摘要: 目的 在特发性膜性肾病(IMN)中探究转录共激活因子 Yes 相关蛋白(YAP)的表达及其在膜攻击复合物 C5b-9 诱导足细胞损伤的作用。 方法 免疫组织化学染色检测 YAP 蛋白在 IMN 患者肾组织及正常对照肾组织中的表达;选用亚溶解剂量的膜攻击复合物 C5b-9(以下简称 C5b-9)在体外建立人足细胞系 MPC5 的损伤模型,Western blot 检测随 C5b-9 刺激时间的延长,足细胞中 YAP 蛋白的表达变化;使用 siRNA 瞬时转染技术,靶向沉默足细胞中 YAP 基因表达,qRT-PCR 及 Western blot 检测转染效率;按足细胞处理的不同将其分为 4 组,正常培养的 Control 组,经 C5b-9 处理的 C5b-9 组,C5b-9 处理转染 si-NC 或 si-YAP 的的 C5b-9+si-NC 组与 C5b-9+si-YAP 组; 应用 CCK-8 实验检测上述各组细胞的增殖活力,Anenxin V-FITC 双染色联合流式细胞数检测各组细胞的凋亡发生 率,DCFH-DA 法检测细胞中活性氧(ROS)含量,Western blot 检测各组细胞中足细胞标志性蛋白 Nephrin、WT1 与紧密连接蛋白 ZO-1、表型转换蛋白 Snail 及纤连蛋白 Fibronectin 的蛋白表达水平。 结果 与正常对照肾组织相比, YAP 在 IMN 中的表达显著增加(P<0. 05);随 C5b-9 刺激时间的延长,足细胞中 YAP 蛋白的表达水平逐渐升高;转染 si-YAP 后,足细胞中 YAP mRNA 及蛋白水平均显著降低(P<0. 05);与 Control 组相比,C5b-9 组、C5b-9+si-NC 组 及 C5b-9+si-YAP 组细胞的增殖活力均显著降低(P<0. 05),而凋亡率及 ROS 含量均显著增加(P<0. 05);但与C5b-9 组或 C5b-9+si-NC 组相比,C5b-9+si-YAP 组细胞增殖活力显著增加(P<0. 05),凋亡率及 ROS 含量显著减少(P< 0. 05);Western blot 检测各组细胞中相关蛋白的表达结果显示,与 Control 组相比,C5b-9 组、C5b-9+si-NC 组及 C5b- 9+si-YAP 组细胞中 Nephrin、WT1 及 ZO-1 蛋白表达均显著降低(P<0. 05),Snail 与 Fibronectin 蛋白表达均显著增加 (P<0. 05);而与 C5b-9 组或 C5b-9+si-NC 组相比,C5b-9+si-YAP 组细胞中 Nephrin、WT1 及 ZO-1 蛋白表达显著增加 (P<0. 05),而 Snail 与 Fibronectin 蛋白表达显著减少(P<0. 05)。 结论 本研究结果表明 YAP 蛋白在 IMN 患者肾小球中的表达显著增加,而沉默足细胞中 YAP 基因表达能够明显改善 C5b-9 诱导的细胞功能损伤,并抑制其凋亡的发生。

摘要: 目的 研究淫羊藿苷( ICA)对氧化低密度脂蛋白( ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 (RAW264. 7)凋亡及炎症的影响,进一步阐明 ICA 抗动脉粥样硬化(AS)的作用。 方法 体外培养 RAW264. 7 细胞,ox-LDL 诱导 RAW264. 7 细胞构建泡沫细胞模型,观察 ICA 低、中、高剂量对 RAW264. 7 细胞活力、细胞凋亡、泡化沫、炎症因子 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 分泌的影响,同时采用 Western blot 检测 ICA 对 Bcl-2、Bax、Caspase-3、IκBα、 NF-κB p65 蛋白表达的影响。 结果 ICA 可以提高细胞活力,降低细胞的凋亡率;减少泡沫巨噬细胞的形成;降低炎症因子 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 的分泌;下调 Bcl-2、Caspase-3、NF-κB p65 蛋白表达,上调 Bax、IκBα 的蛋白表达。 结论 ICA 能够减轻泡沫巨噬细胞的凋亡,抑制炎症因子的表达,从而可能延缓动脉粥样硬化的发展进程。

