• 2023年第33卷第4期文章目次
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    • Tmem72 对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的影响

      2023, 33(4):1-10,27. DOI: 10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2023. 04. 001

      摘要 (348) HTML (0) PDF 16.13 M (1254) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的 探究跨膜蛋白72(transmembrane protein 72,Tmem72)对小鼠神经干细胞体外增殖和分化的影响。 方法 Western blot 检测野生小鼠中Tmem72 在不同年龄、不同脑区中的蛋白表达情况;在N2a 细胞中瞬时转染Tmem72 敲降质粒,利用CCK8、RT-qPCR、Western blot 检测基因敲降后的增殖变化,流式细胞术检测细胞周期及凋亡变化;在小鼠神经干细胞中用慢病毒感染细胞,RT-qPCR、Western blot 检测敲降效率,并检测增殖和分化标记物的表达变化;转录组测序分析差异表达基因及基因富集的信号通路。 结果 Tmem72 在不同年龄段及脑区中表达;与对照组相比,Tmem72 敲降组在N2a 细胞与神经干细胞中Tmem72 的表达均显著下调(P<0. 05);Tmem72 敲降后N2a 细胞的增殖能力及活力显著上调(P<0. 05),而凋亡能力显著下降(P<0. 01);Tmem72 敲降后神经干细胞的增殖能力无显著变化,但促进向星形胶质细胞和未成熟神经元的方向分化(P<0. 05);转录组测序分析发现差异基因富集到跨突触信号条件、胶质细胞分化调节,以及PI3K-Akt、MAPK 信号通路、ECM-受体相互作用等方面。 结论 Tmem72 敲降后对N2a 细胞起到促进增殖,抑制凋亡的作用;Tmem72 敲降促进神经干细胞向星形胶质细胞和未成熟神经元的方向分化,提示Tmem72 与神经发育密切相关。

    • 两种致敏途径诱导的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫应答比较

      2023, 33(4):11-19. DOI: 10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2023. 04 002

      摘要 (380) HTML (0) PDF 12.32 M (1203) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  比较两种致敏途径诱导的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫炎症差异,为使用过敏性气道炎症小鼠模型的研究提供参考。 方法  建立卵清蛋白经腹腔致敏和经皮肤致敏诱导的过敏性气道炎症小鼠模型,通过ELISA 分析小鼠血清中的总IgE 和OVA 特异性IgE。支气管肺泡灌洗液细胞行瑞士-吉姆萨染色以评估嗜酸性气道炎症。对肺组织进行苏木素伊红染色和高碘酸希夫染色以评估其组织病理学变化,肺免疫细胞进行mRNA 测序和数据分析。 结果  经腹腔致敏和经皮致敏诱导的过敏性气道炎症小鼠模型均表现出肺组织嗜酸性粒细胞浸润、支气管上皮杯状细胞增生、Th2 型细胞因子表达上调的炎症反应。但腹腔致敏模型系统免疫更强,经皮致敏模型局部免疫更强。哮喘相关通路如JAK-STAT 信号通路在两个模型中均上调而Hippo 通路仅在经皮致敏模型中下调。经皮致敏模型与金属蛋白酶、肥大细胞和嗜碱性粒细胞的关系更密切。 结论  过敏原经腹腔和经皮肤致敏途径不同,诱导产生的过敏性气道炎症小鼠模型的免疫学表型和分子机制存在差异。

    • 益肺灸及其联合调补肺肾三方对COPD 稳定期大鼠气道MUC5AC 和MUC5B 的影响

      2023, 33(4):20-27.

