 mmu-miR-672-5p 和 Bax 后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平无显著变化(P>0. 05);同时敲低 mmu-miR-672-5p 和 Bax 后,发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋 亡水平无显著变化(P>0. 05)。 结论 mmu-miR-672-5p 通过靶向 Bax 的 3 端非编码区,降低了 Bax 的表达水平,随后抑制了大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡。

摘要: 目的 综述 CUMS 模型常用的刺激因子、造模时长以及主要的行为学评价方法,为 CUMS 模型在抑 郁症研究中的应用提供参考。 方法 查阅 10 年来中国知网和 PubMed 中与 CUMS 相关的文献,并对其按一定标准筛选后整理归纳 CUMS 造模动物、刺激因子、造模时长。 结果 雄性大鼠的使用频率高;实验宜选择 7~ 9 种刺激因子且 3~ 7 d 内不重复,刺激因子中推荐禁食禁水、潮湿垫料、冰水游泳、笼倾斜、光照节律改变;造模时长建议 3 ~ 4 周;最后行为学评价方法宜采用糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验。 结论 本文通过综述 CUMS 模型中的造模动物、刺激因子、造模时长等方面,为 CUMS 模型在抑郁症研究中的应用提供有益参考。

摘要: 目的 探讨瑞香素激活 Toll 样受体 4 / 核转录因子 kappa B(Toll like receptor 4 / NF-κB, TRL4 / NF- κB)信号通路对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后神经再生及功能恢复的影响,为促进 SCI 的分子机制研究提供依据。 方法 建立脊髓损伤实验大鼠模型,并分别于术后 1 d、8 d、14 d、21 d 和 30 d,采用 Basso Beattie Bresnahan(BBB)运动功能评分和联合行为评分法(combine behavioral score, CBS)评分测试评价各组 SCI 大鼠治疗后的神经功能;采用相关试剂盒检测脊髓组织中超氧化物歧化酶( superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶 (catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及丙二醛(maleicdialdehyde, MDA)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白介素-1β(interleukiN-1β, IL-1β)、白介素-6(interleukin 6, IL-6)、白介素-10(interleukin 10, IL-10)的表达量变化;并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测术后各组脊髓组织中对实验大鼠脊髓组织中 BCL2-Associated X 的蛋白质( BCL2-Associated X Protein, Bax)、B 淋巴细胞瘤- 2 基因( B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Caspase-3、细胞色素 C( cytochrome C, Cyt-c)、脑源性神经营养因子( bRain-derived neurotrophic factor, BDNF)、酪氨酸激酶受体 B( tyrosine kinase receptor B, TrkB)、磷酸化酪氨酸激酶受体 B( phospho-tyrosine kinase receptor B, p-TrkB)、TOLL 样受体 4 重组蛋白( recombinant toll like receptor 4, TRL4) 和核因子-κB p65 (nuclear factor-kappa b p65, NF-κB p65)水平的影响。 结果 瑞香素能够显著性改善实验大鼠 BBB 评分和 CBS 评分结果,且联合用药治疗组效果优于单一药物的疗效。此外,瑞香素能够改善实验大鼠脊髓组织中 SOD、CAT、 GSH-Px 活性和 MDA 含量,能够降低脊髓组织中 TNF-α、IL-1β、IL-6 和 IL-10 含量;Western blot 实验结果表明瑞香素对脊髓损伤诱发的凋亡相关蛋白异常表达具有显著的调节作用,并能够显著性调节 BDNF/ TrkB 信号通路和 TRL4 / NF-κB 信号通路。 结论 瑞香素改善脊髓损伤的作用机制与是激活 TRL4 / NF-κB 信号密切相关。

摘要: 目的 快速高效地构建一种人源 SNCA(hSNCA)的全脑转基因鼠,并初步探究 α-突触核蛋白过表达对小鼠中枢神经系统的影响。 方法 对新生乳鼠进行双侧侧脑室( intracerebroventricular,ICV) 注射携带人源 SNCA-EGFP 或 EGFP 的重组腺相关病毒 2 / 9 ( recombinant adeno-associated virus2 / 9,rAAV2 / 9) ( 1. 5 × 10¹³ genome copies(GC) / mL),在 2 周和 3 个月龄用免疫荧光及 Western blot 检测 α-突触核蛋白的表达模式及亚细胞定位,并用免疫荧光及免疫组化探究星形胶质细胞、小胶质细胞及病理性 α-突触核蛋白的变化。 结果 用 rAAV2 / 9 侧脑室 注射的方式成功构建了 hSNCA 全脑转基因鼠,α-突触核蛋白在整个脑中广泛表达,且趋向于在嗅球、皮层、海马、间脑及中脑中高表达。进一步研究发现,在嗅球、皮层、海马的 CA2 / 3 区及小脑的浦肯野细胞中观测到 α-突触核蛋白在神经元胞核中表达的现象,α-突触核蛋白过表达引起了胶质增生。此外,在嗅球及大脑皮层检测到 α-突触核蛋白 Ser129 磷酸化(pS129)及聚集。 结论 快速成功地构建了一种 hSNCA 全脑转基因小鼠模型,其 α-突触核蛋白持久地高表达,并出现胶质增生和病理性 α-突触核蛋白表达的现象,为研究 α-突触核蛋白的生理功能及其在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中的作用奠定一定的基础。

