摘要: 目的　本研究建立Caco-2 单层细胞模型研究野鸦椿酸摄取和转运特性。 方法　采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(UPLC-TQ-MS)测定野鸦椿酸的含量,考察不同时间、温度对其摄取的影响,在此基础上考察不同浓度、P-gp 抑制剂、螯合剂和pH 对其双向转运的影响。 结果　在37℃条件下,野鸦椿酸在Caco-2 细胞模型上180 min 时的摄取量为(8. 38±0. 87)μg/ mg。野鸦椿酸低、中、高浓度的表观渗透系数(Papp 值)与浓度呈正相关,分别为(61. 41±2. 92)×10-4、(146. 90±14. 91)×10-4、(167. 18±6. 72)×10-4 cm/ s,P-gp 抑制剂和螯合剂对其Papp 值无影响,弱酸性环境(pH=6. 00)可明显提高其Papp 值,其外排率(ER)介于0. 8~1. 4 之间。 结论　在Caco-2细胞模型中野鸦椿酸跨膜渗透性良好,其主要吸收方式为被动扩散,不是P-gp 的底物,且不存在细胞旁路转运。本研究可为含有野鸦椿酸的药物的体内肠道吸收提供实验依据。

摘要: 目的　对盐酸川芎嗪与丹参配伍前后在急性心肌缺血(acute myocardial ischemia,AMI)模型大鼠体内的组织分布差异进行探讨。 方法　大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素溶液复制AMI 模型,分为川芎嗪组(ligustrazine,LG)、丹参组(Danshen,DS)和川芎嗪-丹参组(ligustrazine-Danshen,LD),采用UPLC-MS/ MS方法测定不同时间点下川芎嗪和丹参素2 种活性成分在心脏、肝、脾、肺、肾、脑组织中的含量差异。 结果　注射后川芎嗪和丹参素在AMI 大鼠各组织中分布广泛且迅速达峰;配伍前后,各组川芎嗪在脑组织中含量最高,在肝组织中含量最低;丹参素在肾组织中含量最高,在脑组织中含量最低,表明川芎嗪较丹参素更易透过血脑屏障,且主要蓄积组织有所差异;而配伍用药显著增加了川芎嗪和丹参素在靶器官心脏中的AUC(P<0. 001)。 结论　推测川芎嗪与丹参配伍可能是通过增加主要药效成分在心脏中的分布增强治疗作用,进而能更好地发挥药效。

摘要: 目的　探索腹泻型肠易激综合征 (diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D) 大鼠模型的肠道菌群-短链脂肪酸代谢轴变化特点,以及探讨丁酸钠对该轴的影响。 方法　将17 只Wistar 大鼠随机分为3组,采用4%醋酸灌肠联合束缚应激诱导IBS-D 大鼠模型,造模期间予以丁酸钠腹腔注射,采用16S rRNA 技术检测大鼠粪便菌群,液相色谱-质谱联用检测大鼠粪便短链脂肪酸含量。 结果　与正常组比较,模型组体重下降,腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分、粪便含水率明显升高,肠道益生菌相对丰度下降,布劳特氏菌属(Blautia)相对丰度明显升高,粪便乙酸含量显著增加,丁酸、戊酸含量明显下降;与模型组比较,丁酸钠组大鼠体重增加,AWR 评分、粪便含水率明显降低,布劳特氏菌属(Blautia)相对丰度显著下降,而粪便丁酸、戊酸含量显著升高。 结论　丁酸钠可通过改善肠道菌群-短链脂肪酸代谢轴失调缓解IBS-D 大鼠腹泻及结肠内脏高敏。

摘要: 目的　评价针刺干预高血压动物实验研究的偏倚风险与报告质量,分析实验设计、实施与报告中存在的不足,以减少动物实验偏倚风险和提高报告质量。 方法　计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Web of science、PubMed、Embase、The Cochrane Library 等数据库,限制时间为建库至2022 年10 月8 日,由两名研究员根据合格标准独立筛选针刺干预高血压动物的相关实验研究,并使用SYRCLE 工具与ARRIVE 指南2. 0 对纳入文献进行偏倚风险与报告质量评价。运用Excel 2019 提取数据,根据结果进行描述性分析。 结果　共纳入79 篇针刺干预高血压的动物实验文献,其中有17 篇文献与21 篇文献分别发表在中文核心/ 中国科学引文数据库收录期刊和SCI 期刊上。SYRCLE 评价工具显示,10 个条目中有5 个条目评估良好,其他条目均存在描述不充分或偏倚风险高的问题。在纳入的79 篇文献中,19 篇文献的偏倚风险较低,其余研究均存在一定的偏倚风险。ARRIVE 指南2. 0 评价结果显示,38 个亚条目中,有19 个条目报告良好,而其他条目报告情况均较差。51 篇文献的报告质量良好,其余研究报告不充分。 结论　目前,针刺干预高血压动物实验的偏倚风险较高,报告质量普遍偏低。由于多数重要条目描述不充分,导致实验可重复性和结果转化均受到影响。建议在实验设计和报告过程中参考SYRCLE 工具与ARRIVE 指南2. 0,以提高针刺干预高血压动物实验的规范性与整体质量。

