摘要: 目的 研究远隔缺血预适应(RIPC) 是否通过血浆外泌体降低神经细胞 DNA 甲基转移酶(DNMTs)水平,从而发挥低氧缺血神经保护作用。 方法 C57BL / 6J 小鼠 RIPC 同时尾静脉注射外泌体抑制剂 GW4869,1 h 后进行大脑中动脉闭塞(MCAO),并将小鼠随机分为 4 组,Bederson 评分及转角实验评估神经功能损伤程度;采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot) 检测小鼠大脑皮层中DNMTs 及神经损伤相关基因的表达水平。 分离小鼠 RIPC 前后的血浆外泌体,与小鼠海马神经细胞 HT22 共培养后进行氧糖剥夺(OGD)处理,通过 CCK8 检测细胞活力;免疫荧光观察细胞形态及抗凋亡蛋白 Bcl-2 的荧光强度;检测细胞中 DNMTs 及相关凋亡基因 ( Caspase3、 BAX、 Bcl-2) 的 mRNA 和蛋白表达水平。 结果Bederson 评分及转角实验<结果显示,RIPC 干预可显著改善小鼠 MCAO 后的神经功能缺损,且其神经保护作用在给予 GW4869 后明显减弱(P<0. 05)。 RIPC 处理可下调 MCAO 小鼠大脑皮层中 DNMTs、Caspase3 和 BAX的表达(P<0. 05),上调 Bcl-2 的表达。 体外实验结果显示,RIPC 后血浆外泌体可降低 OGD 条件下 HT22 细胞中 DNMTs 的表达,增强 Bcl-2 的荧光强度并改善细胞形态,同时下调 Caspase3 和 BAX 的表达,提升细胞活力(P<0. 05)。 结论 RIPC 可能通过血浆外泌体途径下调神经细胞 DNMTs 表达,并抑制 Caspase3、BAX 的表达,使 Bcl-2 表达增加,抑制神经元凋亡,增强神经细胞对低氧缺血环境的耐受性,从而发挥神经保护作用。

摘要: 目的 探讨梓醇-芍药苷(CTP-PNF)对围绝经期抑郁症(PMD)的改善作用及其机制,明确其是否通过抑制 miR-124 促进神经干细胞增殖与迁移而发挥治疗效应。 方法 通过建立人源性 PMD 小鼠模型,结合脑定位微注射 miR-124 抑制剂及体外神经干细胞实验通过蔗糖偏好实验(SPT)、悬尾实验(TST)和新环境抑食实验(NSFT)评估抑郁样行为;采用 RT-qPCR 检测小鼠前额叶皮层组织中 miR-124 的相对表达量;ELISA 检测神经递质(NE、DA、5-HT、GABA)水平;尼氏染色观察神经元病理变化;采用 MTT 和 Transwell 实验检测神经干细胞活力及迁移能力;利用网络药理学综合分析 miR-124 介导的 CTP-PNF 干预 PMD 的核心靶点及通路。 结果 与模型组相比,CTP-PNF 可显著改善 PMD 小鼠抑郁样行为,下调前额叶皮层组织中 miR-124的相对表达量(P<0. 001)。 抑制 miR-124 表达可减少抑郁样行为、增加神经递质含量(P<0. 05),改善前额叶皮质和海马的病理状态,并协同 CTP-PNF 含药血清增强神经干细胞的活力与迁移能力,促进神经干细胞修复。 网络药理综合生物信息学分析表明 miR-124 介导的 CTP-PNF 治疗 PMD 主要涉及 56 个核心治疗靶标,其关键通路包括与 MAPK1、STAT3、TP53 和 VEGFA 等相关的“HIF-1 信号通路”“5-HT 信号通路”和“cAMP 信号通路”等。 结论 CTP 可通过下调 miR-124 显著改善 PMD 小鼠的抑郁样行为、调节神经递质水平并减轻神经病理损伤,其作用可能与促进神经干细胞的增殖及迁移相关,且涉及 HIF-1、5-HT 等多条信号通路,为 PMD 的治疗提供了新的中药干预策略及分子靶点。

