摘要: 目的 探讨微小 RNA(miR-488-3p)通过靶向调控 RAS 癌基因家族成员 RAP1A 在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。 方法 体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予 100 μmol / L Hcy 干预 24 h,采用Western blot 检测肝细胞自噬相关蛋白 LC3、p62 和 RAP1A 的表达水平,qRT-PCR 检测肝细胞中 miR-488-3p 和RAP1A 的表达;转染 miR-488-3p inhibitor 和 mimics 后,qRT-PCR 和 Western blot 分别检测 miR-488-3p 的转染效率及其对 LC3 和 p62 蛋白表达的影响;TargetScan 预测 miR-488-3p 与 RAP1A 基因相关性,Western blot 检测 miR-488-3p 下游潜在靶蛋白(RAP1A)的表达改变;Pearson 相关系数对肝细胞中 miR-488-3p 表达水平与自噬相关蛋白水平进行相关性分析。 结果 与 Control 组相比,Hcy 组肝细胞自噬相关蛋白 LC3、RAP1A 和 miR-488-3p 的表达水平升高(P<0. 01),而 p62 表达明显降低(P<0. 01);同时,转染 miR-488-3p inhibitor 和 mimics 后,与 NC-inhibitor 组比较,miR-488-3p inhibitor 组中 LC3 和 RAP1A 蛋白的表达水平显著降低(P<0. 01),p62 表达明显升高(P<0. 01);而与NC-mimics 组相比,miR-488-3p mimics 组中 LC3 和 RAP1A 蛋白表达水平明显增加(P<0. 01),p62 表达降低(P<0. 01);进一步机制研究表明 RAP1A 是 miR-488-3p 的下游靶基因并受其正向调控。 Pearson 相关性分析发现,miR-488-3p 的表达水平与 LC3( r= 0. 9329,P= 0. 0002)蛋白表达呈正相关,而与 p62( r= -0. 8086,P= 0. 0083)表达则呈负相关。 结论 miR-488-3p 在 Hcy 介导的肝细胞中高表达,可通过靶向调控 RAP1A 的表达促进肝细胞自噬。

摘要: 目的 探讨达格列净对载脂蛋白 E 敲除(ApoE^{- / -})小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的影响以及与钠氢交换体 1(NHE1)相关的机制。 方法 6 周龄雄性 ApoE^{- / -}小鼠 24 只,随机分为普通饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+达格列净组(10 mg / (kg·d))以及高脂饮食+格列美脲组(0. 5 mg / ( kg·d))。 8 周后,HE 染色检测小鼠主动脉的 AS 斑块情况,定量 PCR 及免疫印迹法检测主动脉钠葡萄糖协同转运蛋白 2(SGTL2)表达,免疫组化法检测主动脉 NHE1 表达。 进而给予达格列净(10 μmol / L)、阿米洛利(20 μmol / L)以及脂多糖(100 ng / mL)干预小鼠巨噬细胞系 RAW 264. 7 细胞处理 24 h,免疫印迹法检测 NHE1 蛋白表达以及 SNARF-1/ AM 荧光法检测 NH4Cl 诱导 pH 值回复率(NHE1 活性);酶联免疫吸附法检测 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 分泌情况。 结果 高脂饮食+达格列净组主动脉的 AS 斑块面积显著低于高脂饮食组(P<0. 05);各组主动脉斑块内均极低表达 SGLT2(P<0. 05);高脂饮食+达格列净组内斑块 NHE1 表达较高脂饮食组下降(P<0. 05)。 LPS+达格列净组 RAW. 7 细胞的 NHE1 蛋白水平明显低于 LPS 组(P<0. 05);SNARF-1 荧光法提示达格列净处理后细胞内 pH 值降低(P<0. 05),细胞 NHE1 活性显著降低(P<0. 05);与 LPS 组相比,LPS+达格列净组细胞上清 TNF-α、IL-1β、IL-6 含量显著减少(P<0. 05),IL-10 含量显著增加(P<0. 05)。 结论 达格列净通过抑制 NHE1 表达及其活性抑制 AS 斑块发展及细胞因子释放。