摘要: 目的 探索 B6-Co 小鼠与正常 C57BL/ 6 小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与 HSP70 蛋白表达的差异。 方法 C57BL/ 6(B6)小鼠按雌雄小鼠 2 ∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co 小鼠按 B6(雄)×B6-Co(雌)= 1 ∶2或 B6(雌) ×B6-Co(雄)= 2 ∶1比例配种获得孕鼠,取 18. 5 d 的孕鼠腹中胚胎,再取胚胎眼睑组织培养小鼠眼睑成纤维细胞;用免疫荧光、HE 染色鉴定原代细胞、观察成纤维细胞形态。 根据血球计数板直接计数法观察两种细胞生长曲线的差异,用 Real-time PCR 和 Western blot 检测两种细胞中 HSP70 的表达量。 体外构建 HSP70 基因 siRNA 干扰载体, Lipofectamin2000 转染 B6 小鼠眼睑成纤维细胞;Real-time PCR 和 Western blot 实验从 mRNA 和蛋白水平分别检测 HSP70 的相对表达量,测定其干扰效率;Transwell 实验检测 B6 小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。 结果 小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线结果表明,B6-Co 小鼠眼睑成纤维细胞增殖速度慢于 B6 小鼠眼睑成纤维细胞(P< 0. 01)。 B6-Co 小鼠成纤维细胞中 HSP70 表达量远远低于 B6 小鼠成纤维细胞,具有显著性差异。 B6 小鼠眼睑成纤维细胞转染 HSP70 siRNA 干扰载体后,siRNA-HSP70-3 干扰效率最强,mRNA 和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达 70%(P< 0. 05);siRNA-HSP70 组在迁移能力上亦显著低于对照组(P< 0. 05)。 结论 HSP70 基因及蛋白表达下调影响 B6-Co 的成纤维细胞生长曲线,构建的 siRNA-HSP70-3 干扰载体能够有效抑制 B6 小鼠眼睑成纤维细胞中 HSP70 基因的表达,并显著抑制细胞迁移。 HSP70 可能参与成纤维细胞胚胎期发育的调控,是造成其 EOB 表型的重要原因之一。

摘要: 目的 NOBOX 是在原始卵泡激活过程中起关键作用的转录因子,可直接调控 Gdf9 转录,并参与 GDF9 / SMAD 通路影响颗粒细胞增殖分化,但其在初级卵泡及之后的具体调控机制并不清楚。 Kit 作为影响卵泡发育的重要基因,其启动子存在多个 NOBOX 结合位点。 本研究拟探索在初级卵泡发育阶段,转录因子 NOBOX 对 Kit 的转录调控作用,以及通过 GDF9 / SMAD 通路对卵泡发育的影响。 方法 体外培养初级卵泡统计发育时间;qRT- PCR 检测显微注射 Nobox-siRNA 的初级卵泡中 Nobox、Kit、Kitl、Gdf9 的 mRNA 表达变化;Western blot 检测显微注射 Nobox-siRNA 的初级卵泡中 NOBOX、Kit、P-SMAD的蛋白表达变化;ChIP 实验验证转录因子 NOBOX 在 Kit 基因启动子上的结合位点。 结果 初级卵泡在体外培养第 5 天可发育为次级卵泡,注射 Nobox-siRNA 的初级卵泡延缓 2 d 发育至次级;初级卵泡中注射 Nobox-siRNA 后,卵泡中 Nobox、Kit、Kitl、Gdf9 mRNA 表达显著下调,NOBOX、Kit、P- SMAD2 / 3 蛋白表达量降低;转录因子 NOBOX 可以结合于 Kit 基因启动子。 结论 NOBOX 是小鼠初级卵泡发育至次级卵泡的关键基因,NOBOX 可直接结合 Kit 基因启动子,且影响初级卵泡中 KitL/ Kit 和 GDF9 / SMAD 通路。