      摘要 (364) HTML (0) PDF 6.84 M (1270) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  探讨益肺灸及其联合调补肺肾三方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期大鼠气道黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)和黏蛋白5B(mucin 5B,MUC5B)水平的影响,阐明益肺灸作用机制和灸药联合是否具备治疗优势。 方法  采用香烟烟雾暴露联合肺炎克雷伯杆菌感染法建立COPD 稳定期大鼠模型。第9~20 周,空白组和模型(COPD)组给予生理盐水(每只2 mL/ d)、氨茶碱组给予氨茶碱(27 mg/ (kg·d))、补肺健脾组和益肺灸+补肺健脾组给予补肺健脾方(12. 42 g/ (kg·d))、补肺益肾组和益肺灸+补肺益肾组给予补肺益肾方(11. 61 g/ (kg·d))、益气滋肾组和益肺灸+益气滋肾组给予益气滋肾方(12. 42 g/ (kg·d))灌胃,益肺灸组及灸药联合组每周益肺灸灸2 次,每次10~15 min。检测大鼠肺功能、肺组织病理、以及支气管肺泡灌洗液(BALF)和气道中MUC5AC、MUC5B 蛋白表达。 结果  COPD 组大鼠较空白组Penh 水平显著升高(P=0. 007),支气管管壁增厚,管腔狭窄,小气道和BALF 中MUC5AC 蛋白表达均显著升高(P<0. 001,P= 0. 005),MUC5B 有升高趋势(P>0. 05)。各治疗干预均显著降低COPD 大鼠Penh 以及BALF 和气道MUC5AC 水平(P<0. 05),益肺灸、调补肺肾三方和益肺灸+益气滋肾方有降低COPD 大鼠MUC5B 的趋势(P>0. 05)。灸药联合在降低Penh、MUC5AC 或MUC5B 气道表达、分泌方面有不同程度上的优于灸、药单独应用的趋势。 结论  益肺灸、调补肺肾三方及其联合均可改善COPD 大鼠气道通气功能和黏蛋白高表达、分泌,其中,灸药联合可能是更有效策略。

    • 慢性高原低氧暴露对小鼠神经行为学的影响

      2023, 33(4):28-35. DOI: 10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2023. 04. 004

      摘要 (279) HTML (0) PDF 1.85 M (1265) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  观察高原低氧暴露4 周对小鼠神经行为学的影响。 方法  C57BL/6J 小鼠随机分为2 组:对照组和低压低氧组,其中低压低氧组模拟海拔6000 m,暴露时长为4 周。低压低氧暴露后每周进行一次体重测量;暴露4 周后,开场、悬尾和高架十字迷宫实验用于检测小鼠情绪行为的变化;负重游泳和转棒实验用于检测小鼠体能的变化;新物体识别、Y 迷宫和Morris 水迷宫实验用于检测小鼠认知及学习记忆的变化。 结果  与对照组相比,低氧暴露1 周引起小鼠体重显著下降(P<0. 001),且低氧组小鼠体重增长缓慢。开场实验结果显示低氧暴露对小鼠的自发活动没有影响,悬尾和高架十字迷宫实验显示低氧暴露小鼠未见明显的负性情绪。负重游泳实验结果显示低氧后小鼠力竭潜伏期缩短(P<0. 01),转棒实验结果显示两组之间没有统计学差异。新物体识别实验结果显示低氧后小鼠对新事物、新环境的探索时间减少,认知指数下降(P<0. 05),Y 迷宫实验中工作记忆显著降低(P<0. 05),空间学习记忆两组之间没有差异。 结论  模拟高原低氧暴露4 周可对小鼠神经行为学的多个指标产生影响,其中力竭游泳实验中的力竭潜伏期、新物体识别实验中的认知指数和Y 迷宫实验中进入新开放臂次数的百分比是较为敏感的指标。

    • 国家病原微生物资源库对一株嗜肺啮齿杆菌的标准化鉴定与收录

      2023, 33(4):36-42.

