摘要: 目的　探讨环指蛋白130(ring finger protein 130,RNF130)对心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI)的影响及可能的机制。 方法　将C57BL/6J雄性小鼠分为4组(n=6):假手术(Sham)组、模型(MI/RI)组、心肌缺血-再灌注+空载体质粒(MI/RI+Vector)组、心肌缺血-再灌注+RNF130过表达(MI/RI+RNF130OE)组。心肌缺血-再灌注24 h后,通过心脏超声检测小鼠心功能,采用IHC、DHE和TUNEL染色观察各组心肌组织的病理变化、氧化损伤和细胞凋亡,Western blot、免疫荧光和免疫组化检测蛋白表达情况。蛋白质组学分析RNF130调控的下游蛋白,通过免疫沉淀(IP)实验检测蛋白互作。 结果　与给予Vector空载体质粒的模型组小鼠相比,小鼠心肌细胞RNF130过表达后,心脏功能显著改善,表现为左室射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)的数值增加,同时心肌梗死区域显著缩小,NOX-2与BAX蛋白的表达水平也观察到明显的下降(P<0.05)。DHE和TUNEL染色表明,RNF130过表达后,相比于MI/RI+Vector组的小鼠,其心肌细胞氧化损伤和细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。蛋白质组学分析与IP实验发现蛋白PARP1与RNF130有明显的蛋白互作。同时发现其与RNF130蛋白的表达变化相反。 结论　RNF130可能通过调控PARP1泛素化途径减轻MI/RI损伤,为靶向干预提供了新方向。

摘要: 目的　观察4种不同造模方法对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴、血液流变学、血小板聚集率和心肌缺血的影响,为建立更符合临床诊疗特点的冠心病合并抑郁症“双心”疾病大鼠模型提供造模方法。 方法　将69只雄性SD大鼠随机分为正常组、慢性不可预见性温和应激(CUMS)组、异丙肾上腺素(ISO)组、高脂饮食(HFD)组、复合模型(CUMS+ISO+HFD)组,正常组、HFD组各12只,其余3组各15只。正常组不予任何刺激;CUMS组采用慢性不可预见性温和应激造模;ISO组采用腹腔注射异丙肾上腺素造模;HFD组予高脂饲料喂养;CUMS+ISO+HFD组采用高脂饮食+注射异丙肾上腺素+慢性不可预见性温和应激方法造模。造模共8周,其中注射异丙肾上腺素从实验第6周开始,共3周。造模结束后对各组大鼠进行旷场、糖水偏好行为学测试;心电图检测观察各组大鼠心电图Ⅱ导联变化;酶联免疫吸附法检测大鼠血清中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质醇(cortisol,Cor)、皮质酮(corticosterone,CORT)、内皮素-1 (endothelin-1,ET-1)、可溶性细胞间黏附分子(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)含量;HE染色观察心肌组织病理变化;酶标仪检测大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量;全自动血液流变学分析仪检测大鼠血液流变学全血高切粘度(200 V/S)、低切粘度(10 I/S)与血浆粘度、纤维蛋白原;采用全血血小板聚集仪检测花生四烯酸(arachidonic acid,AA)和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板最大聚集率(platelet maximum aggregation rate,MAR)和平均聚集率(average aggregation rate,AAR)。 结果　与正常组相比,其余4组大鼠旷场运动距离和进入中央区域次数、糖水偏好率都显著降低(P<0.01);ISO组与CUMS+ISO+HFD组心电图出现ST段抬高,CUMS组心电图变化可见心动过速,HFD组可见轻度ST段抬高;其余4组大鼠血清ACTH、Cor、CORT、ET-1、sICAM-1含量均显著升高(P<0.01);HE染色显示ISO组与CUMS+ISO+HFD组大鼠心肌组织受损严重,可见心肌局部纤维化及炎症浸润等病理改变,CUMS组及HFD组可见轻度心肌细胞排列紊乱、断裂;HFD组、CUMS+ISO+HFD组血清中TC、LDL-C含量升高(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01);与正常组比较,CUMS组、HFD组、CUMS+ISO+ HFD组大鼠全血高切粘度(200 V/S)、全血低切粘度(10 I/S)、血浆粘度、纤维蛋白原均显著增高(P<0.01,P<0.05),ISO组大鼠全血高切粘度(200 V/S)、全血低切粘度(10 I/S)、血浆粘度、纤维蛋白原水平显著降低(P<0.01,P<0.05);CUMS组、HFD组、CUMS+ISO+HFD组大鼠MAR和AAR均显著增高(P<0.01),ISO组血小板聚集率显著降低(P<0.01,P<0.05)。 结论　此次实验研究结果表明CUMS+ISO+HFD组较其他3组大鼠动物模型更能体现临床双心疾病复杂性的特点,同时为建立冠心病合并抑郁症大鼠模型提供了造模方法。