摘要: 目的 探索硝石雄黄散保护小鼠缺血心肌的作用机制。 方法 将 C57BL/ 6J 小鼠随机分为空白组(Blank)、假手术组(sham)、模型组(AMI)、雄黄组(XH)、硝石组(XS) 和硝石雄黄组(XSXH)。 分别在造模后第12、24 和 36 h,采用 ELISA 法检测各组血清肌钙蛋白 I( cardiac troponin I, cTnI)、肌酸激酶同工酶( creatine kinase isoenzymes, CK-MB)和乳酸脱氢酶( lactate dehydrogenase, LDH) 水平;在造模后第 14 天,采用一氧化氮( nitric oxide, NO)试剂盒检测各组血清中总 NO 的含量;采用苏木素-伊红染色法检测小鼠梗死心肌的病理损伤,经 2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色后测定心脏梗死面积;在服用雄黄和硝石雄黄散 12 h 和第 14 天,采用相关试剂盒检测各组血清中谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶、肌酐和尿素氮等肝肾功能指标。 结果 硝石雄黄组小鼠血清中cTnI、CK-MB 和 LDH 水平较模型组、雄黄组和硝石组显著降低(P<0. 05);假手术组血清中 NO 水平较高,发生心肌缺血后,NO 水平显著降低( P< 0. 05);与模型组比,雄黄组和硝石组能显著提高心肌梗死小鼠的 NO 水平(P<0. 01);与单味硝石或雄黄相比,硝石雄黄组 NO 含量显著升高(P<0. 001);与模型组相比,硝石雄黄组小鼠心肌梗死面积显著减小(P<0. 05);该方具有明显改善小鼠心肌病理损伤的作用。 与空白组相比,雄黄组的肝肾功能各项指标显著升高(P<0. 01),硝石雄黄组的肝肾功能指标无显著差异(P>0. 05)。 结论 在心肌缺血时,当 LArginine-eNOS-NO 通路被抑制后,硝石雄黄散可通过 NO₃^--NO₂^--NO 通路调节小鼠体内的 NO 水平,对小鼠缺血心肌起到显著的保护作用;且对小鼠的肝肾功能无明显的急性毒性和亚急性毒性影响。

摘要: 目的 建立稳定的 H1N1 流感病毒肺炎-肠炎小鼠模型,为胃肠型流感的病理基础及抗病毒药物研究提供工具和手段。 方法 BALB/ c 小鼠随机分为 4 组(n= 6),10 倍半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose, 10 TCID₅₀ )组、1 TCID₅₀ 组、0. 1 TCID₅₀ 组和对照组。除对照组外,其他 3 组小鼠滴鼻感染不同剂量的H1N1 流感病毒。感染病毒后,每天测量小鼠的肛温、体重,观察小鼠皮毛及精神状态等,连续 7 d。 处死后测定小鼠脏器指数、RT-PCR 检测肺组织中甲型流感病毒 H1N1 M 基因及小肠组织中视黄酸受体相关孤儿受体 γt( retinoid-related orphan nuclear receptor, ROR-γt)的 mRNA 表达量。 对筛选出的最佳感染剂量进行实验验证。 结果 与对照组小鼠相比,模型组小鼠 10 TCID₅₀ 组和 1 TCID₅₀ 组体重呈显著下降趋势,肺指数明显升高(P<0. 01),胸腺指数明显降低(P<0. 01、P<0. 05),肺部病毒载量及小肠组织中 ROR-γt 的 mRNA 表达量显著升高,出现背弓佝偻、精神不振、呼吸急促等现象,两个组的死亡率分别为 67%和 17%。 0. 1 TCID₅₀ 组小鼠指标虽有相似趋势,但无显著性差异。 对 1 TCID₅₀ 感染剂量进行实验验证,与对照组相比,病理切片结果显示,模型组小鼠肺及小肠组织出现严重病理损伤,肺组织中白细胞介素 2(interleukin-2, IL-2)、白细胞介素 6(IL-6)、干扰素 γ(interferon-γ, IFN-γ)、白细胞介素 17A(IL-17A)及小肠组织中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和 IL-2 显著升高,但肠组织中 IL-6 和白细胞介素 33(IL-33)显著降低。 结论 1 TCID₅₀ 病毒感染为建立小鼠肺炎-肠炎模型的最佳浓度,且经过后期多批次的建模实验,证实该模型建立方法稳定、可靠,为抗病毒研究提供良好的病理模型。