摘要: 目的 探讨槲皮素预处理通过 AMPK/ mTOR 信号通路介导的自噬对肝缺血再灌注损伤的保护作用。 方法 大鼠使用随机数字表法分为对照组、模型组、槲皮素组、氯喹(自噬抑制剂)组和槲皮素+氯喹组。 手术前 3 d,槲皮素组大鼠灌胃给予 0. 1 g / kg 槲皮素,氯喹组大鼠腹腔注射 0. 02 g / kg 氯喹,槲皮素+氯喹组灌胃给予槲皮素同时腹腔注射氯喹,对照组和模型组给予等体积溶剂,每天 1 次。构建肝缺血再灌注大鼠模型并于再灌注 6 h 后处死大鼠。全自动生化分析仪检测大鼠肝功能指标,包括谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸酰基转移酶 (AST);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中炎性因子含量,包括白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β);单磺尸胺染色法(MDC) 观察并计算各组大鼠肝组织细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝组织中 Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK、mTOR 蛋白磷酸化水平。 结果 对照组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列整齐,无显著坏死现象。 与对照组相比,模型组大鼠肝组织结构紊乱,肝细胞排列疏松,出现坏死,ALT、AST 水平、白细胞介素-6( IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05)。 与模型组相比,槲皮素组大鼠肝组织上述病理损伤显著缓解,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05), 肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05);氯喹组大鼠肝组织上述病理损伤显著加重,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05),肝组织 细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05)。 与槲皮素组相比,槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著加重,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05);与氯喹组相比, 槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著减轻,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05)。 结论 槲皮素预处理可能通过激活肝缺血再灌注损伤大鼠肝组织中 AMPK/ mTOR 信号通路介导的自噬,从而减少炎症反应,缓解肝损伤。

摘要: 目的 文章探讨胰激肽原酶对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤、氧化应激和纤维化的影响。 方法 SD 雄性大鼠分为假手术组、模型组、模型加药组。检测并记录各组大鼠心率(HR)、左室收缩压(LVSP)和短轴缩短率(FS)。 HE 染色观察心肌病理损伤程度。 ELISA 检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白 I(cTnI)含量。 试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。 Western blot 检测线粒体途径凋亡相关蛋白和纤维化标记蛋白表达水平。 Masson 染色观察心肌组织纤维化。 RT-PCR 检测 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤维结合蛋白(FN)表达水平。 结果 与模型组比,3、6 U/ kg PKase 组大鼠 HR、LVSP 和 FS 显著升高(P<0. 05),心肌组织病理损伤明显改善,CK-MB、Mb、cTnI 和 MDA 含量显著降低(P<0. 05),SOD 和 GSH 含量升高(P<0. 05),心肌纤维化程度明显得到改善,Bax / Bcl-2、cas-9、cas-3、α-SMA、 TGF-β1、FN 表达水平显著降低(P<0. 05)。 结论 胰激肽原酶缓解心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤、氧化应激和纤维化。