摘要: 目的 探讨山楂总黄酮通过 HIF-1 信号通路对大鼠心肌缺血再灌注(I/ R)损伤的保护作用及其机制。 方法 采用大鼠离体心脏 I/ R 模型,分为假手术( Sham)组、I/ R 组、山楂低剂量(HTF-L)组、山楂高剂量(HTF-H)组及山楂高剂量+PI3K 抑制剂(HTF-H+LY)组。 检测各组再灌注 60 min 后心功能指标(LVSP、LVEDP、±dp / dt_max)、心肌细胞凋亡(TUNEL)、氧化应激指标( SOD、MDA) 及相关信号通路蛋白(HIF-1α、PI3K/ Akt、MAPK)表达。 结果 与 Sham 组相比,I/ R 组心功能显著下降(LVSP、±dp / dt_max 均 P<0. 01)、凋亡率及氧化应激水平升高(均 P<0. 01)。 HTF 组心功能显著改善(P<0. 05 或 P<0. 01),凋亡及氧化应激均明显抑制(P<0. 05 或 P<0. 01),且呈剂量依赖性。 Western blot 显示,HTF 组 HIF-1α 及上游 PI3K/ Akt / MAPK 信号通路蛋白表达明显上调(P<0. 05 或 P<0. 01)。 PI3K 抑制剂可部分逆转山楂总黄酮的保护作用(P<0. 05)。 结论 山楂总黄酮可通过激活 HIF-1 信号通路,减轻 I/ R 所致的心肌损伤,其机制与抑制心肌细胞凋亡和氧化应激有关,为山楂药食同源在心血管疾病防治中的应用及其分子机制研究提供了实验依据。

摘要: 目的 探讨栀子苷调控单磷酸腺苷活化蛋白激酶( AMPK) / 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) / Unc-51 样激酶 1(ULK1)通路对肺癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响。 方法 A549 细胞分为肺癌组、栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组、AMPK 激活剂(MK8722)组、栀子苷高剂量+AMPK 抑制剂(Compound C)组,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色、CCK-8 法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;透射电镜观察 A549 细胞中自噬小体数;RT-qPCR 检测 A549 细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、p53、p62、Bcl-2 同源结构域蛋白(Beclin1) mRNA 表达;Western blot 检测 A549 细胞微管相关蛋白 1 轻链 3( LC3)、pAMPK、p-mTOR、p-ULK1 蛋白。 结果 与肺癌组比较,栀子苷低、中、高剂量组 A549 细胞 EdU 阳性率、OD₄₅₀值、PCNA、p62 mRNA 及 p-mTOR 蛋白降低,细胞凋亡率、自噬小体数、p53、Beclin1 mRNA 及 LC3-II/ LC3-I、pAMPK、p-ULK1 蛋白升高,且栀子苷高剂量组趋势最明显(P<0. 05);与肺癌组比较,MK8722 组 A549 细胞EdU 阳性率、OD₄₅₀ 值、PCNA、p62 mRNA 及 p-mTOR 蛋白降低,细胞凋亡率、自噬小体数、p53、Beclin1 mRNA及 LC3-II/ LC3-I、p-AMPK、p-ULK1 蛋白升高(P<0. 05);与栀子苷高剂量组比较,栀子苷高剂量+Compound C组 A549 细胞 EdU 阳性率、OD₄₅₀ 值、PCNA、p62 mRNA 及 p-mTOR 蛋白升高(P<0. 05),细胞凋亡率、自噬小体数、p53、Beclin1 mRNA 及 LC3-II/ LC3-I、p-AMPK、p-ULK1 蛋白降低(P<0. 05)。 结论 栀子苷可能通过激活AMPK/ mTOR/ ULK1 通路抑制 A549 细胞增殖,促进细胞自噬和凋亡。