摘要: 目的　观察补肾健脾开心方对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)大鼠学习记忆能力、认知功能及脑皮质区自噬及凋亡的影响,探讨其作用机制。 方法　60 只SD 大鼠随机分为空白组、模型组、补肾组(3. 6 g/(kg·d))、健脾组(4. 05 g/ (kg·d))、开心组(2. 34 g/ (kg·d))、补肾健脾开心组(9. 99 g/ (kg·d)),每组10 只。采用D-gal 注射制备AD 大鼠模型,补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组分别以相应药物灌胃,空白组、模型组给予等量生理盐水,每日1 次。给药4 周后,Morris 水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,旷场实验检测大鼠认知功能,Western blot 检测脑皮质组织LC3-I、LC3-II、Beclin1 的表达,免疫组化法检测脑皮质组织Bax、Bcl-2 的表达,RTPCR检测脑皮质组织Beclin1、P62、Bax、Bcl-2 基因水平的表达。 结果　与空白组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力、认知功能明显下降(P<0. 01),Beclin1、LC3-I/ LC3-II 比值显著下调(P<0. 01),P62、Bax 增多(P<0. 01),Bcl-2 及Bcl-2/ Bax 比值明显降低(P<0. 01);经补肾健脾开心方治疗后,与模型组比较,补肾健脾开心组大鼠空间学习记忆能力、认知功能改善(P<0. 01),Beclin1、LC3-I/ LC3-II 比值显著上调(P<0. 01),P62、Bax 减少(P<0. 01),Bcl-2 及Bcl-2/ Bax 比值明显升高(P<0. 01)。 结论　补肾健脾开心方可以改善AD 大鼠认知障碍,其作用机制可能与调控自噬及凋亡有关。

摘要: 目的　研究PI3K/ Akt/ mTOR 信号通路在TRALI 发病机制中的作用。 方法　构建输血相关急性肺损伤大鼠模型,采用的方法为创伤后失血,再大量输血,通过HE 染色确定肺组织病理学改变。ELISA 和RT-qPCR检测TRALI 大鼠外周血/ 肺组织中TNF-α、IL-6 和IL-1β 蛋白和mRNA 表达水平;Western blot 检测PI3K/ Akt/ mTOR信号通路活化及凋亡蛋白Bax、Bcl-2 和Caspase3 的表达水平。 结果　TRALI 大鼠肺泡组织结构严重受损,炎细胞浸润,水肿明显;TNF-α、IL-6 和IL-1β 表达水平明显增加(P<0. 05);PI3K/ Akt/ mTOR 信号通路被活化,p-mTOR/mTOR 表达明显增加,并抑制了凋亡蛋白Bax 和Caspase3 的表达,增加了抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达(P<0. 05)。 结论mTOR 作为一个有潜力的药物靶点,由于其作用机制的复杂性,界定其发挥保护和损伤作用的确切时间靶点,选择最佳用药时间是临床防控TRALI 发生发展的重要手段。