摘要: 目的 探究辣椒素通过上调肿瘤转移抑制因子 1(MTSS1)抑制结肠癌细胞侵袭、迁移的机制。 方法 实验 1:10、25、50、100 μmol / L 辣椒素组分别加入终浓度为 10、25、50、100 μmol / L 辣椒素,对照组不添加辣椒素,恒温箱中培养 24 h;实验 2:对照组正常培养,100 μmol / L 辣椒素组添加终浓度为 100 μmol / L 辣椒素,100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组、100 μmol / L 辣椒素+MTSS1 siRNA 组在 100 μmol / L 辣椒素组的基础上分别添加终浓度为 50 nmol / L 对照 siRNA、MTSS1 siRNA,转染 4 h 更换为终浓度 100 μmol / L 辣椒素培养液。 CCK8 检测细胞增殖情况; Transwell 检测细胞侵袭情况;划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中辣椒素受体 (TRPV1)、MTSS1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 蛋白水平。 结果 不同浓度辣椒素处理细胞发现,与对照组相比,25、50、100 μmol / L 辣椒素组细胞增殖抑制率升高,10、25、50、100 μmol / L 辣椒素组细胞中 TRPV1、MTSS1 蛋白水平升高,细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平降低(P<0. 05)。 干扰 MTSS1 并添加 100 μmol / L 辣椒素发现,与对照组相比,100 μmol / L 辣椒素组、100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组、100 μmol / L 辣椒素 +MTSS1 siRNA 组细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平降低,细胞中 MTSS1 蛋白水平升高 (P<0. 05);分别与 100 μmol / L 辣椒素组、100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组相比,100 μmol / L 辣椒素+MTSS1 siRNA 组细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平升高,细胞中 MTSS1 蛋白水平降低( P< 0. 05)。 结论 辣椒素通过上调 MTSS1 表达抑制结肠癌细胞侵袭、迁移,从而起到对结肠癌的保护作用。

摘要: 目的 探究复方天麻蜜环糖肽片对原发性高血压大鼠 T 淋巴细胞亚群、早期肾损伤及 AT1R/ Smad3 蛋白的作用。 方法 本实验共分为 3 组,正常组(NC 组)、模型组(SHR 组)和药物组(TMGT 组)。 分别比较 3 组大鼠不同时间的血压变化;3 组大鼠外周血 T 淋巴细胞亚群用流式细胞仪进行检测比较;3 组大鼠血清中的炎症因子 IL-6 和 TNF-α 含量用 ELISA 进行检测比较;3 组大鼠早期肾组织损伤情况用 HE 染色和 PAS 染色观察比较;3 组大鼠肾组织中 AT1R/ Smad3 蛋白和 mRNA 表达分别用蛋白质印迹法和 RT-PCR 法进行检测比较。 结果 于给药后 2、4 和 8 周时 NC 组大鼠相比较,SHR 组大鼠的尾动脉压升高(P<0. 05);和 SHR 组大鼠相比,TMGT 组大鼠的尾静脉收缩压在给药后 2、4 和 8 周时得到了显著降低(P<0. 05)。 SHR 组大鼠 CD4⁺ / CD8⁺比值较 NC 组显著升高(P< 0. 05);干预后的 TMGT 组 CD4⁺ / CD8⁺比值明显低于 SHR 组(P<0. 05)。 SHR 组大鼠血清中 IL-6 和 TNF-α 含量较 NC 组明显升高(P<0. 05);和 SHR 组大鼠血清中 IL-6 和 TNF-α 含量相比,TNGT 组显著降低(P<0. 05)。 SHR 组大鼠肾组织较 NC 组损伤严重,肾小球肥大且基底膜增厚,大量肾小球变为空泡,毛细血管狭窄且出现闭塞;干预后的 TMGT 组大鼠肾组织较 SHR 组得到了明显的改善。和 NC 组相比,SHR 组大鼠肾组织中 Smad3 和 AT1R 蛋白及 mRNA 表达显著增加(P<0. 05);干预后的 TMGT 组大鼠肾组织中 Smad3 和 AT1R 蛋白及 mRNA 表达较 SHR 组均显著降低(P<0. 05)。 结论 复方天麻蜜环糖肽片可有效调节高血压大鼠 T 淋巴细胞亚群,改善机体的免疫功能, 缓解高血压导致的早期肾损伤,同时抑制肾组织中的 Smad3 和 AT1R 蛋白表达,进而对高血压疾病进行治疗。

