摘要:目的 比较研究轻度和经典方法诱导的大鼠慢性压迫性神经损伤( chronic constriction injury,CCI)模型的成模特点,为基础研究实验设计提供参考。 方法 将 18 只 8 周龄 SD 雄性大鼠随机分为假手术组、MinorCCI 组和经典 CCI 组,每组 6 只。 于坐骨神经结扎铬制可吸收外科缝线,Minor CCI 组结扎 1 根,经典 CCI 组结扎 4根。 3 组动物于造模前和造模后 7、14、21、28 d 检测机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期和累积疼痛评分变化情况。 透射电镜观察坐骨神经超微结构变化情况。 结果 Minor CCI 组和经典 CCI 组机械缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期痛敏趋势一致,Minor CCI 组累积疼痛评分较经典 CCI 组低。 Minor CCI 组造模后出现痛敏,造模后 14 d进入平台期,约 10 d,各症状逐渐恢复;经典 CCI 组造模后出现痛敏,造模后 14 d 进入平台期,造模后 28 d 痛敏依然稳定甚至出现进一步敏化。 Minor CCI 组和经典 CCI 组坐骨神经超微结构变化一致,均表现为髓鞘结构破坏、崩脱,形成髓鞘球、自噬体等。 结论 Minor CCI 模型更稳定,痛敏症状可维持至造模后 28 d,基本无自残现象,适用于短期实验设计,可最大程度减小实验动物的痛苦。 经典 CCI 模型痛敏症状持久,造模后 28 d 依然处于平台期,但自残现象明显,适用于中、长期实验设计。

摘要:目的 本研究旨在寻求 CHD 气虚血瘀证病证结合动物模型与 CHD 气虚血瘀证临床患者舌象共通的特异性指标。 方法 使用 matlab 软件将冠心病气虚血瘀证临床患者舌图像进行分割并提取相关特征,利用 RF模型分类识别临床全样本及动物全样本,制作 RF 预测模型并评估预测价值,计算各指标 AUC 以判定其诊断价值。结果 与 CHD 气虚血瘀证临床诊断密切相关的舌象特异性指标有 4 个,分别是 M1 、M2 、M3 、M5 。 采用 RF 分类判别结果提示模型预测 FPR 为 15. 2%,TPR 为 83. 3%,最佳界值为 0. 5,敏感度为 81. 4%,特异性为 76. 0%,准确率为85. 7%,圆周卷积为 0. 6991,AUC 为 0. 8151。 M1 、M2 、M5 的诊断价值较高(AUC 分别为 0. 9040、0. 9254、0. 9610),M3 的诊断价值中等(AUC= 0. 7708)。 在大鼠模型上 M1 、M2 、M3 、M5 特征值与正常组大鼠比较存在统计学差异,采用 RF 分类判别的 FPR 为 14. 8%,TPR 为 83. 1%,AUC 为 0. 8755,最佳界值为 0. 5,敏感度为 81. 8%,特异性为75. 6%,准确率为 83. 1%,圆周卷积为 0. 6451。 M1 、M2 、M5 的诊断价值较高(AUC 分别为 0. 9130、0. 9304、0. 9088),M3 的诊断价值中等(AUC= 0. 7496)。 结论 CHD 气虚血瘀证病证结合动物模型与 CHD 气虚血瘀证临床患者的舌象特征拟合度高,M1 、M2 、M3 、M5 特征值是 CHD 气虚血瘀证临床样本和动物模型的共通的特异性指标。

摘要:目的 探讨黄连解毒汤活性成分对帕金森症脑神经细胞损伤的保护作用及其机制。 方法 将 SHSY5Y 细胞分为 5 组:空白对照组、模型组、巴马汀组、汉黄芩素组、京尼平苷组。 空白对照组的细胞培养基中不添加任何物质,其余各组加入 500 μmol / L 的 1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ions,MPP+)构建帕金森病(Parkinson’s disease,PD)细胞模型。 巴马汀组中添加 10 μmol / L 的巴马汀,汉黄芩素组中添加 50 μmol / L的汉黄芩素,京尼平苷组中添加 50 μmol / L 的京尼平苷。 CCK-8 检测细胞活力,Hoechst 33258 染色观察细胞凋亡情况,免疫荧光检测 α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)、酪氨酸羟化酶( tyrosine hydroxylase,TH)的表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素 1β( interleukin-1β,IL-1β)的水平,Real-time PCR 检测凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 的表达水平。 结果 MPP+刺激 SH-SY5Y 细胞后,模型组细胞活力明显下降,α-Syn荧光强度增强,TH 阳性细胞显著减少。 巴马汀、汉黄芩素、京尼平苷分别干预后,细胞增殖活力显著升高,α-Syn 荧光强度减弱,TH 阳性细胞增加。 TNF-α、IFN-γ、IL-6 和 IL-1β 的水平明显降低,Bax、Caspase-3 mRNA 的表达水平降低,而 Bcl-2 mRNA 的表达增加。 结论 黄连解毒汤活性成分能抑制炎症因子的释放从而抑制炎症反应,为帕金森症脑神经细胞损伤的治疗提供理论基础。

摘要:目的 通过用单腔中心静脉导管测量实验兔肺动脉压,结合解剖及病理改变,探讨该法制备兔急性肺栓塞模型的可行性和成功率。 方法 中心静脉导管末端塑形后在导丝引导下经兔颈内静脉置入肺动脉,连接Medlab 生物信号采集处理系统行动态肺动脉压监测。 经中心静脉导管注射自体血栓,建立兔急性肺栓塞模型。 根据目标肺动脉压力来控制注入血栓数量,可得到严重程度和栓塞范围较为一致的急性肺栓塞模型。 结果 造模成功率 100%,栓塞后肺动脉压、血压、心率与栓塞前比较,差异均有统计学意义(P>0. 05)。心肺解剖证实导管在肺动脉主干,病理检查发现肺动脉及肺小动脉存在血栓。 结论 经颈静脉送入中心静脉导管建立兔急性肺栓塞模型,既能保证栓子的完整性,又能够获得连续且准确的肺动脉压力数据,有效地建立了一种栓塞范围和严重程度可控的动物模型。 该方法成功率较高、操作简便、使用经济,为急性肺栓塞诊治的相关研究提供了实验基础。