      摘要 (422) HTML (0) PDF 4.56 M (1424) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  参照国家病原微生物资源库中国医学科学院菌毒种保藏中心实验动物与人兽共患病保藏分中心的鉴定、收藏程序以及国家标准菌株的鉴定要求,对一株分离自江西省实验小鼠呼吸道的嗜肺啮齿杆菌进行标准化鉴定并保存入库。 方法  江西省职业病防治研究院(江西省实验动物质量检测站)按照GB14922. 1 和GB14926. 12 的要求对实验小鼠进行常规监测采样,分离病原菌株,初步鉴定为嗜肺啮齿杆菌;菌株由国家菌毒种保藏中心进行菌落、菌体特征、生理生化特性、16S rRNA 管家基因系统发育分析和基因组序列分析,并进行人工感染小鼠实验评价其致病性。 结果  实验小鼠分离出1 株嗜肺啮齿杆菌,动物无其他明显异常;经鉴定该菌株的菌落、菌体特征以及生理生化特征与模式株NCTC 8141(Rodentibacter pneumotropicus)相似;16S rRNA 基因序列与模式株NCTC 8141 的同源性为98. 37%,在系统发育树中与模式株NCTC 8141 聚为一个分支,自举数据值达96%;基因组序列分析,分离株与模式株NCTC 8141 之间的ANI 值为97. 97%,dDDH 值为80. 3%,高于国际标准95%和70%的分类界限;嗜肺啮齿杆菌江西分离株滴鼻感染ICR(Institute of Cancer Research)小鼠临床病症及肺组织病理改变与模式株NCTC 8141 相似。 结论  国家实验动物与人兽共患病菌毒种保藏分中心将之命名为嗜肺啮齿杆菌江西株(Rodentibacter pneumotropicus),并对该菌株进行标准化保藏,收录编号CCPM-B-B-006-2209-2。

    • 后肢静脉性溃疡大鼠模型的构建与分析

      2023, 33(4):43-49.

      摘要 (307) HTML (0) PDF 11.19 M (1058) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  采用结扎左髂总静脉+局部皮肤全层切除的方法,构建一种稳定的、可行性高的后肢静脉性溃疡的大鼠,为研究下肢静脉性溃疡提供标准化的动物模型。 方法  将40 只雄性SD 大鼠随机分为3 组,模型组15 只(分离并结扎左髂总静脉后剪去局部全层皮肤)、对照组15 只(只分离左髂总静脉后剪去局部全层皮肤)、空白组10 只(不做处理),观察10 d,期间观察大鼠的成模率、一般状态、静脉彩色多普勒超声图像与创面变化。10 d后各组大鼠予以常规腹腔麻醉并解剖取材,HE 染色观察创面组织细胞形态学变化;免疫组化检测血管P-选择素与ICAM-1 的表达水平;ELISA 检测血浆IL-6 与TNF-α 水平。 结果  (1)与对照组和空白组比较,模型组后肢静脉彩超显示有血栓形成。(2)与对照组比较,模型组的创面面积更大(P<0. 05)、愈合率更低(P<0. 05)。(3)HE 染色显示,与空白组比较,模型组与对照组创面组织均出现炎症细胞浸润,模型组炎症程度更明显。(4)免疫组化结果显示,与对照组和空白组比较,模型组血管P-选择素与ICAM-1 的表达水平显著上调(P<0. 05)。(5)ELISA结果显示,与对照组和空白组比较,模型组血浆IL-6 与TNF-α 水平显著上调(P<0. 05)。 结论  采用结扎左髂总静脉+局部皮肤全层切除的方法,可以成功构建后肢静脉性溃疡的大鼠模型。

    • 柯萨奇病毒B 组1 型感染叙利亚金黄地鼠动物模型建立

      2023, 33(4):50-56.

      摘要 (199) HTML (0) PDF 12.50 M (1024) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  建立叙利亚金黄地鼠CVB1(Coxsackievirus B1,CVB1)感染动物模型。 方法  取叙利亚金黄地鼠经鼻腔滴注方式呼吸道感染CVB1,感染剂量每只为107. 25 CCID50。观察14 d 体重、体温、精神状态、皮肤黏膜变化、行为、粪便状态、是否有神经症状等临床情况;每天采集咽拭子、鼻灌洗液以及粪便进行病毒载量检测,感染第7 天取3 只实施安乐死,采血进行病毒载量及生化检测;同时采集脑、心脏、肝等多个组织样品进行病毒载量、组织病理学和IHC 检测。 结果  感染CVB1 病毒的动物在14 d 内均出现不同程度精神萎靡、体温下降,以及口唇部出现典型的红疹及疱疹等类似人类手足口病临床表现。咽拭子、鼻灌洗液、粪便以及血液中能检测到病毒;组织中检测到病毒载量并观察到病毒抗原,同时伴有炎症、增生、出血等病理改变;血清酶中肝功、心肌酶升高。 结论 CVB1 病毒经滴鼻方式感染叙利亚金黄地鼠建立的感染模型,表现出心肌和肝等组织器官的病理损伤特征,可用于人类手足口病的研究。

    • 表皮干细胞对小鼠皮肤创面愈合的作用

      2023, 33(4):57-62.

