摘要: 目的　探究大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1R)对突触可塑性的作用,以及其对小鼠孤独症谱系障碍(autism spectrum disorders, ASD)样行为的影响。 方法　以CB1R 敲除(knockout, KO)小鼠和丙戊酸钠(valproic acid, VPA)诱导的ASD 模型鼠(VPA 小鼠)为研究对象。通过行为学实验评估CB1R 对小鼠ASD 样行为的影响;通过微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2, MAP2)染色实验检测神经元结构完整性及树突密度,通过蛋白免疫印迹实验检测突触相关蛋白的表达,以评估CB1R 对突触可塑性的影响。 结果 　行为学结果显示,VPA 小鼠存在明显的ASD 样行为;CB1R^{-/ -}小鼠在旷场中心区域停留时间比值显著降低(P<0. 0001),埋珠个数及自梳时间显著增加(P<0. 01),与陌生鼠2 社交时间及探索陌生物体时间显著减少(P<0. 001),探索旧物体时间增加(P<0. 05);CB1R^{+/ -} 小鼠在旷场中心区域停留时间比值明显降低(P<0. 001),埋珠个数及自梳时间明显增加(P<0. 05)。突触可塑性检测结果显示,VPA 小鼠存在明显的突触可塑性损伤;CB1R^{-/ -}小鼠和CB1R^{+/ -} 小鼠海马MAP2 阳性神经元密度显著降低(P<0. 05),突触蛋白1(synapsin1, SYN1)表达水平显著升高(P<0. 05)。 结论　CB1R 敲除会导致小鼠出现焦虑和重复刻板行为、社交及认知障碍等ASD 样行为,以及神经元损伤、树突发育障碍及突触蛋白表达紊乱,提示CB1R 敲除导致突触可塑性异常是ASD 样行为发生的病理机制。

摘要: 目的　探究毛兰素(Erianin)在特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)中的作用及其在高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products, RAGE)-Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A, RhoA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(recombinant Rho associated coiled coil containing protein kinase 1,ROCK1)信号通路中的调控机制。 方法　1-氯-2,4-二硝基苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,DNCB)诱导BALB/c小鼠作为AD的模型,测量小鼠的皮肤厚度、脾和淋巴结的重量。甲苯胺蓝和HE染色检测小鼠的背部皮肤和耳朵的病理改变;ELISA检测炎症因子水平;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激HaCaT细胞建立AD体外模型;采用流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS);免疫荧光法检测线粒体活性氧(mitochondrion reactive oxygen species,mtROS);TUNEL检测细胞凋亡情况;免疫蛋白印迹法检测HMGB1、RAGE、RhoA、ROCK1蛋白表达情况。 结果 　在体内实验中毛兰素抑制皮肤厚度的增加,减轻脾和淋巴结重量,改善炎症细胞的浸润和肥大细胞脱颗粒,降低炎症因子水平(P<0.05)。在体外实验中,毛兰素减少TNF-α诱导的HaCaT细胞ROS、mtROS的产生(P<0.01)。毛兰素治疗后HMGB1、RAGE、RhoA及ROCK1的蛋白表达量下降(P< 0.01);使用RAGE特异性阻断剂(TFA)处理r-HMGB1刺激的HaCaT细胞后,HMGB1的表达没有发生变化,RAGE、RhoA及ROCK1表达减少(P<0.01);在Rho激酶抑制剂Y-27632+r-HMGB1组中,除RAGE的表达没有降低,其余结果与TFA+r-HMGB1组相近。 结论　毛兰素可能通过调节HMGB1/RAGE-RhoA/ROCK1信号通路缓解特应性皮炎。

摘要: 目的　研究凉血退紫方(Liangxue Tuizi Formula, LXTZF)对过敏性紫癜大鼠活性氧(reactive oxygen species, ROS)介导的核苷酸结构寡聚化域(nucleotide-binding oligomerization domain, NOD)样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体活化的影响,探讨其治疗过敏性紫癜的可能作用机制。 方法　将24只大鼠随机分为4组:空白组、模型组、LXTZF组、复方甘草酸苷(compound glycyrrhizin, CG)组,除空白组外,其余各组采用热性药物联合卵白蛋白(ovalbumin, OVA)建立过敏性紫癜大鼠模型。造模成功后,LXTZF组予LXTZF溶液7.47 g/kg灌胃,CG组予CG溶液13.5 mg/kg灌胃,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,每天1次,连续4周。末次灌胃8 h后取材,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠皮肤组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清中白介素-18 (interleukin-18, IL-18)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)水平;免疫荧光检测大鼠皮肤组织中ROS水平变化;逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)法、免疫组化法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠皮肤组织中凋亡相关点样蛋白(apoptosis-associated speckle-like protein, ASC)、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate-specific protease-1, Caspase-1)基因信使核糖核酸(messenger RNA, mRNA)及蛋白表达。 结果 　与空白组相比,模型组大鼠皮肤组织病理可见明显炎症细胞浸润;血清中IL-18、IL-1β含量均明显升高(P<0.05),皮肤组织中ROS水平显著升高(P<0.05),皮肤组织中ASC、NLRP3、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,LXTZF组和CG组大鼠皮肤组织病理可见炎症细胞浸润减轻;血清中IL-18、IL-1β水平显著降低(P<0.05);皮肤组织中ROS水平显著降低(P<0.05),皮肤组织中ASC、NLRP3、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。 结论　凉血退紫方治疗过敏性紫癜发挥作用的机制可能与抑制ROS介导的NLRP3炎症小体活化相关。