摘要: 目的 研究 ORMDL3 通过内质网应激(ERS)介导的细胞自噬在中性粒细胞哮喘中的作用机制。 方法 成年雄性 SD 大鼠随机分为对照组、模型组、模型+NC-siRNA 组、模型+ORMDL3-siRNA 组、溶剂对照组、模型+ 溶剂组、模型+NC-siRNA+溶剂组、模型+ORMDL3-siRNA+溶剂组、模型+ORMDL3-siRNA+激动剂组,采用脂多糖+卵白蛋白联合致敏的方式建立中性粒细胞哮喘模型,经气道注射 ORMDL3-siRNA 慢病毒或阴性对照(NC)-siRNA 慢病毒,腹腔注射 ERS 激动剂毒胡萝卜素或溶剂。 检测气道功能 0. 2 s 用力呼气容积(FEV0. 2) / 用力肺活量(FVC) 以及呼气峰流速(PEF),肺组织病理改变,ORMDL3、ERS 标志基因 PERK、IRE1α、ATF6 及自噬标志基因 Beclin-1、 LC3 的表达水平。 结果 模型组大鼠的 FEV0. 2 / FVC、PEF 水平低于对照组,肺组织中 ORMDL3、PERK、IRE1α、 ATF6、Beclin-1、LC3-II/ LC3-I 的表达水平高于对照组(P<0. 05);模型+ORMDL3-siRNA 组大鼠的 FEV0. 2 / FVC、PEF 水平高于模型+NC-siRNA 组,肺组织中 ORMDL3、ATF6、Beclin-1、LC3-II/ LC3-I 的表达水平低于模型+NC-siRNA 组 (P<0. 05)。 PERK、IRE1α 的表达水平与模型+NC-siRNA 组比较无差异(P>0. 05);模型+ORMDL3-siRNA+激动剂组大鼠的 FEV0. 2 / FVC、PEF 水平低于模型+ORMDL3-siRNA+溶剂组,肺组织中 Beclin-1、LC3-II/ LC3-I 的表达水平高于模型+ORMDL3-siRNA+溶剂组(P<0.05)。 结论 在中性粒细胞哮喘的发病中,ORMDL3 通过 ERS 的 ATF6 通路激活细胞自噬是可能的分子机制,阻断 ORMDL3 是治疗中性粒细胞哮喘的可能靶点。

摘要: 目的 基于 TLRs/ NF-κB 信号通路探究补肾益气化瘀冲剂对骨质疏松大鼠血管形成的作用。 方法 取 60 只 SPF 级雌性 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、冲剂组和阳性对照组,每组 15 只,除假手术组外其余 3 组大鼠行双侧卵巢摘除术制备骨质疏松模型,假手术组仅进行手术,不摘除卵巢作为对照。 冲剂组大鼠灌胃给药 5 g / kg补肾益气化瘀冲剂,阳性对照组大鼠给予 0. 5 mg / kg 阿仑磷酸钠灌胃处理,模型组大鼠和假手术组大鼠进行等量生理盐水灌胃。连续给药 12 周后处死大鼠,对大鼠股骨组织进行骨密度检测、HE 染色观察、Micro-CT 三维重建分析、CD31 荧光免疫分析和血液灌注成像分析;ELISA 检测血清中 VEGF 和 HIF-1α 浓度;Western blot 检测 p50 / p-p50 和 p65 / p-p65 蛋白的表达。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠骨密度低(P<0. 05),骨小梁生长稀疏,血管形成较慢,数目较少,血清中 VEGF 和 HIF-1α 浓度明显下降(P<0. 05),股骨组织中 p50 / p-p50、p65 / p-p65 蛋白表达 明显升高;与模型组比较,冲剂组和阳性对照组大鼠骨小梁生长良好,血管形成数目较多,骨密度明显增加,血清中 VEGF 和 HIF-1α 浓度明显上升(P<0. 05),p50 / p-p50、p65 / p-p65 蛋白表达水平明显降低(P<0. 05)。 结论 补肾益气化瘀冲剂可能通过调控 TLRs/ NF-κB 信号通路,促进骨质疏松大鼠血管形成,对缓解骨质疏松有重要作用。