      摘要 (259) HTML (0) PDF 6.29 M (1141) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  体外分离培养表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs),通过将ESCs 移植皮肤损伤模型小鼠,探讨ESCs 对小鼠皮肤创面愈合的作用。 方法  取包皮环切术后的皮肤组织,采用黏附型Ⅳ型胶原分离培养ESCs,3T3 细胞作为饲养层分选ESCs。采用背侧创伤法建立小鼠皮肤损伤模型,随机分为空白对照组、模型组和点注射细胞组。治疗第0、3、7、11、15 天拍照记录并计算创面愈合率。治疗第16 天,测定小鼠组织中SOD、GSH、GSH-Px、MDA 含量;ELISA 测定小鼠血清中IL-10、TGF-β 和TNF-α 含量;HE 染色观察创面皮肤组织病理学改变。 结果  治疗第7、11 天,点注射细胞组创面面积均低于模型组(P<0. 05),第15 天点注射细胞组伤口几乎愈合(98. 08%±1. 77%)。与模型组相比,点注射细胞组小鼠组织中SOD、GSH、GSH-Px 含量显著升高(P<0. 01),MDA 含量显著降低(P<0. 01);ELISA结果显示,与模型组相比,点注射细胞组小鼠血清中IL-10 和TGF-β 含量升高(P<0. 05)、TNF-α 含量降低(P<0. 05)。HE 染色结果表明,与模型组相比,点注射细胞组炎症细胞浸润减少,有较多的毛囊和胶原生成。 结论  ESCs 可以加速创面上皮化,有效促进伤口创面愈合。

    • 荧光RAA 检测小鼠微小病毒的研究和应用

      2023, 33(4):63-68,82.

      摘要 (228) HTML (0) PDF 2.25 M (1085) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  病毒培养、组织学、免疫学及普通PCR方法等在小鼠微小病毒(minute virus of mice,MVM)的检测方面都存在一定的不足,不能满足目前实验动物饲养机构现场检测MVM 病毒的需要,因此探索开发一种新的、简单易用,便于现场检测MVM 的检测方法具有重要的意义。 方法  根据Genbank 公布的MVM 序列,对MVM高度保守序列区域Ns1 基因设计荧光重组酶介导链替换核酸扩增的引物和探针,建立了一种MVM 荧光法重组酶介导链替换核酸扩增技术(Real-time RAA)检测方法,对其特异性、室温储存稳定性、灵敏度及临床样本验证方面与qPCR 法进行对比分析。 结果  荧光RAA 法在39℃ 20 min 内即可检测到MVM 病毒特异性扩增曲线;其灵敏度为10 copies/ μL;与Reo-3、MHV-1、MHV-3、MHV-A59、MHV-JHM 病毒均无交叉反应;检测试剂室温储存20 d 无明显的扩增性能下降;分别对15 份阳性模拟样品进行荧光RAA 法与qPCR 法的检测比对,结果显示两种方法的符合率为15/15;对两种方法的相关性进行统计学分析,结果显示相关系数R2 = 0. 85,两种方法具有显著的线性相关性。 结论  本研究建立的MVM 荧光RAA 法,操作简单,特异性强、灵敏度高,能够快速有效地检出临床样本。

    • 醒脾养儿颗粒对正常大鼠排尿功能的影响

      2023, 33(4):69-75.

      摘要 (182) HTML (0) PDF 3.58 M (1114) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  探索醒脾养儿颗粒对正常大鼠膀胱尿动力学及尿道外括约肌活动性的影响。 方法  雄性SD 大鼠60 只,随机分为正常对照组、醒脾养儿颗粒9. 2、4. 6、2. 3 g/ kg 组及奥昔布宁组,每组12 只。各给药组灌胃给药,正常对照组给予等体积纯水,连续7 d,末次灌胃后分别于深麻醉和浅麻醉状态下测定大鼠排尿时膀胱内压和尿道外括约肌电活动。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠膀胱组织形态学变化。 结果  醒脾养儿颗粒各剂量组能明显降低深麻醉及浅麻醉下大鼠基础膀胱压,醒脾养儿颗粒大剂量组能显著增加膀胱最大容量;醒脾养儿颗粒大剂量组明显增加浅麻醉下大鼠排尿P2 期波峰数及膀胱顺应性;各组膀胱组织形态未见明显差异。 结论  醒脾养儿颗粒可显著降低基础膀胱压,增加膀胱最大容量和膀胱顺应性,促进膀胱持续有力的排尿,其作用可能与松弛膀胱平滑肌改善膀胱功能状态相关。

    • 医学实验手术中仔猪麻醉及保留自主呼吸的气管插管技术的应用

      2023, 33(4):76-82.