摘要: 目的 研究缺氧诱导因子 1α(HIF-1α)对小胶质细胞 M1 极化的影响及其影响机制。 方法 将小胶质细胞(BV-2 细胞)随机分为 6 个组:Control 组和 10、50、100、200、500 μg / L 重组 HIF-1α 蛋白刺激处理组。 采用荧光共聚焦法观察各组 BV-2 细胞的形态变化;采用免疫蛋白印迹法定量分析重组 HIF-1α 蛋白刺激处理后 NF-κBp65、p-STAT1 和 TRAF6 蛋白含量变化。 结果 与对照组相比,重组 HIF-1α 蛋白刺激后小胶质细胞胞体变大,呈圆形或吞噬状,突起变粗变短;胞内 NF-κB p65、TRAF6 蛋白较对照组显著增加,不同浓度重组 HIF-1α 蛋白刺激处理组对比结果有显著差异。 结论 HIF-1α 可刺激小胶质细胞 M1 极化,不同浓度重组 HIF-1α 蛋白刺激处理有量效关系,其机制可能与通过 TLR4 / Myd88 / NF-κB 通路调节 TRAF6 和 NF-κB 活化有关。

摘要: 目的 探讨 miR-214 对异丙酚麻醉诱导的神经元损伤的保护作用及生物学机制。 方法 7 日龄 SD雄性大鼠随机分为 4 组(每组 15 只):生理盐水组(NS)、异丙酚麻醉开腹探查组(模型)、miR-NC 组和 miR-214 组。除 NS 组外,其余组别建立异丙酚麻醉开腹探查模型。miR-NC 组和 miR-214 组分别在麻醉前将 miR-NC-agomir 或miR-214-agomir 注射到海马内。采用免疫荧光法检测海马 mTORC1 的表达,TUNEL 染色检测海马组织细胞凋亡,RT-qPCR 分析海马组织中 miR-214 表达。 分别将 miR-214 抑制剂和 mTORC1 抑制剂转染入 HT22 海马神经元细胞,然后暴露于异丙酚。 采用流式细胞术分析细胞的存活情况和 Western blot 分析 TEFB、C-caspase3 蛋白表达。 结果 与 NS 组相比,模型组大鼠海马中 miR-214 明显下调(P<0. 05),并且海马神经细胞凋亡显著增加(P<0. 05)。与模型组相比,miR-214 组海马神经元凋亡减弱(P<0. 05)。 生物信息学预测证明 mTORC1 和 miR-214 之间存在特异性结合位点。 免疫荧光检测显示,与 NS 组比较,模型组诱导海马神经组织中 mTORC1 表达增加(P<0. 05),miR-214 治疗显著降低了 mTORC1 表达(P<0. 05)。 此外,与 NC 对照组相比,si-mTORC1 转染导致暴露于异丙酚的HT22 海马神经元细胞的凋亡率显著降低,并且 TFEB 表达显著增加(P<0. 01),以及 C-caspase3 降低(P<0. 05)。而 miR-214 抑制剂转染显著逆转了 si-mTORC1 的保护作用以及诱导的 TFEB、C-caspase3 蛋白表达的变化( P<0. 05)。 结论 miR-214 可能通过 mTORC1-TFEB 通路减轻异丙酚神经毒性,提高神经元的存活率。