摘要: 目的 探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)在高血压发展进程中,卡托普利对 SHR 内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)和诱导型一氧化氮合酶( inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的改善作用。 方法 以 WKY(Wistar-Kyoto)大鼠为空白对照,SHR 为模型进行分组实验,7~ 24 周 龄 SHR 灌服卡托普利(3. 375 g / ( kg·d)),后停药观察至 32 周龄。 测量血压、左室质量指数( left ventricular mass index,LVMI)、主动脉舒张功能、血清亚硝酸根离子(NO₂ - )含量、iNOS、eNOS mRNA 以及蛋白含量变化。 结果 (1)不同周龄的 SHR 左室质量指数、血清 NO₂ - 浓度均高于 WKY,主动脉的舒张度均显著低于 WKY。 (2)mRNA 表达含量变化:与 WKY 相比,不同周龄的 SHR 的心肌和动脉 eNOS 和 iNOS mRNA 表达均较高,其中 eNOS / iNOS 最大值出现在 18 周龄;通过灌服卡托普利,在 24、32 周龄时可显著降低心肌和动脉 iNOS 和 eNOS mRNA 的表达。 (3)蛋白表达含量变化:与 WKY 相比,18、24 周龄 SHR 的心肌和动脉 iNOS 蛋白含量显著升高,24 周龄 SHR 的动脉以及 18、24 周龄 SHR 的心肌 eNOS 蛋白含量显著升高;通过灌服卡托普利,在 18、24 周龄显著降低动脉 iNOS 蛋白表达,停药后作用消失;在 24 和 32 周龄显著降低心肌 iNOS 蛋白表达,在 32 周龄显著降低动脉 eNOS 蛋白表达和升高心肌 eNOS 蛋白表达。 结论 高血压病理状态可导致 iNOS、eNOS 的过度表达,而 iNOS 和 eNOS 在体内的大量积聚反过来影响高血压的发生;伴随 SHR 高血压的发病进程,一氧化氮合酶-一氧化氮系统与左室肥厚和内皮功能具有一定的相关性;卡托普利能一定程度上抑制体内 iNOS 和 eNOS 的表达,并改善左室肥厚及血管内皮功能。

摘要: 目的 观察腺嘌呤诱导大鼠慢性肾病模型中 HIF-1α、RhoA 和 SOX9 的表达及其与肾间质纤维化的关系。 方法 将 20 只大鼠随机分为对照组(Con 组)和模型组(腺嘌呤诱导的 CKD 大鼠模型)。 分别于第 3、6 周处死大鼠。 观察肾形态改变;分别检测大鼠肾功及 24 h 尿蛋白水平;HE 染色观察肾病理变化;天狼星红染色观察肾小管间质纤维情况;免疫组化染色观察肾组织中 HIF-1α、RhoA、SOX9、Col-I 和 α-SMA 蛋白的表达;RT-PCR 检测 大鼠肾 HIF-1α、RhoA 和 SOX9 和 Col-I、α-SMA mRNA 水平,分析 HIF-1α、RhoA 和 SOX9 表达程度与肾小管间质纤维化的相关性;ELISA 检测两组大鼠血清 SOX9 水平。 结果 与 Con 组相比,CKD 组大鼠 24 h 尿蛋白和血清 BUN、 Scr 均明显增加(P<0. 05);CKD 组 HE 染色和天狼星红染色见明显肾小管扩张及间质纤维化,且随时间进展加重; 免疫组化及 RT-PCR 均提示 CKD 组 HIF-1α、RhoA、SOX9 蛋白及 mRNA 表达均增加;CKD 组大鼠血清中 SOX9 水平较对照组升高,且随造模时间延长增加。 相关性分析提示 HIF-1α、RhoA、SOX9 mRNA 表达与 Col-I 和 α-SMA 相关, 且 HIF-1α、RhoA、SOX9 三者也存在正相关关系。 结论 在腺嘌呤诱导的 CKD 大鼠模型中,存在 HIF-1α、RhoA、 SOX9 的高表达,且可能与肾间质纤维化进程密切相关;血清 SOX9 的水平有望成为早期诊断 CKD 的分子标记物。