摘要: 目的　本研究旨在探讨黄芪甲苷对糖尿病肾病中HIF-1α信号通路的调控作用及其潜在的治疗机制。 方法　通过注射链脲佐菌素建立糖尿病肾病小鼠模型,使用RT-qPCR和Western blot技术检测黄芪甲苷对Collagen I、α-SMA表达的影响。通过下载GEO数据库糖尿病肾病患者数据集差异基因富集分析,筛选激活通路。使用免疫组化和流式细胞术评估了黄芪甲苷在减轻肾纤维化、炎症反应及调节巨噬细胞极化方面的作用。此外,通过使用HIF-1α抑制剂LW6进一步验证HIF-1α信号通路在糖尿病肾病中的激活作用。 结果　研究结果表明,GEO数据库结果显示HIF-1α/NF-κB信号通路显示在糖尿病肾病患者中被激活。黄芪甲苷组显著抑制了糖尿病肾病小鼠模型中HIF-1α及其下游纤维化分子的表达,减轻了肾纤维化和炎症反应。黄芪甲苷还促进了M2型巨噬细胞的极化,同时抑制了M1型巨噬细胞的活化。通过HIF-1α抑制剂LW6的实验进一步确认了该信号通路在DN病理过程中的重要性。 结论　黄芪甲苷通过调节HIF-1α信号通路,显著减缓了糖尿病肾病中的纤维化和炎症反应,促进了巨噬细胞的有利极化。

摘要: 目的　探讨玛咖对中枢疲劳大鼠的改善作用及其可能机制。 方法　40只Sprague-Dawley(SD)大鼠按体质量随机分为空白对照组、模型对照组、玛咖低、中、高剂量(0.6、1.2、2.4 g/kg)组,除空白对照组外,其余各组采用冷水游泳、剥夺睡眠、束缚、夹尾等多种方式反复刺激大鼠制造中枢疲劳大鼠模型。玛咖连续灌胃35 d后,对大鼠进行Morris水迷宫实验、糖水偏好实验、悬尾实验等行为学测试和大鼠海马中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)等氧化应激指标检测,并以免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马腺苷酸激活的蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)信号通路蛋白表达水平。 结果　与模型对照组比较,玛咖低、中、高剂量组(0.6、1.2、2.4 g/kg)能够增加平台所在象限活动时间(P<0.05或P<0.01),但不存在剂量效应关系,中、高剂量组(1.2、2.4 g/kg)能够缩短中枢疲劳大鼠逃逸潜伏期(P<0.05)、增加站台穿越次数(P<0.05)、升高糖水偏好度(P<0.05),减少大鼠悬尾挣扎时间(P<0.05),同时能升高CAT活性(P<0.01)、增加SOD活性(P<0.05)、降低MDA含量(P<0.01);与模型对照组比较,玛咖低、中、高剂量组(0.6、1.2、2.4 g/kg)AMPK和核呼吸因子1 (NRF1)含量显著增加(P<0.01或P<0.05),但不存在剂量效应关系,中、高剂量组(1.2、2.4 g/kg)PGC-1α含量显著增加(P<0.05或P<0.01),高剂量组(2.4 g/kg)SIRT1和线粒体转录因子A(TFAM)含量显著增加(P<0.05或P<0.01)。 结论　玛咖可以改善中枢疲劳大鼠的行为学指标和氧化应激指标,其机制可能与调节AMPK/SIRT1/PGC-1α通路相关蛋白有关。