摘要: 目的 探讨槲皮素(quercetin, Que)对游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)诱导肝细胞脂肪变性的雌激素样保护作用及机制。 方法 CCK-8 法检测细胞活力,油红 O 染色观察脂质蓄积,雌激素以不同方式干预HepG2 细胞,确定药物最佳干预方式为后处理方式。以后处理方式将 HepG2 细胞暴露于不同浓度的雌激素和槲皮素,确定药物最佳干预浓度。细胞随机分为 4 组:对照组(Control)、模型组(FFA)、阳性药雌激素对照组(E2)和槲皮素组(Que)。 GPO-PAP 法测定甘油三酯(triglyceride, TG)含量;DCFH-DA 法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α, TNF-α)蛋白含量;实时定量 PCR(Real-time PCR)检测肝细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活因子- 1α( peroxisome proliferatoractivated receptor γ coactivator-1α, PGC-1α)、过氧化物酶体增殖剂激活受体 α ( peroxisome proliferator-activatedreceptor α, PPARα)、肉碱棕榈酰转移酶 Iα( carnitine palmitoyl transferase 1α, CPT1α) 和乙酰辅酶 A 羧化酶 1(acetyl-CoA carboxylase, ACOX1)mRNA 表达。 结果 确定 1 μmol / L 雌激素和 30 μmol / L 槲皮素后处理用于后续实验。 与对照组相比,模型组红色脂滴显著增多、TG 含量明显增加(P<0. 001),PGC-1α、PPARα、CPT1α 和 ACOX1mRNA 的表达均下降(P<0. 05),ROS 水平升高,TNF-α 蛋白含量增多(P<0. 01);与模型组相比,雌激素组和槲皮素组均可明显降低红色脂滴和 ROS 水平,雌激素组(P<0. 05)和槲皮素组(P<0. 05)均使 TG 含量降低,雌激素组(P<0. 001)和槲皮素组(P<0. 01)均使 PGC-1α 的表达明显上调,雌激素组(P<0. 001)和槲皮素组(P<0. 01)使 TNF-α蛋白含量均明显减少,并显著上调 PPARα(P<0. 01)、CPT1α(P<0. 001)和 ACOX1(P<0. 001)的表达水平。 槲皮素组与雌激素组相比,上述指标差异均无统计学意义。 结论 槲皮素通过诱导 PGC-1α 表达,激活脂肪酸 β 氧化、减轻氧化应激以及抑制炎性反应,发挥雌激素样作用,最终改善肝细胞脂肪变性。

摘要: 目的 脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)严重影响神经功能,本实验计划探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对 CIRI 模型大鼠神经功能是否具有改善作用及其相关机制。 方法 闭塞大鼠大脑中动脉 2 h,随后再灌注 22 h 制备 CIRI 大鼠模型,给予不同剂量(25、50、100 mg / (kg·d))的 GBE 腹腔注射 15 d,全程给药结束后对各组动物进行神经功能评分,评价 GBE 对 CIRI 模型大鼠运动功能的影响;采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色评价 GBE 对脑梗死的影响;蛋白免疫印迹法检测自噬标志性蛋白和凋亡相关蛋白的表达量;ELISA 法检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase,GSH-px) 和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。 结果 GBE 可明显提高 CIRI 模型大鼠的神经功能评分,明显减小脑梗死体积;显著上调血清 SOD 与 GSH-px 的活性,以及降低 MDA 的含量;GBE 可明显提高 Beclin-1 的蛋白表达量、LC3-II/ LC3-I 和 Bcl-2/ Bax 的蛋白表达量比值,相反降低了 Caspase-3 的蛋白表达量。 结论 GBE 改善 CIRI 模型大鼠的运动功能障碍可能是通过抑制氧化应激与凋亡进而激活自噬系统,实现对脑细胞的保护作用。