摘要: 目的　探讨花旗松素(TAX)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚的影响及分子机制。 方法　24只SHR 分为SHR 对照组(SHR 组)、TAX 组(20 mg/ kg)、TAX+PERK 激活剂CCT020312(CCT)组(20 mg/ kg TAX+2 mg/ kg CCT),每组8 只;另选8 只正常血压Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为正常对照组(WKY 组),给予相应的药物持续干预8 周。实验过程中观察大鼠血压变化,并于干预结束后超声心动图检测大鼠舒张期室间隔厚度(IVSd)、收缩期室间隔厚度(IVSs)、左心室射血分数(LVEF)判断心肌肥厚程度和心脏功能,计算心脏指数、左心室指数,苏木精-伊红(HE)染色、小麦胚芽凝集素(WGA)染色和Masson 染色评估心肌组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、B 型利钠肽(BNP)、I 型胶原蛋白α1 链(COL1A1)和Ⅲ型胶原蛋白α1 链(COL3A1)mRNA 表达,Western blot 检测心肌组织蛋白激酶R 样内质网激酶(PERK) -转录激活因子4(ATF4)通路相关蛋白表达。 结果　干预结束后,与WKY 组相比,SHR 组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、IVSd、IVSs、心脏指数、左心室指数、心肌细胞横截面积、胶原容积分数(CVF)、心肌组织ANP、BNP、COL1A1 和COL3A1 mRNA 表达、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ATF4、C/ EBP 同源蛋白(CHOP)蛋白水平和p-PERK/ PERK 比值升高(均P<0. 05),LVEF 降低(P<0. 05);与SHR 组相比,TAX 组SBP、DBP、IVSd、IVSs、心脏指数、左心室指数、心肌细胞横截面积、CVF、心肌组织ANP、BNP、COL1A1 和COL3A1 mRNA 表达、GRP78、ATF4、CHOP 蛋白水平和p-PERK/ PERK 比值降低(均P<0. 05),LVEF 升高(P<0. 05);CCT020312 可部分逆转TAX 对心脏功能和心肌肥厚的保护作用。 结论　TAX 可通过抑制内质网应激(ERS),改善高血压心肌肥厚,其作用机制可能与抑制PERK-ATF4 通路有关。

摘要:针对目前国内科研用实验动物福利伦理审查中存在的问题以及教学用实验动物福利伦理审查的缺失,查阅了国内外相关文献以及行政法规、国家标准、行业标准、地方标准和团体标准,梳理了近三十年来我国实验动物福利伦理审查工作的发展历程,分析归纳了实验动物福利伦理审查及监督管理多年实际工作中发现的诸多问题,总结了科研及教学活动中实验动物福利伦理审查应该涉及的内容,希望能为涉及到动物实验的科研项目顺利通过福利伦理审查提供参考,为我国教学用实验动物福利伦理审查的建设以及医学院校实验动物福利课程内容安排提供参考。

摘要:重度哮喘(severe asthma,SA)患者需要大剂量激素,在联合其他药物治疗才能够维持症状控制,或即使采用上述治疗仍不可控,是目前哮喘研究的难点和热点之一。建立一种稳定可复制、高度模拟SA 临床病理特征的实验动物模型,对于深入研究SA 的发病机制、药物治疗和预防具有重要意义。本文通过回顾与整理国内外近十年来SA 动物模型相关的实验研究,从动物选择、模型制备方法、模型病理表型等方面总结和分析SA 动物模型构建的最新进展,为基于动物模型开展的SA 基础研究提供参考依据。

摘要:肺动脉高压是一种慢性进行性疾病,若不及时治疗,最终可导致右心衰竭甚至死亡。为了探讨肺动脉高压的发病机制,寻找有效的治疗方法,必需建立与发病机制相对应的实验模型。本文利用Pubmed、ScienceDirect、Wiley 和CNKI 检索相关文献,系统地总结了近年来肺动脉高压实验模型的制备方法和研究进展,并对这些实验模型涉及的病理特征进行分类和探讨,以期为肺动脉高压的发病机制研究提供参考。

摘要:经前烦躁症(premenstrual dysphoric disorder,PMDD)是经前期综合征的一种亚型,该病症在育龄女性中具有高患病率,病症包含乳房胀痛、头痛等身体症状以及严重的焦虑、抑郁、易怒等情绪症状。目前PMDD 已危及全球女性患者的生命健康,在第五版国际精神障碍诊断与统计手册(the Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorder, Fifth edition ed. DSM-5)中将PMDD 判定为抑郁症五种类型之一。目前PMDD 的病理机制研究主要集中于激素及受体表达方面,这也是目前动物模型构建的理论基础。而动物模型是联系基础研究与临床研究非常重要的一环,造就能够模拟临床症状的动物模型对于疾病发病机制的探索以及对症药物的研发都至关重要。目前,多种PMDD 动物模型虽已被用于实验研究,但仍存在许多局限性,这在一定程度上阻碍了PMDD 深层机制的研究。为此本文旨在通过梳理目前已知PMDD 的发病机制,探讨现有用于研究的PMDD 动物模型,以期为PMDD 相关机制研究及药物研发提供参考。