摘要: 目的　本研究旨在阐明鳖甲煎丸(Biejiajian pill,BJJP)含药血清对肝癌Huh7细胞恶性生物行为的作用及机制。 方法　通过趋化素样因子超家族6的siRNA敲降细胞中CMTM6表达。利用健康SD大鼠制备正常大鼠血清以及低(0.55 g/kg)、中(1.1 g/kg)、高(2.2 g/kg)浓度的BJJP含药血清,对数生长期的肝癌Huh7细胞分别给予正常胎牛血清(BC)、正常大鼠血清(NC)培养及低、中、高剂量的BJJP含药血清(LBJJP、MBJJP和HBJJP)培养。BJJP含药血清和si-CMTM6分别作用于肝癌Huh7后,通过CCK-8法评估细胞的增殖能力、Transwell检测细胞的迁移与侵袭能力,利用Western blot检测增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、上皮-间质转化(EMT)关键标志物及CMTM6的蛋白表达。 结果　敲降CMTM6后,与阴性对照组(si-NC)相比,敲降CMTM6组(si-CMTM6)能够降低Huh7细胞中CMTM6 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。与BC组相比,NC组Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭数量及PCNA、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和CMTM6蛋白表达水平均无明显差异(均P>0.05)。经BJJP含药血清处理后,Huh7细胞的增殖速率显著降低,迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);Western blot分析显示,与正常大鼠血清组相比BJJP含药血清处理组PCNA、CMTM6、N-cadherin及Vimentin蛋白表达量显著下调,而E-cadherin表达量显著上调(均P<0.05)。CMTM6敲降后,可有效抑制Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭能力,同时伴随PCNA、Vimentin、N-cadherin蛋白下调及E-cadherin蛋白上调(均P<0.05)。 结论　BJJP含药血清可显著抑制Huh7肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移及EMT进程,且呈剂量依赖性;该作用可能与下调CMTM6蛋白表达有关。

摘要: 目的　通过生物信息学、机器学习和细胞实验,探究肝窦内皮细胞(LSECs)经间充质转换(EnMT)调控肝纤维化的分子机制,并预测天然活性成分。 方法　获取肝纤维化(HF)与EnMT基因矩阵, Limma差异分析与WGCNA共表达网络分析后,提取交集基因,进行富集分析。结合随机森林、SVM-RFE和网络拓扑分析,筛选诊断基因,进行免疫浸润分析和天然活性成分预测,最后通过细胞实验对诊断基因的表达情况和预测成分的药理效果进行验证。 结果　差异分析得到EnMT相关差异基因3034个,HF相关差异基因4133个;WGCNA分析得到EnMT Hub基因4589个,HF Hub基因763个,提取到38个交集基因,主要富集于基底膜、ECM受体相互作用等机制上。多维度分析筛选出CFP、COL4A2、ITGA1和GRPEL1作为诊断基因。免疫浸润分析显示诊断基因与肥大细胞静息状态、记忆B细胞及记忆CD4⁺ T细胞间密切相关。RT-PCR结果表明,在Jagged1诱导的模型组中,4个诊断基因的mRNA表达均显著增加(P<0.05)。预测成分谷甾醇、山奈酚和槲皮素与诊断基因间均具有良好的结合活性。ELISA实验进一步证实,3种活性成分均能显著降低Jagged1诱导LSECs中COL4A2蛋白的表达,以槲皮素的作用最为显著 (P<0.01) 。 结论　本研究阐述了肝窦内皮细胞通过间充质转换参与肝纤维化病理进程的分子机制,提出以CFP、COL4A2、ITGA1和GRPEL1为核心的诊断标志物体系,发现槲皮素等天然活性成分能够通过靶向诊断基因,发挥抗肝纤维化的药理作用。

摘要: 目的　探究色氨酸羟化酶2(tryptophan hydroxylase 2,Tph2)基因敲除对雄性大鼠青春期社交玩耍行为及成年后攻击行为的影响,以期阐明中枢五羟色胺(5-hydroxytrypatamine,5-HT)合成缺陷对不同发育阶段社交行为的影响。 方法　以色氨酸羟化酶2敲除型(Tph2^KO)和野生型(wild type,WT)的雄性大鼠为研究对象,在大鼠4周龄后通过旷场实验对青春期运动及焦虑水平进行评估,在大鼠5周龄及6周龄通过青春期社交互动测试对青春期社交玩耍行为进行评估,在大鼠8周龄时通过旷场实验对成年后运动及焦虑水平进行评估,在大鼠10周龄及11周龄通过居住者-入侵者测试对成年后攻击行为进行评估。 结果　在青春期旷场实验中,Tph2^KO雄性大鼠总移动距离显著少于WT雄性大鼠(P<0.05),中央区域探索时间及中央区域探索次数与WT雄性大鼠无显著差异(P>0.05)。在青春期社交互动测试中,Tph2^KO雄性大鼠总体社交行为与WT雄性大鼠无显著差异(P>0.05),社交玩耍行为显著增加(P<0.05),而中性社交行为显著减少(P<0.01)。在成年后旷场实验中,Tph2^KO雄性大鼠总移动距离较WT雄性大鼠显著降低(P<0.05),中央区域探索时间较WT雄性大鼠有降低趋势(p=0.100),中央区域探索次数较WT雄性大鼠显著降低(P<0.05)。在成年后居住者-入侵者实验中,Tph2^KO雄性大鼠总体社交行为、攻击行为及中性社交行为与WT雄性大鼠均无显著差异(P>0.05)。此外,Tph2^KO雄性大鼠在青春期及成年后均表现出对同性陌生鼠的骑跨行为(P<0.05,p=0.076)。 结论　色氨酸羟化酶2基因敲除导致雄性大鼠青春期社交玩耍行为显著增加,青春期及成年后同性骑跨行为增加,但未对成年后攻击行为产生显著影响,提示中枢5-HT合成缺陷对青春期社交行为具有选择性调节作用,并对不同发育阶段的同性骑跨行为均产生影响。