      摘要 (246) HTML (0) PDF 3.96 M (1179) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  介绍一种安全实用的适用于医学实验仔猪手术的气管插管和麻醉方法。 方法  20 头健康长白仔猪,麻醉前给药使用阿托品和咪达唑仑,自制仔猪面罩吸氧后给予氯胺酮及丙泊酚诱导。使用自制开口器配合可视喉镜,通过保留自主呼吸的气管插管技术顺利插管,丙泊酚、芬太尼、罗库溴铵维持麻醉。通过耳缘、大腿等建立动、静脉通道,进行麻醉与监测。麻醉稳定后,监测各项生理指标。术中密切监测,术后良好护理,避免并发症发生。 结果  仔猪插管稳定后,心率每分钟(111. 15±6. 6)次、呼吸频率每分钟18 次、血氧饱和度(尾巴)(98. 6±1. 09)%、额温(39. 16±0. 76)℃、股动脉血压(106. 3±7. 63) / (70±6. 94) mmHg、中心静脉压(颈内静脉) (8. 15±1. 94)cmH2O、呼吸末二氧化碳分压(35. 5±3. 79)mmHg、呼吸峰压(19. 6±2. 41)cmH2O、临床虚弱时间(19. 4±2. 6)s、直接喉镜观察时间(65. 2±5. 7)s。麻醉时间约2 h。气管及血管插管均成功,术中麻醉平稳,无死亡仔猪,术后无严重麻醉相关并发症。 结论  应用本文介绍的麻醉和插管技术可安全实施仔猪腹部手术的全身麻醉。麻醉过程中各项生命体征稳定,可行多种插管和监测,麻醉安全性高。良好的术后监测和护理可避免相关并发症。

    • 慢性肾病微炎症大鼠肠源性外泌体携带miR-146a 表达特性研究

      2023, 33(4):83-89,108.

      摘要 (379) HTML (0) PDF 7.92 M (1180) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  研究慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)微炎症大鼠肠源性外泌体携带miR-146a 的表达特性。 方法  健康SPF 级Wistar 雄性大鼠16 只,随机分为2 组,分别为正常组、模型组。采用腺嘌呤诱导CKD 大鼠模型。适应性喂养3 d 后,大鼠灌胃腺嘌呤(冲击量220 mg/ (kg·d),4 周;维持量100 mg/ kg,3 周,共7 周)。实验终点,大鼠经麻醉后,腹中动脉取血,留取血清和EDTA 抗凝血浆各一份。测定血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;制备肾组织病理切片,苏木-伊红染色(HE)观察肾组织形态,马松(Masson)染色观察肾纤维化程度;透射电镜观察肠组织超微结构和外泌体分泌情况;试剂盒法提取血浆外泌体,超高速离心法提取肠道组织中外泌体;负染电镜技术鉴定外泌体形态;NTA 技术测定外泌体粒径;免疫蛋白印迹法(Western blot)测定外泌体表面生物标记物;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测血浆外泌体中携带的微小RNA-146a(miR-146a)表达水平;Western blot 法测定肠道组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、核因子-κB(nuclear factor-κB signalling pathway,NF-κB)、Toll 样受体4(TLR4)炎性信号通路蛋白表达。 结果  与正常组比较,模型组灌胃腺嘌呤7 周后,构建CKD 大鼠模型,模型大鼠的血清BUN、Cr 水平显著增加(P<0. 01)。模型组血清和回肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α 水平明显高于正常组(P<0. 01)。模型组肾病理显示肾小管明显萎缩、扩张,部分呈囊性病变,肾小管内大量褐色结晶,可见管型和再生;肾小球硬化,肾小球萎缩,鲍曼氏囊腔扩张,数目明显减少并大小不一;间质纤维化及炎性细胞浸润明显。模型组大鼠血浆和肠道组织中均可见粒径在155 nm 的外泌体,透射电镜可见模型组大鼠的肠道组织释放出大量外泌体。模型组血浆外泌体携带miR-146a 的表达显著高于正常组(P<0. 01),而肠道组织外泌体携带miR-146a 的表达却显著低于正常组(P<0. 01)。 结论  腺嘌呤导致大鼠肾功能损伤,肾组织形成病理性改变,伴发全身微炎症。同时,CKD 大鼠肠道组织分泌并释放外泌体,使血浆中外泌体携带miR-146a被激活增加。