摘要: 目的　探究金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl,DNL)提取物在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)线虫模型中的神经保护作用。 方法　分别用7.5、15和30 mg/L的DNL提取物对转基因模型秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C. elegans)NL5901和经6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的N2、BZ555、PD4521及CB7272线虫进行处理,分别观测线虫生存率、基础减慢反应率、α-突触核蛋白(alpha synuclein,α-syn)聚集情况、多巴胺能神经元(dopaminergic neurons,DNs)情况、体壁肌肉细胞线粒体分布密度及膜内蛋白水平。检测经6-OHDA诱导的N2线虫体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)活性,探究DNL对PD线虫模型的抗氧化应激能力的作用。 结果 　与模型组相比,线虫经DNL及左旋多巴(levodopa,L-DOPA)处理后DNs荧光强度明显增强(P<0.05,P<0.001),α-syn聚集明显减少(P<0.05,P<0.001,P<0.0001),基础减慢率均增加(P<0.05,P<0.01,P<0.0001),线粒体密度增大(P<0.05,P<0.01,P<0.001),线粒体内膜蛋白含量增加(P<0.05,P<0.001,P<0.0001),并且SOD含量增加(P<0.05),GSH含量也呈上升趋势;线虫体内ROS含量减少(P<0.01)。在寿命试验中,N2野生型线虫和两种PD线虫经DNL处理后寿命均延长(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。 结论　DNL能有效改善C.elegans PD模型的运动麻痹,改善DNs退化,抑制α-syn的聚集和神经元的损伤,增加抗氧化应激能力,减缓线虫衰老过程。

摘要: 目的　构建气虚湿瘀肾纤维化病证结合小鼠模型并对模型进行评价,运用多组学阐释其蛋白和代谢通路变化。 方法　24只C57BL/6J小鼠随机分为正常(N)组、模型(M)组、气虚湿瘀肾纤维化病证结合(BZ)组,每组8只,实验周期6周。采用“环孢素+高脂饮食+游泳力竭+恒温恒湿”建立气虚湿瘀肾纤维化小鼠模型,通过观察一般体征,测定肾功能、舌象RGB(红、绿、蓝)值、血液流变学指标、血脂、炎症和氧化指标,结合肾组织HE、Masson、PAS、油红O染色、TUNEL细胞凋亡和TGF-β免疫荧光对该模型进行评价;肾蛋白质组学联合血清代谢组学筛选出差异蛋白和代谢物并进行通路富集分析。 结果 　BZ组小鼠第3周开始出现体质量下降(P<0.05),第4周体质量显著下降(P<0.01),同时出现进食及饮水量减少,毛发杂乱光泽度下降,精神萎靡,活动度下降,大便质稀。BZ组Scr、BUN、UACR、NAG均较N组升高(P<0.05或P<0.01),Scr、NAG水平与M组比较有统计学意义。BZ组小鼠舌象R值显著低于N组(P<0.01),B值高于N组,且均与M组有显著性差异(P<0.05)。BZ组小鼠全血多切变率黏度、HCT较N组和M组均升高,PV较N组升高(P< 0.05或P<0.01)。BZ组TC、LDL-C、CRP、IL-6、MDA水平较N组和M组均显著升高(P<0.01),SOD活性较N组下降(P<0.05)。BZ组小鼠可见肾小管胞质空泡化明显,炎性细胞浸润、肾小球基底膜增厚、胶原纤维增生和脂质累积显著。BZ组肾组织细胞凋亡及TGF-β沉积增加。BZ组和N组共有299个差异蛋白,其中180个上调,119个下调;323个差异代谢物,其中205个上调,118个下调;初级胆汁酸生物合成、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、不饱和脂肪酸的生物合成通路被差异蛋白和差异代谢物共同富集到,共涉及3个差异蛋白,9个差异代谢物,其中二十二碳五烯酸、二十碳五烯酸、牛磺酸、3-亚磺酰基丙氨酸、牛磺胆酸、酰基辅酶A氨基酸N酰基转移酶1和酰基辅酶A氨基酸N-酰基转移酶2、超长链3-氧酰辅酶A还原酶表现出较高的预测准确性。 结论　通过“环孢素+高脂饮食+游泳力竭+恒温恒湿”法构建气虚湿瘀肾纤维化(RF)动物模型具有可行性。气虚湿瘀肾纤维化中不饱和脂肪酸生物合成与牛磺酸和亚牛磺酸代谢通路可能发挥重要作用。

摘要:内质网质量控制系统是维持细胞稳态的核心机制之一,主要通过内质网相关降解和内质网自噬两条途径介导内质网中错误折叠蛋白质的降解。三方基序蛋白13 (tripartite motif 13, TRIM13)是一种定位于内质网膜上的蛋白,其E3泛素连接酶活性使其在内质网相关降解过程中发挥重要作用。此外,TRIM13也作为一种非经典内质网自噬受体介导内质网自噬的发生。近年来,TRIM13在内质网质量控制领域受到了广泛的关注,本文将对TRIM13的结构和功能以及TRIM13在内质网质量控制中的作用机制进行综述,并总结其在疾病中的异常表达和调控作用,以期为相关疾病的治疗提供新策略。

摘要:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发病机制是当前生命医学领域的研究焦点之一。运动可作为改善神经退行性疾病的重要手段,研究证实,有氧运动、抗阻运动和多模式运动组合均可显著改善AD。分析发现,其发病机制与运动抑制炎症反应、优化星形胶质细胞和小胶质细胞激活状态、促进海马神经发生以及改善血脑屏障功能密切相关。本文通过对不同运动方式在改善AD中的作用及其机制进行综述,并做出展望,以期为AD的运动防治提供理论和实验依据。