摘要: 目的　探讨氯吡格雷(clopidogrel,ClO)在盐敏感性高血压中的作用及分子机制。 方法　选用8周龄盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensitive,Dahl SS)及其对照盐耐受性大鼠(salt-resistant,SS13^BN),随机分为6组,分别给予正常盐(0.4%氯化钠,NS)、高盐(8%氯化钠,HS)、高盐+氯吡格雷灌胃(8%氯化钠+10 mg/(kg·d)氯吡格雷,HS+CLO),喂养8周。尾袖法连续测量8周内动脉收缩压,8周(56 d)后颈总动脉插管法测量大鼠收缩压,苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变情况,免疫组化法检测肾炎症细胞浸润情况,流式细胞术分析外周血血小板活化率、血小板-白细胞聚集,免疫蛋白印记法检测肾组织炎症相关蛋白TNF-α、IL-1β、IL-6和肾组织p38MAPK/NF-κB信号通路关键蛋白的表达。 结果　Dahl SS大鼠高盐组与正常盐组相比,血压显著升高(P<0.05),肾组织病变严重,炎症细胞浸润数量、炎症因子表达增多(P<0.05),血小板活化率(P<0.05)、血小板-白细胞聚集(P<0.05)、p38MAPK/NF-κB信号通路表达均显著增加(P<0.05),而氯吡格雷可有效改善Dahl SS大鼠高盐诱导的上述表现。 结论　氯吡格雷通过抑制血小板活化和p38MAPK/NF-κB信号通路,缓解高盐诱导的盐敏感性高血压,并显著降低肾炎症反应和肾功能损伤等并发症的发生发展。

摘要:动物外科手术课程是培养医学生的重要一环,但在教学实践中发现存在一些不足,如多学科综合的教学难度较大、学生无菌观念薄弱、临床思维较差、团队协作不足以及情感投入浅、价值引领效果差等。结合学情特点,借助虚拟仿真实验与同伴榜样价值,创建情感引领教学模式,通过强化情感认同,增进价值引领,提升“生命教育”教学成效。研究结果表明,该教学模式形成闭环教学过程,符合学生认知规律,可以培养学生的综合能力,增强教学效果。

摘要:心肌肥厚的特征是心脏对各种应激源的有害反应,导致心肌细胞体积增大,并最终引发心功能障碍。自噬作为维持细胞稳态的关键分解代谢过程,近年来被认为在心肌肥厚的发展中起到了重要作用。本文综述了近期在分子、细胞和药理学研究中的新见解,全面探讨了自噬相关调节剂在心肌肥厚中的双重作用。我们分析了自噬通量在生理和病理条件下对心肌细胞的贡献,特别强调了自噬与心肌细胞生长、存活和功能之间的复杂互动。此外,本文还讨论了通过药物调控自噬活性来治疗心肌肥厚和心力衰竭的潜力。通过对现有模型的批判性评估和对新型自噬调节剂的探索,研究人员正逐步揭示心肌肥厚背后的复杂调控机制,为靶向治疗的开发奠定基础。随着这一领域研究的不断深入,自噬调节剂的作用有望进一步明确,为其在治疗心肌肥厚及相关疾病中的临床应用提供新的见解。

摘要:脑类淋巴系统(glymphatic system, GS)是近年来在中枢神经系统(central nervous system, CNS)中发现的重要废物清除途径,在维持脑内环境稳态中发挥关键作用。越来越多的证据表明,该系统功能障碍与多种神经退行性疾病的发病机制密切相关。然而,其在帕金森病(Parkinson’s disease, PD)中的具体作用机制尚未完全阐明。本文系统综述GS的结构与功能特征,深入探讨其在PD病理进程中的潜在作用,并基于现有研究证据总结针对该系统的治疗策略研究进展,旨在为深入理解PD发病机制和开发新型诊疗方法提供理论依据。