摘要: 目的 观察罗汉果皂苷 V 对胎粪吸入综合征(MAS)大鼠急性肺损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。 方法 将 48 只健康 Wistar 大鼠随机分为假手术组、模型组、罗汉果皂苷 V 低、中、高剂量组(2. 5、5、10mg / kg)和地塞米松组(0. 5 mg / kg),8 只/ 组;采用经口直视气管插管法构建 MAS 模型;罗汉果皂苷 V 低、中、高剂量组及地塞米松组于造模后灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃。 采用 HE 染色观察肺组织病理变化;测量肺组织湿干质量比(W/ D);ELISA 法检测血清和肺泡灌洗液肿瘤坏死因子 α( TNF-α)、白介素 6( IL-10)、白介素 1β(IL-1β)水平;比色法检测肺组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶( SOD)活性;Western blot检测肺组织 c-Jun 氨基末端激酶(JNK)、磷酸化 JNK(p-JNK)蛋白表达。 结果 与假手术组比较,模型组肺组织病理评分、W/ D 升高(P<0. 05),肺泡灌洗液及血清 TNF-α、IL-6、IL-1β 水平升高(P<0. 05),肺组织 MDA 与 MPO 水平升高、SOD 水平降低(P<0. 05),肺组织 p-JNK 蛋白表达水平上调(P<0. 05)。 与模型组比较,罗汉果皂苷 V 中、高剂量组及地塞米松组肺组织病理评分、W/ D 降低(P<0. 05),肺泡灌洗液及血清 TNF-α、IL-6、IL-1β 水平降低(P<0. 05),肺组织 MDA 与 MPO 水平降低、SOD 水平升高(P<0. 05);罗汉果皂苷 V 中、高剂量组肺组织 p-JNK 蛋白表达水平下调(P<0. 05)。 结论 罗汉果皂苷 V 可能通过抑制 JNK 磷酸化,减轻 MAS 病程中炎性和氧化应激损伤而发挥急性肺损伤保护作用。

摘要: 目的 本研究旨在探讨小 RNA-30(miR-30)在胆囊癌(GBC)上皮间充质转化(EMT)进程中的作用和潜在机制。 方法 qRT-PCR 用于检测胆囊上皮细胞和癌细胞系 miR-30 相对表达水平;过表达 miR-30 后采用MTT、平板克隆实验用于检测细胞增殖能力;细胞划痕实验和 Transwell 小室试验分别评估细胞迁移和侵袭能力;Western blot 用于评估细胞 EMT 相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin 和 Vimentin)和 EMT 相关转录因子( Snail、Slug 和Zeb2)的表达水平。 拯救实验用于探索 miR-30 与 Zeb2 的靶向调控关系。 结果 miR-30 在 2 个代表性 GBC 细胞系(GBC-SD 和 NOZ)中明显下调(P<0. 05)。 过表达 miR-30 会抑制 GBC-SD 细胞增殖、克隆形成、细胞迁移、细胞侵袭和 EMT 过程(P<0. 05),而过表达 Zeb2 可以逆转 miR-30 导致的 EMT 抑制作用(P<0. 05)。 结论 miR-30 通过靶向 Zeb2 减弱 GBC 细胞的 EMT 进展,表明 miR-30 是一种肿瘤抑制因子,可作为 GBC 的新型潜在分子治疗靶点。