摘要:咳嗽为临床上常见症状,近年胸部影像无明显异常的慢性咳嗽发病率升高,其病因复杂,误诊误治率高,受到重视。目前研究认为咳嗽高敏感性是其重要的临床与病理生理学特征,与瞬时受体电位通路激活、气道炎症、神经通路及咳嗽中枢的易化等相关,然而其机制复杂,仍需深入研究。咳嗽机制的研究对于新药物的开发、临床疗效的提高、社会经济负担减轻等方面有着重要意义。而咳嗽动物模型对于咳嗽实验研究开展以及其机制阐明具有至关重要的作用,目前咳嗽动物模型分为单纯咳嗽模型和疾病咳嗽模型,但因为咳嗽发病机制复杂,病因较多,尚无统一的咳嗽模型制备标准,且仍处于不断的补充与完善之中。针对咳嗽动物模型建立的机制方法和研究进展,通过查阅和整理近年来国内外的相关文献,从模型动物的选择、单纯及疾病咳嗽动物模型的建立和应用等方面综合概述该类模型的研究现状,并进行比较评价,对当前咳嗽模型制备中的问题进行了思考与阐述,以期为实验研究中制备咳嗽动物模型、深入研究咳嗽的发病机制、治疗方法等提供参考。

摘要:角膜炎是眼科常见疾病,且具有较高的致盲率。本文查阅大量角膜炎动物模型的相关文献,总结和分析目前已有的角膜炎动物模型的机制,并结合已制定的中西医临床诊断标准,对模型进行中西医临床吻合度的评价,并对其优点和不足进行分析,并提出一些建议。发现现存模型大多是以西医理论为基础的造模方法,缺少中医诊断标准;模型多以单个因素造模,不能很好地模拟出疾病真实的病变过程;模型的诊断缺少表观指标;建议对动物采用病证结合的方式进行造模。制备具有较高临床吻合度的角膜炎动物模型,并建立完善的评价标准是非常重要的,在现代医学实验中能帮助我们更好地认识角膜炎的发生发展规律,并对其进行有效预防及治疗。

摘要:铁死亡是近年来提出的一种新型细胞程序性坏死方式,在各种疾病中均有所发现,严重影响着人们的身体健康。大量研究表明抑制或促进铁死亡能够改善许多衰老及衰老相关疾病,中医药在其中扮演了重要的角色。本文综述了铁死亡对衰老及衰老相关疾病的影响及作用机制,梳理了近年来中医药在治疗铁死亡介导的衰老及衰老相关疾病中的研究进展,旨在为衰老及衰老相关疾病的治疗和预防提供更多的选择。

摘要:多发性硬化(Multiple sclerosis, MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征。双环己酮草酰二腙(Cuprizone, CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ 可诱导小鼠中枢神经系统产生脱髓鞘病变,引起少突胶质细胞凋亡、少突胶质细胞祖细胞增殖、星形胶质细胞和小胶质细胞激活等病理变化,停止饲喂CPZ 后,小鼠的中枢神经系统会逐步发生髓鞘再生现象,因此是研究MS 脱髓鞘和髓鞘再生的常用模型。本文从CPZ 小鼠模型构建、少突胶质细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞以及髓鞘再生等不同方面进行了总结,并对采用CPZ 模型的特色疗法进行了概括,从而为CPZ 模型在科研与医学实践中的广泛应用提供了详细的理论依据。

摘要:炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种全球性的特发性疾病,病变部位累及回肠、直肠、结肠。IBD 在临床早期就开始出现症状,包括腹部不适、腹泻、便血、发热、乏力和体重减轻。IBD 的诊断是通过相关的临床表现、内窥镜检查结果和病变组织标本的组织病理学特征进行综合评价。生物制剂、口服皮质类固醇、水杨酸盐和手术是IBD 的主要常规治疗方法。近年来在阐明IBD 的发病机理方面取得了相当大的进展,在临床实践中认为是遗传易感性、环境因素和肠道黏膜屏障之间的复杂相互作用,从而导致异常的氧化应激、自噬及黏膜免疫反应。本文对遗传与环境因素、肠黏膜屏障功能、氧化应激、自噬功能异常和适应性免疫反应各方面研究进展进行简要归纳和阐述,为进一步研发治疗手段及改善临床治疗效果提供依据。

摘要:关节软骨缺乏血管、淋巴和神经,自身修复能力有限,故软骨损伤一般无法自行痊愈,常见的治疗方法分别为姑息治疗、修复治疗以及再生治疗。干细胞治疗为关节软骨损伤恢复提供了一种具有前景的治疗策略。而骨髓间充质干细胞作为传统的干细胞,具有独特的生物学特点,广泛应用于软骨修复治疗进程中。本文拟综合国内外最新文献报道,就近年来对骨髓间充质干细胞提取方法、表型鉴定、多向分化能力及其在关节软骨损伤修复中的应用进行阐述,以期为实现利用骨髓间充质干细胞精准、高效的治疗软骨损伤提供参考。