摘要: 目的 研究沙库巴曲缬沙坦对心力衰竭大鼠心肌损伤和心脏重构的影响,并探讨其对 TGF-β1 / Smad3 和 NF-κB 信号通路的调控作用。 方法 通过结扎大鼠左前降支冠状动脉(LAD)诱发心力衰竭动物模型。 建模后每天用 10 mg / kg 的沙库巴曲缬沙坦治疗大鼠(沙库巴曲缬沙坦组,n= 15) 。 假手术组( n= 15)和模型组 (n= 15)大鼠用等体积的生理盐水处理。 共治疗 4 周。 通过超声心动图和组织学检查分别评估大鼠心脏功能和纤维化。 转化生长因子-β1( TGF-β1) 、磷酸化 Smad3( p-Smad3) 、磷酸化 Smad7( p-Smad7) 、胶原蛋白 I( Collagen I) 、α 平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白介素-6( IL-6) 、核因子 κB(NF-κB)和磷酸化的 κBα (p-IκBα)的蛋白水平用 Western blot 分析法测定。 结果 与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组的左心室射血分数 (EF)和左心室缩短分数(FS)显著升高,而 LVIDs 和 LVIDd 显著降低(P<0. 05) 。 与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组 Collagen I 的表达显著降低(P<0. 05) 。 与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组 TGF-β1 的蛋白表达以及 Smad3 的磷酸化水平显著降低,而 Smad7 的磷酸化水平显著升高(P<0. 05) 。 与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组 TNF-α 和 IL-6 的蛋白表达显著降低(P<0. 05) 。 与模型组相比,沙库巴曲缬沙坦组 NF-κBp65 和 p-IκBα 的蛋白表达显著降低(P<0. 05) 。 结论 沙库巴曲缬沙坦通过抑制心力衰竭大鼠 TGF-β1 / smad3 和 NF-κB 信号通路来抑制心肌纤维化和炎症反应。

摘要:糖尿病(diabetes mellitus,DM)是以高血糖为特征的代谢性疾病。 糖尿病时长期存在的高血糖,导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍,这些并发症的发生常威胁着患者的生命。 因此, 迫切需要安全有效的药物来干预糖尿病并发症。 黄芪是常见的补益中药,是众多抗糖尿病中药复方的关键组成之一,黄芪富含多糖(APS)、皂苷(ASS)、黄酮(ASF)等抗糖尿病成分,对糖尿病并发症有较好的作用。 本文就近些年黄芪干预糖尿病并发症及作用机制进行文献进行综述,为黄芪干预糖尿病并发症研究提供参考。

摘要:肠道菌群作为一个复杂的微生态系统,与宿主建立了密切联系,在调节与营养、免疫系统激活和宿主防御相关的生理功能中起着核心作用。 肠道菌群与宿主之间相互作用的主要方式之一是通过代谢产物。 色氨酸(tryptophan,TRP)作为一种必需氨基酸,参与体内多种生理功能,影响人体的生长和健康。 TRP 代谢的异常与许多疾病有关。 肠道菌群产生的 TRP 分解代谢物是微生物群落以及宿主-微生物之间相互作用的重要信号分子,在维持健康和疾病发病机理中具有重要作用。 通过系统阐述肠道菌群的分类和功能,肠道菌群对 TRP 代谢途径及其相关疾病影响的研究,以及肠道菌群影响 TRP 代谢的潜在机制,为疾病发病机制和治疗等临床研究提供新的视角。

摘要:动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是一种以脂质沉积血管为主的慢性疾病,越来越多研究认为免疫介导的炎症反应在 AS 的发病机制中有着重要的作用。 Toll 样受体 4( toll-like receptor4, TLR4)作为天然免疫模式识别受体家族中的一员,参与 AS 的发病各个阶段,因此成为了治疗 AS 的一个重要靶点。 本文就 TLR4 与 AS 相关研究进展作一综述。

摘要:血管新生与许多疾病密切相关,对疾病的发展及预后起到至关重要的作用。 lncRNA 是血管新生重要的调控分子,通过调控血管内皮细胞表型转变、血管内皮生长因子及 miRNA 的表达,参与缺血性脑卒中、肿瘤、动脉粥样硬化等疾病的病理恢复过程。 文中综述了 lncRNA 的生物学功能及其在血管生成和血管疾病中的表达变化、调控作用的相关研究,以期为后续血管新生的机制研究及临床应用提供参考。

摘要:兔与灵长类动物具有相似的进化历史,具有与人类相似的血管形态特征。 另外,兔是对胆固醇超载十分敏感的动物物种,进食含高胆固醇饲料后,短时间内可形成高胆固醇血症,所以在快速、简洁地建立动脉粥样硬化(AS)模型方面,兔具有着独特的优势。至今已有多种建立兔 AS 动物模型的方法,除传统的高脂饲料喂养方 法外,还包括股动脉球囊拉伤联合高脂饲料喂养以及 CRISPR/ Cas9 基因编辑技术等新兴建模方法的出现。 本文对近些年常用及新兴兔 AS 模型的建立方法及其优缺点进行综述。