摘要: 目的 研究紫菀酮对卵清蛋白( onalbumin,OVA) 诱导哮喘 SD 幼鼠的 Toll 样受体( Toll-like receptors,TLRs)表达和免疫反应的影响。 方法 将 24 只 SD 幼鼠随机分为对照组、模型组、紫菀酮组和地塞米松组,每组 6 只。 观察幼鼠行为学变化,苏木精-伊红( hematoxylin-eosin, HE) 染色观察治疗后肺组织病理学情况,qPCR 检测血浆中 TLRs mRNA 的表达量;ELISA 检测血清中炎症细胞因子 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-13 的表达水平。 结果 模型组幼鼠呼吸急促,打喷嚏口鼻发紫,分泌粘液,亢奋易怒;支气管粘膜充血水肿,支气管上皮细胞脱落,气道及肺组织周围有大量炎症细胞浸润。 紫菀酮和地塞米松用药后,幼鼠呼吸较为平缓,粘液分泌减少,亢奋易怒也有所减少,但地塞米松组出现了攻击性增强的现象;支气管粘膜充血水肿的程度有所缓解,气道及肺组织周围炎症细胞的数量也有所减少。 与模型组比,紫菀酮组和地塞米松组 TLR1、TLR9、TLR10 mRNA 的表达量显著升高(P<0. 01),TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8 mRNA 的表达量显著降低(P<0. 01),TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-13 的水平显著降低(P<0. 01)。 结论 紫菀酮能够改善 OVA 诱导的哮喘 SD 幼鼠肺组织的炎症情况,并能使 TLRs 的表达量产生变化,为后续研究紫菀酮对 TLRs 信号通路的作用机制打下了基础。

摘要: 目的 探讨塞来昔布对肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 诱导类风湿关节炎(RA) 成纤维样滑膜细胞(FLSs)MH7A 炎症因子分泌的影响及其机制。 方法 以 0、2. 5、5、10、20 和 40 μmol / L 塞来昔布处理 MH7A 细胞24 h 后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力以筛选无毒性作用浓度;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法、实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法和 Western blot 法分别检测 2. 5、5、10 μmol / L 塞来昔布处理 TNF-α 诱导的 MH7A 细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β 水平和微小 RNA(miR)-129-5p 表达水平以及高迁移率族蛋白 1(HMGB1)表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测 miR-129-5p 和 HMGB1 的靶向关系;转染 miR-129-5p mimics 或 HMGB1-siRNA 至 MH7A 细胞中,观察 miR-129-5p 过表达或下调 HMGB1 表达对 TNF-α 诱导的 MH7A 细胞炎症因子分泌的影响;另外,将 miR-129-5p inhibitor 转染至 TNF-α 诱导的 MH7A 细胞中,观察 miR-129-5p 低表达对 10 μmol / L 塞来昔布作用下 TNF-α 诱导 MH7A 细胞炎症因子分泌的影响。 结果 与 0 μmol / L 比较,2. 5、5、10 μmol / L 塞来昔布处理后 MH7A 细胞活性差异无统计学意义(P>0. 05),但 20 和 40 μmol / L 塞来昔布处理后 MH7A 细胞活性明显降低(P<0. 05)。 在 TNF-α 诱导下,2. 5、5、10 μmol / L 塞来昔布可呈浓度依赖性抑制 MH7A 细胞上清液中 IL-6、IL-1β 水平和细胞中 HMGB1 蛋白表达并促进 miR-129-5p 表达;miR-129-5p 可与 HMGB1 靶向结合,且 miR-129-5p 可负向调控 HMGB1 蛋白表达;miR-129-5p 过表达或下调 HMGB1 表达后,TNF-α 诱导的 MH7A 细胞上清液中 IL-6、IL-1β 水平明显降低(P<0. 05);并且,miR-129-5p 低表达可明显逆转 10 μmol / L 塞来昔布对 TNF-α 诱导的 MH7A 细胞上清液中 IL-6、IL-1β 水平抑制作用。 结论 塞来昔布可抑制 TNF-α 诱导 MH7A 细胞炎症因子分泌,其作用机制可能与调控 miR-129-5p / HMGB1 有关。