摘要:偏头痛是一种常见的神经系统疾病,其发病机制复杂且尚未完全阐明。近年来,线粒体功能在偏头痛发病机制中的作用引起了广泛关注。本文综述了线粒体功能障碍与偏头痛之间的关系,包括线粒体能量代谢、氧化应激、钙稳态和神经炎症等方面的最新研究进展。文章首先介绍了偏头痛的流行病学和临床特征,并详细探讨了线粒体在这些过程中的关键作用。研究发现,线粒体功能障碍可能导致神经元兴奋性增加、血管舒缩异常和炎症反应,从而诱发偏头痛。本文基于线粒体参与偏头痛发病机制的证据,对当前线粒体功能障碍与偏头痛发病机制的研究进展进行了归纳,并提出未来研究的方向和潜在的治疗策略,旨在为偏头痛的预防和治疗提供新的思路。

摘要:肾癌是一种常见且发病率逐渐上升的恶性肿瘤,其发生机制复杂,遗传、吸烟和肥胖等因素与之密切相关。当前主要治疗方法为手术切除肿块,辅以放化疗和免疫靶向治疗,但术后复发转移率较高,治疗效果有限,亟需寻找更有效的靶点。越来越多证据表明,表观遗传修饰,尤其是RNA修饰,在肾癌的发生发展中起着重要调控作用。本文综述了肾癌中RNA表观遗传学研究进展,重点讨论了包括N6-甲基腺苷(N6methyladenosine,m6A)、N7-甲基鸟苷(N7-methylguanosine,m7G)、5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,m5C)、N1甲基腺苷(N1-methyladenosine,m1A)、腺苷到肌苷(adenosine-to-inosine editing,A-to-I)、N6,2’-O-二甲基腺苷(N6,2’-O-dimethyladenosine,m6Am)和N4-乙酰基胞苷(N4-acetylcytidine,ac4C)等RNA修饰及其调控因子在肾癌中的作用和机制,并探讨了靶向RNA修饰及相关蛋白在肾癌临床诊断和治疗中的潜力。

摘要:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全球第三大常见的恶性肿瘤,也是因癌症死亡的第二大主要因素。结直肠癌发病机制复杂,预防和治疗研究需要持续深入,而动物模型在疾病的防治研究中扮演重要角色。该综述的主要目的是概述目前已知的中西医构建CRC动物模型的研究进展,以期为CRC研究提供动物模型的选择。结果表明目前CRC动物模型多以西医造模方法为主,评价标准亦以西医诊断指标为主,缺少中西医病症结合的特色模型,尚不能完全模拟人类疾病发展情况,且鲜有大动物模型构建的报道。因此,构建准确、高吻合度的中西医病证结合动物模型将是深入研究CRC机制和进行中医药综合防治的重要方向。

摘要:胃癌作为全球常见的恶性肿瘤之一,其治疗面临着诸多挑战,尤其在晚期治疗和高复发率方面。而胃癌血管生成是胃癌生长转移的关键过程,因此研究和开发抗血管生成治疗的方法对胃癌治疗具有重要意义。外泌体是一种细胞释放的纳米级囊泡,作为细胞间通讯的重要信使,通过转运特有的外泌体成分来调节局部和远处的细胞通讯,还可以通过调节肿瘤细胞的生长、增殖和肿瘤血管生成来促进或抑制胃癌的发展和进展。外泌体将生物活性分子从供体细胞运输到受体细胞,导致靶细胞的重编程和分子的级联反应。在这篇综述中,我们描述了胃癌中外泌体与肿瘤血管生成的关系以及外泌体在抗血管疗法中的研究现状。由于外泌体的生理结构和功能对胃癌血管的生成具有重要作用,外泌体与抗血管疗法联合治疗胃癌的前景令人期待。

摘要:随着生物技术的快速发展,研究人员不断寻求新的方法来提高生物医学研究和药物开发的效率和精确度,促进多学科融合。人工智能(artificial intelligence, AI)技术的快速发展为这一领域带来了前所未有的机遇。通过整合多种AI模型,研究人员能够更好地利用多组学数据、识别疾病表型、解读动物行为、评估治疗效果,改进实验设计,减少实验动物的使用量,同时提高动物设施管理水平,改善动物福利。本文综述了近10年来AI生物医学研究中的应用进展,探讨其在疾病表型识别、实验动物模型选择与设计、动物行为学分析和动物设施管理等方面的贡献;指出其在数据的标准化,AI模型选择和可解释性,AI模型到动物实验到临床实践的外推过程,以及AI在涉及人类基因和个性化医疗等敏感领域中使用时的伦理考量等方面的挑战,旨在帮助相关领域研究人员和从业者了解其发展现状与机遇,为其更广泛的应用提供助益。