摘要: 目的 基于 TLR2 / NF-κB 信号通路研究 1,25(OH)2D3 对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的保护作用机制。 方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、硒酵母片对照组和 1,25(OH)₂D₃ 低、中、高剂量组。 除对照组外,其余大鼠采用皮下注射甲状腺球蛋白(PTg)建立自身免疫性甲状腺炎大鼠模型,1,25(OH)₂D₃ 低、中、高剂量组分别给予腹腔注射 0. 5、1. 0、1. 5 μg / kg 1,25(OH)₂D₃ 注射剂,对照组和模型组注射等量蒸馏水,硒酵母片对照组注射等量硒酵母混悬液(每天 1 次),连续 4 周。 观察大鼠甲状腺组织变化,检测大鼠甲状腺功能因子、血清炎性因子、甲状腺自身抗体含量及 TLR2 / NF-κB 信号通路相关蛋白水平及基因表达量。 结果 与模型组大鼠比较, 1,25(OH)₂D₃ 各组大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及促甲状腺激素(TSH)水平、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12( IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及甲状腺组织 TLR2、MyD88、TRAF-6 和 NF-κB mRNA 和蛋白表达均不同程度降低,而白细胞介素 -10(IL-10)不同程度增加,高剂量 1,25 (OH)₂D₃ 组与模型组差异具有统计学意义( P< 0. 05)。 结论 1,25 (OH)2D3 对自身免疫性甲状腺炎大鼠的甲状腺功能有一定的改善作用,并能提高自身免疫抗体水平,其机制可能与 1,25(OH)₂D₃ 抑制 TLR2 / NF-κB 信号通路活性,从而调控 IL-6、IL-10、IL-12 和 TNF-α 等炎症因子释放有关。

摘要:动物实验是医学教育中的重要内容之一。 目前,实验动物伦理教学存在地区性差异大、教学方法单一等问题。 加强实验动物伦理及 3R(reduction、replacement、refinement)理论教学,强化学生实验动物伦理意识势在必行。 传统的动物伦理教学通常照搬条文,流于形式。 翻转课堂是将课堂主导从教师转移给学生的教学方式。 教师在线上平台进行课前知识传递,医学生完成陈述性知识学习。在线下课堂上,教师引导医学生以小组形式对动物伦理真实案例进行讨论分析,使医学生将动物伦理知识内化为能力,从而提高医学生的科研素养。

摘要:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球范围内逐年上升。 葡萄糖代谢重编程是肿瘤中最具代表的代谢特征,具有独特能量代谢特点,在氧气充足的情况下,肿瘤细胞仍会优先选择糖酵解, 而不是选择能够高效产能的线粒体氧化磷酸化( oxidative phosphorylation, OXPHOS)。当前研究表明在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中非编码 RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以直接靶向葡萄糖转运蛋白及关键酶来改变葡萄糖代谢,或者通过调节癌症相关信号通路间接改变葡萄糖代谢。 本文对 ncRNA 调控口腔鳞状细胞癌有氧糖酵解的有关机制进行综述。

摘要:动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是常见的心血管疾病,能引起严重的并发症,是导致病人死亡最常见的病因之一。 炎症反应是动脉粥样硬化的发病机制之一,而白三烯( leukotrienes, LTs)是重要的炎症介质,在炎症信号通路中具有免疫调节和促炎作用。 白三烯与动脉粥样硬化密切相关。 白三烯的产生主要通过 5-脂氧合酶和环氧合酶产生。 白三烯 B4(leukotrienes B4, LTB4)、半胱氨酸-白三烯(cysteinyl leukotrienes,CysLTs)等通过诱导中性粒细胞聚集,增强内皮细胞通透性,介导血管平滑肌细胞核钙信号转导,促进动脉粥样硬化的形成。 一些与动脉粥样硬化有关的疾病,如阻塞性睡眠呼吸暂停的夜间间歇性低氧显著增加了白三烯 B4 的产生及 5-脂氧合酶 (5-lipoxygenase,5-LOX)的表达;糖尿病患者基质金属蛋白酶明显增加,可促进 5-脂氧合酶和白三烯 B4 表达。 本论述了白三烯及其代谢途径中相关物质、产生白三烯相关疾病与动脉粥样硬化的关系,提出了抑制白三烯受体、 5-脂氧合酶途径和白三烯 A4 水解酶等新的治疗动脉粥样硬化的策略。