    • NOX4/ ROS/ STAT3 通路对肝星状细胞活化增殖的影响

      2023, 33(4):90-95. DOI: 10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2023. 04. 018

      摘要 (379) HTML (0) PDF 5.45 M (1164) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  研究肝星状细胞活化及增殖过程中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达的变化,并探讨NOX4 抑制剂GKT137831 是否可通过抑制NOX4,减少活性氧(ROS)的产生,抑制STAT3 信号通路,抑制肝星状细胞活化与增殖。 方法  将大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)分为4 组:对照组、TGF-β1 组、TGF-β1+GKT137831 组、GKT137831 组。DCFH-DA 荧光探针法检测HSC-T6 细胞内ROS 水平,CCK-8 法检测细胞增殖,实时荧光定量PCR 法检测NOX4、STAT3 mRNA 的表达;细胞免疫荧光和蛋白印迹法检测NOX4、STAT3、p-STAT3 及α-SMA 蛋白的表达。 结果  与对照组相比,TGF-β1 组HSC-T6 细胞中NOX4mRNA 和蛋白表达上调,细胞内ROS 水平升高,p-STAT3 蛋白表达增加,细胞活化增殖能力升高(P<0. 05);给予GKT137831 处理后,HSC-T6 细胞中NOX4 mRNA 和蛋白表达下调,细胞内ROS 水平下降,STAT3 蛋白磷酸化减少,细胞活化增殖能力下降(P<0. 05)。 结论  NOX4 可能通过产生ROS,促进STAT3 磷酸化,导致HSC-T6 细胞活化与增殖;GKT137831 通过抑制NOX4 来减少ROS 的产生,抑制STAT3 磷酸化,从而抑制HSC-T6 细胞活化与增殖。

    • miR-141 基因干扰靶向PTEN 影响小鼠BMSCs 成骨分化的实验研究

      2023, 33(4):96-103.

      摘要 (303) HTML (0) PDF 9.51 M (1194) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  探讨微小核糖核酸-141(micro-RNA-141,miR-141)基因干扰靶向蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响。 方法  取小鼠BMSCs并鉴定;构建miR-141 mimics、miR-141 inhibitor、miR-141 mimics-NC、miR-141 inhibitor-NC 质粒,分别转染小鼠BMSCs,并记为过表达组、沉默组、过表达对照组、沉默对照组,另取小鼠BMSCs 常规培养记为空白对照组。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色、茜素红染色检测各组成骨分化能力;检测各组miR-141、PTEN 通路相关基因及蛋白表达;验证miR-141 是否可靶向调控PTEN。 结果  与空白对照组、过表达对照组相比,过表达组ALP 定量,AKT、GSK3β mRNA 及蛋白表达,Runx2、Osterix 蛋白表达,p-AKT、p-GSK3β 均下降(P<0. 05),钙化结节大小、数量、密度均显著减少,miR-141 mRNA 表达及PTEN mRNA 和蛋白表达均升高(P<0. 05);与空白对照组、沉默对照组相比,沉默组ALP 定量,AKT、GSK3β mRNA 及蛋白表达,Runx2、Osterix 蛋白表达,p-AKT、p-GSK3β 均升高(P<0. 05),钙化结节也显著增多,miR-141 mRNA 表达及PTEN mRNA 和蛋白表达低于其余4 组(P<0. 05);荧光素酶活性实验验证miR-141 可靶向调控PTEN。 结论  miR-141 过表达可激活PTEN 信号通路抑制小鼠BMSCs 成骨分化,而miR-141 基因沉默可下调PTEN,上调AKT、GSK3β 表达,增加p-AKT、p-GSK3β 水平,并促进成骨标志蛋白表达,促进小鼠BMSCs 成骨分化。

    • 大鼠颌下静脉丛采血技术方法及其效果比较

      2023, 33(4):104-108.