摘要: 目的 研究 3 种经典蒙药当贡-3(DG-3)、赞丹-3(ZD-3)、匝迪-5(ZD-5)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)小鼠的保护作用,比较 3 种蒙药对 MIRI 的作用效果。 方法 采用 7 周龄雄性 C57BL / 6 小鼠,随机分为 6 组:假手术(Sham)组、模型(Model)组、复方丹参滴丸(CDDP)阳性对照组、当贡-3(DG-3)组、赞丹-3(ZD-3)组及匝迪-5(ZD-5)组,造模前 14 d 灌胃给药。 采用可逆性冠状动脉左前降支结扎(LAD)法造模,持续监测小鼠心电图 ST 段情况,各组小鼠缺血 20 min,于再灌注 24 h 或 7 d 后处死。 监测小鼠心电图 ST 段判断 MIRI 造模与恢复情况;TTC 染色观察心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色与马松(Masson)染色观察小鼠心脏缺血区域的病理炎症变化;TUNEL 细胞凋亡染色判断组织细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的小鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)因子水平;活性检测试剂盒检测血清中的乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;体外细胞实验,通过细胞增殖和细胞毒性(CCK-8)检测 3 种蒙药对经氧糖剥夺/ 再灌注(OGD/ R)处理后的人心肌细胞(AC16)细胞活力的影响。 结果 心电图检测发现,再灌注期平均心率高于缺血期,出现 MIRI;与模型组相比,ZD-3、DG-3、ZD-5 组的 TTC 染色结果显示小鼠心肌梗死面积减少(P<0. 05);HE 和 Masson 染色结果表明,给予蒙药后不同程度的减少炎症细胞的募集、减轻心肌组织纤维化程度(P<0. 05);TUNEL 细胞凋亡检测结果表明 ZD-3 组的凋亡显著减少(P<0. 001);ZD-3 组血清中 CK-MB 水平显著降低(P<0. 01);此外,检测 MIRI 后 24 h 与 7 d 的心肌酶谱 LDH 与氧化应激指标 SOD、MDA,表明在造模前、后给予 ZD-3、DG-3、ZD-5 均可降低 LDH 活性(P<0. 05),ZD-3 与 DG-3 组可减少氧化应激因子的产生(P<0. 01);最后,体外实验检测细胞活性,ZD-3 与 ZD-5 组可提高 AC16 细胞 OGD/ R 后细胞存活率(P<0. 05)。 结论 蒙药 DG-3、ZD-3 和 ZD-5 对小鼠 MIRI 均具有保护作用,其中 ZD-3 的心脏保护作用较好,其机制与减少炎症细胞浸润及减轻心脏组织纤维化程度密切相关。 本实验条件下,初步认为 ZD-3 是可以有效抑制 MIRI 的治心蒙药。

摘要: 目的 梳理国内外急性肾损伤(AKI)动物模型的造模特点,为该疾病动物模型制作的规范化、标准化提供借鉴。 方法 检索和整理知网、万方、维普、SinoMed、PubMed 中英文数据库建库以来收录的 AKI动物模型相关文献,对其动物品系、造模方法、造模周期、成模标准、阳性药物、检测指标等内容进行数据统计与分析。 结果 纳入 266 篇文献(中文 220 篇,英文 46 篇);动物品系以雄性大鼠、8 ~ 10 周龄、180 ~ 250 g 为主;造模方式 22 种,以缺血再灌注及肌肉注射甘油的单因素造模为主;造模周期多集中在 14 d 以内,其中记录 6~24 h 的文献最多;成模标准尚未完全统一,但大部分文献以 SCr、BUN 和肾脏病理改变进行判断;阳性药物主要为卡托普利和人参皂苷;检测指标主要为肾功能评估、组织病理学评估和实验动物观察等综合性评价。 结论 目前依旧缺少标准化程度好与临床吻合度高的 AKI 动物模型制备及成模判定标准,多层次、多角度检测指标的综合运用有待提高,建立中医病证结合模型仍然具有较大研究空间。