摘要:原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis, PBC),又称原发性胆汁性肝硬化,是一种少见的自身免疫性肝病,发病率低,发病机制不明确,无法治愈。研究表明外界环境因素导致发病率逐年升高,所以构建发病因素相似的动物模型研究 PBC 的发病和治疗都具有重要意义。 现通过阅读 20 年来国内外相关文献,总结各种外源性物质(2-辛炔酸偶联牛血清白蛋白、聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸、新鞘氨醇杆菌、抗线粒体抗体抗原、同源胆管蛋白)诱导 PBC 动物模型的方法,分析各种造模方式的特点。为研究者选择更合适的动物模型,探索 PBC 发病机制和研发新药提供参考。

摘要:社会挫败应激是以物种间的从属关系为基础的社会应激方式,它通过同种动物相同或不同品系个体间的挫败行为导致抑郁样及其他行为改变。 目前,抗社会挫败药物研究较少,现有动物模型存在一定的缺陷,且无统一标准。 本文就近年来社会挫败动物模型应用的研究及其发病机制进行综述,为开发抗社会挫败药物提供可供参考的动物模型。

摘要:中性粒细胞作为免疫吞噬细胞,参与许多生理及病理过程,如炎症反应,吞噬病原体,清除肿瘤细胞,清除坏死组织碎片等,这些生理功能与中性粒细胞的离子通道密切相关。 本文综述了中性粒细胞上存在的不同类型的离子通道及其在中性粒细胞中的作用,包括电压门控质子通道、钾通道、ATP 门控 P2X₁ 通道以及氯通道。着重阐述中性粒细胞离子通道介导的离子电导,并总结了每个通道所介导和参与的中性粒细胞中的病理过程。从功能的角度讨论最近的发现,以期待对疾病治疗靶点的选择有所帮助。

摘要:肿瘤的侵袭和转移与诸多因素相关,是造成癌症病人不良预后的重要原因。 肿瘤发生转移的前提条件是突破细胞外基质(ECM)这一天然屏障。基质金属蛋白酶 2(MMP2)具有独特的酶活性,有突破 ECM 的能力,可促进肿瘤转移的发生。在多种恶性肿瘤中,MMP2 通过调节多种通路影响着肿瘤的浸润、转移及预后,很可能成为一种癌症转移预测的标志物。 本文就 MMP2 在肿瘤侵袭和转移中的调控机制进行综述,以期为恶行肿瘤的诊断和治疗提供新的靶点。

摘要:回顾缺血性脑卒中过程总血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的动态病理改变与关于 BBB 在脑缺血性卒中过程中的破坏过程以及当前实验方法在 BBB 的破坏评估量化过程中的新进展。

摘要:端粒位于真核生物染色体末端,在复制过程中保护染色体的完整性。 端粒随着细胞的有丝分裂而缩短,端粒酶在胚胎干细胞等细胞中起到了延长端粒的作用。 端粒结合蛋白包括 shelterin 复合体和 CST 复合体, 端粒酶以自身 RNA 组分为模板逆转录合成端粒,端粒结合蛋白和端粒酶在保持端粒长度和稳定中都有重要作用。 尽管不同物种中端粒序列类似,但是端粒及端粒酶在生理和/ 或病理状态下的功能却不尽相关。 本文对不同物种的端粒结合蛋白和端粒酶的组成、功能等进行综述,以深入了解端粒生物学功能,为端粒功能障碍相关疾病的治疗提供科学基础。

摘要:发作性睡病(narcolepsy, NRL)是一种觉醒-睡眠紊乱的慢性神经系统疾病,其具体病因及发病机制尚未明确,中、西医治疗存在困难。动物模型是研究发作性睡病的神经病理学机制,挖掘潜在治疗靶点及方法的重要手段。本文对目前已有的发作性睡病动物模型的制备方法、模型评价及适用范围等进行总结,旨在为该病的基础实验研究提供造模参考,并对优化发作性睡病动物模型的制备方向提供思路。