      摘要 (392) HTML (0) PDF 2.85 M (1509) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  介绍一种操作简便、可多次、大量采血的大鼠采血方法以及采血点的定位。 方法  通过大鼠自身的体表特征,判定最佳进针点,使用注射器针头刺入动物颌下静脉丛缓慢抽取血液。 结果  非麻醉状态下,单人平均77. 46 s 可完成一只大鼠的采血操作,平均采血量为0. 53 mL;双人平均56. 28 s 可完成采血操作,平均采血量为0. 59 mL。麻醉状态下,单人大鼠的采血操作平均耗时28. 67 s,平均采血量为0. 56 mL。 结论  颌下静脉丛采血成功率高,对动物创伤小,且操作简单,采血量大,可作为药理毒理实验中大批量动物活体多次采血的优先选择。

    • 我国实验动物福利伦理审查质量评价指标体系构建研究

      2023, 33(4):109-117.

      摘要 (230) HTML (0) PDF 2.42 M (1110) 评论 (0) 收藏

      摘要: 目的  探索构建我国实验动物福利伦理审查质量评价指标体系的理论框架,从而提升我国实验动物福利伦理的审查质量。 方法  首先运用文献分析法初步构建指标体系,然后运用问卷调查法细化指标体系,最后运用专家论证法评价指标体系。 结果  构建实验动物福利伦理审查质量评价指标体系,包括指标5 个,指标内容20 个以及指标内容评分。经专家论证,认为该指标体系具有科学性、系统性和可操作性,并具有重要应用及推广价值。 结论  本研究初步构建的实验动物福利伦理审查质量评价指标体系,为我国实验动物福利伦理管理提供了评价的参考。

    • 太阴调胃汤组方及药理作用研究进展

      2023, 33(4):118-127.

      摘要 (357) HTML (0) PDF 1.09 M (1160) 评论 (0) 收藏

      摘要:朝医方-太阴调胃汤记载于《东医寿世保元》,书中记载太阴调胃汤应用于太阴人黄疸、伤寒、时气头痛、身痛无汗等症状,在我国朝医防病治病中具有广泛的应用。近年来科学系统的研究太阴调胃汤药理作用的较多,包括对心脑血管疾病、脂肪肝、肥胖症、胃炎、癌症等都具有很好的治疗效果,具有毒副作用小、效果良好、安全性高,能够通过多组方、多靶点对疾病产生一定的治疗作用,且民族药与当地的气候、人文地理等密切相关,是我国中医药研究中的特色资源。该文在朝药以及现代医药学者研究前提下,总结了太阴调胃汤对于多种疾病的药理作用并对组方成分进行了现代药理学作用对比分析,旨在为太阴调胃汤在临床治疗和科学研究方面提供理论依据。

    • 动物实验的人道干预点

      2023, 33(4):128-132.

      摘要 (293) HTML (0) PDF 822.25 K (1553) 评论 (0) 收藏

      摘要:随着动物福利研究的深入,作为3R 优化原则的重要组成部分,动物实验过程中的人道干预点日益受到国际关注,人道干预点的确定和干预措施的选择是保障动物福利的关键。人道干预点是指动物实验过程中动物出现应该被干预状态的时间点,人道终点属于人道干预点的一种特殊表现形式,安乐死是人道干预点的一种实施方式。目前为保护实验动物福利,我国已出台多项标准和规范,而针对人道干预点的确定原则和干预措施仍没有系统要求,也缺乏相关的研究报道。本文拟综合国内外指导性文件及文献报道,系统描述动物实验过程中的人道干预点,以期为实验动物从业人员提供科学参考,最大程度减轻实验过程中动物所承受的疼痛和痛苦。

    • 筛选镇静催眠药物的动物实验评价

      2023, 33(4):133-140.