摘要: 目的 探讨微小 RNA-101-3p(miR-101-3p)对妊娠期高血压(HDP)大鼠血管内皮生长因子 A(VEGFA) / 磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K) / 丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路、炎症反应和妊娠结局的影响。 方法 RT-qPCR 法检测 2024 年 3 月~2024 年 10 月在本院进行规律产检的正常孕妇(对照组)和 HDP 孕妇(HDP 组)各 60 例的血清样本中 miR-101-3p、VEGFA、PI3K、AKT 的表达;构建 HDP 大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为 HDP 组、NC antagomir 组(尾静脉注射 NC antagomir)、miR-101-3p antagomir 组(尾静脉注射 miR-101-3p antagomir)。 另选择 10 只正常怀孕大鼠为对照组,对照组和 HDP 组分别注射等量生理盐水。 检测各组大鼠血压、24 h 尿蛋白、妊娠结局;RT-qPCR 检测 HDP 大鼠胎盘组织中 miR-101-3p、VEGFA、PI3K、AKT 表达;ELISA 试剂盒检测血清中炎症因子和血管损伤因子的表达;Western blot 检测胎盘组织中 VEGFA、PI3K、AKT 蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证 miR-101-3p 与 VEGFA 之间的互作。 结果 HDP 组 miR-101-3p高表达,VEGFA、PI3K、AKT 低表达(P<0. 05)。 对照组胎盘组织形态和结构正常;HDP 组和 NC antagomir 组胎盘组织结构模糊,可见大量炎症细胞浸润;miR-101-3p antagomir 组孕鼠胎盘组织损伤减轻,炎症细胞浸润减少。 HDP 组血压、24 h 尿蛋白、miR-101-3p、IL-1β、IL-6、TNF-α、sICAM-1、ET-1 高于对照组,胚胎存活率、NO、VEGFA mRNA 和蛋白、PI3K mRNA 和蛋白、AKT mRNA 和蛋白低于对照组(P<0. 05);miR-101-3p antagomir 组血压、24 h 尿蛋白、miR-101-3p、IL-1β、IL-6、TNF-α、sICAM-1、ET-1 低于 HDP 组和 NC antagomir 组,胚胎存活率、NO、VEGFA mRNA 和蛋白、PI3K mRNA 和蛋白、AKT mRNA 和蛋白高于 HDP 组和 NC antagomir 组(P<0. 05)。 miR-101-3p 可以靶向负调控 VEGFA。 结论 抑制 miR-101-3p 可以激活 VEGFA/ PI3K/ AKT 通路,抑制炎症反应和血管损伤,改善妊娠结局。

摘要: 目的 基于文献数据挖掘总结与分析克罗恩病(CD)动物模型的现状,为 CD 动物模型制备方法与评价指标的优化提供思路。 方法 通过检索中国知网、万方及 PubMed 数据库中与 CD 动物模型相关的文献,提取其中的动物种类、造模方法、检测指标、阳性干预方式等信息,使用 Excel 软件建立数据库并进行统计。 结果 共纳入符合标准的中英文文献 411 篇,建立 CD 动物模型多以 6 ~ 8 周龄的 SD 大鼠、C57BL / 6J 小鼠、BALB/ c 小鼠为主,性别以雄性居多;造模方法包括化学诱导( TNBS 为主)、基因工程( IL-10^{- / -}小鼠、TNF^△ARE 小鼠为主)、自发性、免疫介导、微生物定植和复合法 6 类;检测指标主要包括一般表型、病理改变、炎症水平、肠道通透性、肠道纤维化、免疫学变化、肠道菌群与代谢产物改变及信号通路;阳性干预措施中,西医以生物制剂为主,中医药以针灸及中药复方为主。 模型广泛应用于药物作用评价、机理解析及新模型研发三个方面。 结论 现有 CD 动物模型制备方式众多,能各自从多种维度模拟 CD 的特点,但模型构建主要依赖西医致病因素,缺乏对中医证候的系统整合。 模型评价指标多集中于西医病理与分子层面,动物表观特征(如毛发、精神状态、粪便性状)的中医辨证参数尚未形成标准化量化体系,导致“病证结合”模型严重不足。 未来研究可聚焦于完善标准化建模流程、构建整合中西医病证特征、覆盖 CD 全病程的动物模型,以提升研究可靠性,加速发病机制的探究与创新疗法的研发。