摘要: 目的 探究褪黑素调控 NF-κB 信号通路调节胃癌小鼠 Th1 / Th2 免疫平衡的机制。 方法 将 50 μg(约含有细胞 1×10⁶ 个)胃癌细胞一次性注射到小鼠左侧前肢皮下,在建模 7 d 后触摸到瘤体生成提示胃癌移植瘤小鼠模型建模成功。 10 只健康小鼠作为对照组,建模成功的小鼠分为模型组、模型+褪黑素组,每组 10 只。 模型+褪黑素组皮下多点注射褪黑素(10 mg / kg,每天 1 次,21 d),其余组注射等量的生理盐水。 采用游标卡尺、天平测量各组肿瘤体积、重量。 通过免疫组化检测肿瘤组织中 Ki67 和 Bcl2 评估胃癌细胞增殖和凋亡。 通过 ELISA 检测外周血 IFN-γ 和 IL-4 的水平。 通过流式细胞术检测外周血 Th1 和 Th2 细胞比例。 通过 qPCR 和 Western blot 检测肿瘤组织和淋巴细胞中 NF-κB mRNA 和蛋白水平。 结果 与对照组相比,模型组、模型+褪黑素组的肿瘤体积、质量、Ki67 和 Bcl2 染色强度、IL-4 水平、Th2 细胞比例、NF-κB mRNA 和蛋白表达均显著升高(P<0. 05),IFN-γ 水平、Th1比例、Th1 / Th2 比值显著降低(P<0. 05);与模型组相比,模型+褪黑素组的肿瘤体积、质量、Ki67 和 Bcl2 染色强度、IL-4 水平、Th2 细胞比例、NF-κB mRNA 和蛋白表达均显著降低(P<0.05),IFN-γ 水平、Th1 比例、Th1 / Th2 比值显著升高(P< 0.05)。 结论 褪黑素可能通过调控 NF-κB 通路抑制胃癌移植瘤小鼠模型的肿瘤生长,并调节 Th1 / Th2 平衡。

摘要:细胞焦亡( Pyroptosis) 是一种促炎的程序性细胞死亡方式,其发生依赖于半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)的激活,伴随大量促炎症因子释放。 细胞焦亡的主要信号通路包括 Caspase-1 介导的经典通路和Caspase-4、5、11 介导的非经典通路。 此外,Caspase-3 和 Caspase-8 也可以分别通过裂解 Gasdermin E(GSDME) 和Gasdermin D(GSDMD)来诱导焦亡。近年来研究表明细胞焦亡在心血管疾病发生发展过程中扮演着重要的角色。本文就细胞焦亡与动脉粥样硬化、心肌缺血/ 再灌注、心衰、高血压、糖尿病性心肌病这些心血管疾病的关系及近年来中医药调控细胞焦亡干预心血管疾病方面进行综述,以期为发挥中医药优势防治心血管疾病提供新思路。

摘要:目前抑郁症临床西药治疗上存在着毒副作用大、停药后容易反复等问题,急切需要中医药治疗手段的参与,同时也需要中医药相关方面的基础研究。但在其基础研究中,动物实验面临着相关的问题,即基于现代医学病因病理理论的抑郁症动物模型不能很好地适用于中医药研究。所以把疾病模型和证候模型相结合以构建适用于中医药动物实验的病证结合动物模型。本文以目前运用于抑郁症的病证结合动物模型的制备以及相关研究为切入点,以求使其更科学合理应用到中医药创新研究。

摘要:外泌体是可由大多数细胞分泌的小囊泡。外泌体及其包含的 microRNA、mRNA、蛋白质在细胞间通讯中起重要作用。研究表明外泌体具有免疫调节作用,参与自身免疫性疾病的发病及免疫治疗,并可作为诊断疾病的有效生物标志物。此外,外泌体可被用作药物传递的生物载体。系统性硬化症(systemic sclerosis, SSc)是一种复杂的自身免疫性疾病,发病机制包括血管损伤、免疫异常、内脏器官及皮肤纤维化。近年来,在研究 SSc 的发病机制方面取得了不错的进展,推动了临床治疗方面的研究。本文综述了外泌体的组成、功能,外泌体在 SSc 发病以及诊治方面的潜在作用。