      摘要 (502) HTML (0) PDF 1.02 M (1865) 评论 (0) 收藏

      摘要:失眠在现代社会广泛存在,影响近1/3 的人口,进一步寻找安全有效的镇静催眠药物是人民健康和市场的共同需求。尽管研究手段众多,但动物实验仍然是发现、验证与评价镇静催眠药物的常用手段,主要包括旷场实验、戊巴比妥钠阈下/ 阈剂量协同受试药物诱导翻正反射实验、基于诱导失眠模型的验证实验以及脑电图检测等。其中,旷场实验通过观察动物的自主活动初步判断受试药物的镇静效应;戊巴比妥钠协同诱导翻正反射实验所产生的睡眠指标(睡眠潜伏期、睡眠时间)可初步揭示受试药物的催眠作用;某些应激方式或药物能够使动物在一段时间内持续处于失眠状态,可判断受试药物对失眠的防治情况;脑电图是睡眠评价的金指标,可观察受试药物对睡眠结构的调整,进一步筛选能够恢复生理性睡眠的受试药物。笔者对常用的筛选评价手段进行综述,为镇静催眠药物的研究和开发提供参考。

    • 蛋白质二硫键异构酶A3 在消化系统肿瘤中的研究进展

      2023, 33(4):141-146.

      摘要 (223) HTML (0) PDF 870.91 K (1169) 评论 (0) 收藏

      摘要:目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致死率、致残率在逐年上升。蛋白质二硫异构酶A3(PDIA3)是PDI 家族中重要的一员,是一种功能广泛的硫醇氧化还原酶,其在多种肿瘤中的表达含量升高,与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。尽管大量研究表明,PDIA3 在许多肿瘤的发生和发展中起着至关重要的作用,但目前尚无系统的报道PIDA3 在消化系统肿瘤中的作用。因此,该文综述了PDIA3 在4 种消化系统肿瘤中的不同表达情况及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段或临床预后中的作用,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点。这对提高肿瘤患者的生存率具有十分重要的意义。

    • 宫颈上皮内瘤变小鼠模型构建的研究进展

      2023, 33(4):147-152.

      摘要 (324) HTML (0) PDF 854.43 K (1070) 评论 (0) 收藏

      摘要:现存关于宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的治疗多以手术为主,临床诊治方面缺乏特效治疗药物。手术虽能清除已转化病灶,但残端在病毒及其他因素的持续作用下仍具有病变风险,因此CIN 的预防与治疗研究仍需要合适的动物模型作为支撑。宫颈病变通常表现为一系列连续性过程,这种渐进性病变方式为构建动物模型带来一定困难。国内外关于CIN 动物模型的构建研究近年来逐渐增加,本文通过论述CIN小鼠模型的研制方法及优缺点,以期为构建更为适合的动物模型提供思路,以及对宫颈上皮内瘤变的远期防治策略及用药研究提供助力。

    • 大鼠皮瓣模型的种类及其皮瓣成活的策略

      2023, 33(4):153-158.

      摘要 (400) HTML (0) PDF 857.67 K (1380) 评论 (0) 收藏

      摘要:皮瓣手术是通过手术的方式将皮肤和皮下组织,包括深部的肌肉来切取完以后,形成覆盖缺损去创面的一种手术方式,其广泛运用于各种各样皮肤缺失、骨质外露,且无法用传统的手术植皮方式来修复创面。但该手术在实施过程中存在寻找供应皮瓣血管寻找困难和移植后皮瓣的血运保护困难的情况。为了更加深入的了解皮瓣的血供情况以及探究如何提高皮瓣存活率,有大量的研究学者建立了大批的皮瓣大鼠模型并给予不同的治疗方案,旨在增加临床上移植皮瓣的存活率。如今,许多各种不同部位、功能的皮瓣大鼠模型均被建立,并且给予了不同的治疗方案,通过动物实验,改善和扩充了皮瓣手术的的操作方式,降低了皮瓣的坏死率,同时研究出了一些新的治疗方案,为未来皮瓣手术的发展奠定了理论基础。本文目的及意义是对现有大鼠皮瓣模型的种类及其皮瓣成活的策略,未来的技术创新做一综述并为后续大鼠皮瓣模型的研究提供相应依据。

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