摘要: 目的 探究肝郁证大鼠模型的造模与评价方法,为该模型的规范化发展提供参考依据。 方法通过计算机检索中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science 数据库中 2019 年 11 月 14 日至 2024 年 11 月14 日与肝郁证大鼠模型相关的实验类文献,依据设定的纳入和排除标准筛选文献,提取文献中发表时间、动物情况、涉及疾病、造模方法、造模时间、评价指标、干预方式等信息,运用 Excel 2021 和 IBM SPSS Modeler18. 0 软件进行数据整理、频次分析、关联规则分析,并以图表形式可视化展示。 结果 最终纳入 192 篇符合标准的文献。 肝郁证大鼠模型常用 SD 大鼠(76. 05%),雄性居多(62. 50%),多为 SPF 级(82. 82%);涉及疾病以消化系统疾病为主( 57. 90%);证型中肝郁脾虚证最为常见 ( 62. 68%),造模方法多采用多因素法(55. 96%),造模时间集中在 15 ~ 21 d。 同时得到了潜在宏观证候评价指标组合,干预方式以中药复方(86. 82%)为主。 结论 肝郁证大鼠模型应用广泛,但目前存在证型名称不规范、造模方法缺乏统一标准、评价体系不完善等问题。 本研究为肝郁证大鼠模型证型规范、模型优化及评价体系改进提供了思路和参考。

摘要: 目的 阐释益气活血利水方激活 AMPK/ PGC-1α 信号通路对心力衰竭大鼠线粒体形态和功能的影响。 方法 采用冠状动脉左前降支结扎术结合饥饿、力竭游泳制备心力衰竭模型,术后随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪组、益气活血利水方中、高剂量组,给药 4 周后通过超声心动图及 HE 和 Masson 染色进行评估,并检测 ROS 水平、线粒体功能及超微结构变化,通过 Western blot 对 AMPK/ PGC-1α 信号通路相关蛋白表达进行检测,应用 RT-PCR 对该通路 mRNA 表达及线粒体 DNA 的复制水平进行检测。 结果 益气活血利水方显著改善心功能指标(P<0. 05),减轻心肌纤维化,降低 ROS 水平(P<0. 01),提高线粒体呼吸链酶活性和膜电位(P<0. 01),增加 ATP 含量(P<0. 01)。 Western blot 和 RT-PCR 结果显示,该方提升 p-AMPK、PGC-1α、NRF-1、TFAM 蛋白及 mRNA 表达水平,并促进线粒体 DNA 复制(P<0. 01)。 结论 益气活血利水方能改善心力衰竭大鼠心功能及心肌纤维化,降低 ROS 水平,同时能稳定线粒体结构及功能,诱导线粒体生成,提升 ATP含量,其机制可能与激活 AMPK/ PGC-1α 信号通路有关。

摘要:为加强实验动物福利伦理监管,保障实验动物福利,建立一套科学准确的实验动物福利伦理全过程监管体系,确定监管指标 12 项,并根据指标特性,制定针对性的评价标准。 通过检查现场和使用小动物 Micro-CT、MRI 等专用设备对指标进行个性化监管。 该体系通过建立立项审查、过程监管与终结审查的动态监管联动机制,实施“线上+线下”相结合的监管程序,有效防范了违背科技伦理事件的发生,规范了实验动物福利伦理监管程序,能为实验动物生产和使用机构福利伦理的监管工作提供借鉴。