摘要:TSPAN7 是一种由位于 X 染色体上的 tspan7 基因所编码的四次跨膜糖蛋白,在脑组织和胰腺中高度表达。目前研究发现 TSPAN7 能够在细胞膜形成 TSPAN 富集微域( Tspan-enriched microdomains, TEM) 或TSPAN 网,参与调控细胞内外信息传递与物质交流、细胞骨架、细胞运动以及细胞形态等生物过程。 同时,TSPAN7在多种细胞中发挥至关重要的作用,在肿瘤细胞中,TSPAN7 作为一把双刃剑,通过在肿瘤细胞中的表达改变发挥促进或抑制肿瘤的能力;在免疫细胞中,TSPAN7 可以作为肌动蛋白成核和稳定的正调控因子,参与 DCs 形态发生;在神经细胞中,TSPAN7 参与突触传递和神经元形态发生;在胰岛细胞中,TSPAN7 通过调节 β 细胞的电压依赖性Ca²⁺通道进而控制钙(Ca²⁺)进入胰腺 β 细胞,影响胰岛素分泌。 TSPAN7 在不同组织细胞中发挥相应作用,在生理和病理条件下发生改变,参与肿瘤、精神疾病、Ⅰ型糖尿病等多种疾病的发生发展。 本文旨在综述 TSPAN7 在多种疾病中的作用机制,以期为动物模型研制、疾病诊断、药物干预治疗提供新思路。

摘要:MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子 RNA,长度为 20 ~ 23 个核苷酸。 MicroRNA-125(miR-125)是一个高度保守的 miRNA 家族,由 miR-125a、miR-125b-1 和 miR-125b-2 组成。越来越多的证据表明miR-125 参与体内的多种病理生理过程,调节包括免疫细胞在内的多种细胞的稳态和分化,与多种自身免疫性疾病密切相关,有望成为新的治疗靶点。本文综述了 miR-125 家族与自身免疫性疾病、免疫细胞的关系及其最新研究进展。

摘要: 目的 乳腺癌是我国女性发病率最高的恶性肿瘤,严重影响了患者的身心健康,制备出符合临床特征的乳腺癌动物模型,对研究乳腺癌的发病机制和治疗方案至关重要。 方法 以“乳腺癌”“动物模型”为主题,检索知网、万方、维普和 PubMed 数据库,以乳腺癌模型中西医临床诊断标准为依据,将现有乳腺癌动物模型的品种、特征、造模方法进行总结,根据乳腺癌的中西医临床病症特点进行吻合度评价。 结果 发现现有的动物模型制备方法较单一,大多以化药致癌造模方法为主,忽略了中医病因,缺少中医病症结合模型,与临床中多因素致病存在较大出入,限制了中医药防治乳腺癌相关研究和临床应用。 结论 乳腺癌模型评价以病理学诊断和瘤株(体)的形成为主,与临床中、西医乳腺癌诊断标准存在一定差异。 因此,有必要进一步完善乳腺癌动物模型评价体系,改进现有模型,使中医药基础研究更加贴合临床实际。

摘要:动物实验是新化合物向临床转化的基础过程,也是评价其安全性和有效性的关键步骤,因此,合理的剂量设置、动物模型构建与适宜的给药方式是保证实验数据可靠的前提。但是在科学研究的实践中,研究者在选用动物实验条件等方面并没有形成统一标准,使药效评价出现偏差,不能有效促进新化合物向临床的转化。鉴于此种情况,笔者仅以顺铂参与的使用 4T1 细胞构建的异体移植瘤模型为例,来探讨铂类化合物治疗三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)的药效学研究中动物实验存在的问题与可能的解决方案,从而使动物实验更好的为临床转化服务。