摘要:早发性卵巢功能不全(POI)是育龄女性卵巢功能早衰的临床综合征,以 40 岁前出现月经紊乱、生育力下降及围绝经期症状为主要特征。 近年研究发现,细胞外囊泡(EVs)作为天然的生物活性分子递送载体,能够有效转运核酸、蛋白质等功能性物质,在改善卵巢组织损伤、促进颗粒细胞增殖及抑制凋亡等方面展现出显著的治疗潜力。 尽管 EVs 在再生医学领域具有广阔的临床应用前景,但其在靶向递送效率、生物稳定性及规模化制备等方面仍面临技术瓶颈。 基于生物工程技术的创新性改造策略———包括膜表面功能化修饰、精准内容物负载及微环境预处理等———为突破现有技术壁垒提供了有效解决方案。 本文系统综述了EVs 的生物学特性及其在 POI 治疗中的作用机制,着重探讨工程化修饰策略在提升 EVs 治疗效能中的关键技术突破,并对其未来在生殖医学领域的转化应用前景进行展望。

摘要:甲基苯丙胺使用障碍(MUD)是一种全球范围内的难治性疾病,目前治疗手段有限。 研究发现神经肽可能是一个治疗 MUD 的新靶点,研究神经肽对 MUD 的调控作用机制可能会为 MUD 治疗提供新的选择。 但神经肽种类繁多、作用机理复杂,临床用药参考有限,因此,本综述重点关注食欲素(OX)、催产素(OT)、加压素(VP)、神经降压素(NT)、神经肽 S(NPS)、神经肽 Y(NPY)、生长抑素(SST)、垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)、血管活性肠肽(VIP)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)等神经肽在 MUD 中的调控作用及机制。以期为 MUD 的治疗选择提供新思考,推动其在 MUD 治疗中的应用。

摘要:抑郁症是以持续性情绪低落、兴趣缺失、食欲减退及睡眠障碍为核心特征的精神障碍性疾病。目前单胺类药物是治疗该疾病的主要药物,但该类药物临床应用有很大局限性。 中医药多途径、多环节、整体调节的作用使其成为一种极具潜力的治疗选择。 近年来,GR/ NF-κB/ NLRP3 信号通路调控在抑郁症发病及治疗中的作用逐渐得到关注。 研究表明,该信号通路主要与下丘脑-垂体-肾上腺轴、神经炎症抑制及神经细胞焦亡调控密切相关。 文章概述了中医药通过调节 GR/ NF-κB/ NLRP3 信号通路发挥抗抑郁作用的机制,以期为抑郁症的治疗和进一步研究提供理论依据。

摘要:干燥综合征(SS)是一种发病机制复杂的慢性自身免疫疾病,除腺体淋巴细胞浸润和炎症破坏外,常常累及多系统,但治疗手段局限。 研究发现线粒体质量控制障碍与自身免疫疾病的炎症息息相关,本文旨在研究线粒体质量控制障碍与 SS 腺体损害的相关性,以期为 SS 的治疗拓展视野

摘要:神经母细胞瘤(NB)是最常见的儿童颅外实体肿瘤,具有死亡率高和预后差等特点。 随着分子生物学和基因组学研究的深入,研究者们逐渐认识到 NB 的发生发展涉及复杂的分子网络调控异常。 为了开发更为安全且高效的精准诊治策略,深入剖析 NB 发病的分子机制就显得尤为重要。 为深化对该疾病的理解,本文系统地从肿瘤发展进程(异常增殖、迁移侵袭及 EMT 等)、炎症反应以及细胞凋亡 3 个维度,综述了部分关键调控因子及其研究进展。 本文重点探讨了 MYCN、ALK、BDNF 和 PHOX2B 等基因对 NB 细胞恶性生物学行为的调控机制,分析了 NF-κB、COX-2/ PGE2、MyD88 和 HMGB1 等炎症信号的促瘤作用,并阐述了 Bcl-2家族、p53-MDM2 轴以及 TRAIL 等凋亡相关因子的作用机制。 这些研究成果不仅深化了我们对 NB 分子病理机制的认识,更为重要的是揭示了多个具有转化潜力的治疗靶点,为 NB 的基础研究和临床治疗提供系统的理论参考,推动从分子机制到临床转化的研究进程,最终实现改善患儿预后的目标。