摘要: 目的　观察氯膦酸二钠脂质体(CL)耗竭巨噬细胞对四氯化碳(CCl4 )诱导肝纤维化小鼠模型的特征,并分析转录组学特点。 方法 　将32只C57BL/6小鼠随机分为空白脂质体(PL)组和CL组,每组16只,分别腹腔注射PL或CL。第5天,各组再分为对照(N)组和模型(M)组,每亚组8只。模型组腹腔注射10% CCl₄诱导肝纤维化,对照组注射橄榄油。4周后检测血清ALT、AST水平;HE和天狼猩红染色观察肝脏炎症及胶原沉积;提取肝组织RNA进行转录组测序并分析差异基因表达。 结果　PL-M组血清ALT、AST水平显著升高(P<0.01),病理染色提示纤维化分期以S3期为主;CL-M组纤维化分期以S1期为主。筛选差异基因(|logFC|>2且P<0.05),PL组1462个,CL组2119个。GO分析结果显示两种模型在多个生物学过程、细胞组分和分子功能方面均表现出显著富集;KEGG分析发现29条信号通路显著富集(P<0.05)RT-qPCR验证了Lgals7、Timp1等基因的上调和Mup-ps16、Mup15等基因的下调趋势一致(P<0.05)。 结论 　本研究揭示了巨噬细胞耗竭对CCl₄诱导肝纤维化模型的特征及转录组学特点,为肝纤维化免疫机制研究提供了理论参考。

摘要: 目的　探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。 方法 　将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh组。使用Lipofectamine 3000试剂将NC-Lv、CTRP3-Lv、NC-sh和CTRP3-sh转染至CFs,转染48 h。然后将Lipofectamine 3000试剂与SeVGMT混合并在室温下孵育48 h,更换培养基后继续培养21 d。显微镜下观察不同培养时间点(0、3、7、14、21 d)的细胞形态。通过细胞免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测不同时间点的心肌特异性蛋白α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的表达,并计算不同时间点的跳动细胞比例。 结果　随着培养时间的延长,各组CFs中αMHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的上述心肌特异性蛋白的表达水平较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养3、7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。培养7 d时,各组CFs中出现跳动细胞,随着培养时间的延长,各组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的跳动细胞比例较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中的跳动细胞比例显著降低(P<0.05)。 结论 　CTRP3可增强SeVGMT重编程CFs为iCMs。

摘要: 目的　探讨自主研发的新型PDE5抑制剂CPD1对腹主动脉缩窄(AAC)引起的病理性心肌肥大大鼠的治疗作用和对心肌组织中自噬信号通路激活的影响。 方法 　SD雄性大鼠(180~200 g)随机分为正常对照(Control)组、假手术(Sham)组、模型(AAC)组、CPD1治疗组(5 mg/kg)、西地那非(sildenafil, Sif)治疗组(20 mg/kg),除Control组,其余大鼠经手术在左肾动脉分支点钝性分离腹主动脉,AAC组和各治疗组行缩窄结扎术,Sham组仅分离不结扎。造模3 d后各治疗组大鼠分别给予CPD1或Sif灌胃治疗,Control组、Sham组和AAC组灌胃等量生理盐水,每天1次,持续8周。小动物超高分辨率超声心动图和左心室插管术用于检测大鼠左心功能,计算心脏质量指数,通过Western blot和RT-PCR技术,检测大鼠左心组织中肥大因子心房钠尿肽(ANP)、自噬通路关键因子p62和LC3A/B的表达。 结果　AAC引起大鼠左心功能损伤,心脏质量指数增大,心肌细胞横截面积显著增大,左心组织中ANP表达显著增加(P<0.05),自噬信号活性降低,LC3I蛋白显著积累,向LC3II转化水平降低,p62蛋白表达显著增加;CPD1和Sif明显改善AAC大鼠的左心功能损伤,减轻全心肥厚,抑制肥大因子ANP和p62蛋白的表达(P<0.05),激活自噬信号,促进LC3I向LC3II转化,值得注意的是,低剂量的CPD1治疗效果与高剂量的西地那非相当。 结论 　CPD1促进左心组织中自噬信号通路激活,抑制p62和ANP表达,减小心肌细胞横截面积,改善AAC引起的病理性心肌肥大和左心功能损伤,且与Sif相比具有起效剂量低的优势,为病理性心肌肥大的治疗提供新的选择。

摘要: 目的　探讨白藜芦醇通过调节心肌线粒体能量代谢对运动性疲劳大鼠心脏功能的改善作用和机制。 方法 　选取健康雄性SD大鼠48只,6~8周龄,随机分为空白对照(C)组、白藜芦醇给药(R)组、运动疲劳(E)组和运动疲劳+白藜芦醇给药(ER)组,每组12只。E组和ER组大鼠每天负重5%体质量游泳60 min,每周运动6 d,共运动6周。R组和ER组运动后1 h按50 mg/kg灌胃白藜芦醇。生化试剂盒检测大鼠运动性疲劳指标、心肌损伤指标,以及心肌细胞线粒体能量代谢酶的活性水平。实时荧光定量PCR法(RTqPCR)检测心肌能量代谢相关调控因子的mRNA表达水平。 结果　与C组相比,E组大鼠运动性疲劳相关指标血浆中尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CK)含量显著性增加(P<0.05,P<0.05);心肌细胞损伤指标血浆中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTnI)活性水平显著性提高(P<0.01,P<0.05);心肌细胞线粒体色素C氧化酶(COX)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性水平显著性降低(P<0.01,P<0.05);线粒体能量代谢调控通路中沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ辅激活因子-α(PGC-1α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达水平显著性降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01),提示6周负重游泳使大鼠疲劳程度加重,心肌细胞能量代谢和功能受损。与E组相比,补充白藜芦醇使ER组大鼠血浆中BUN、CK含量显著降低(P<0.05,P<0.05);CK-MB、cTnI的活性水平显著降低(P<0.05,P<0.05),心肌COX和SDH的活性水平显著提高(P<0.01,P<0.05),SIRT1、PGC-1α和ERRα的mRNA表达水平均显著提高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。 结论 　白藜芦醇可以有效激活SIRT1/PGC-1α/ERRα信号通路,改善运动性疲劳大鼠心肌能量代谢,对心肌损伤起到保护作用。

摘要: 目的　探讨毛蕊异黄酮苷(CG)对脂多糖(LPS)诱导BV-2细胞炎症损伤和小鼠神经炎症模型的影响和作用机制。 方法 　体外实验通过LPS刺激BV-2细胞诱导体外神经炎症模型,BV-2细胞分为空白(CON)组、模型(LPS)组、地塞米松(DEX)组和毛蕊异黄酮苷低、高剂量(CG 10 μmol/L、CG 20 μmol/L)组。CCK8法检测BV-2细胞活力;ELISA法检测BV-2细胞上清液中IL-6、TNF-α的水平;Griess法检测NO水平。体内实验通过脂多糖诱导小鼠神经炎症模型,小鼠随机分为空白(CON)组、模型(LPS)组、阿司匹林(ASA)组和毛蕊异黄酮苷低、高剂量(CG 5 mg/kg、CG 10 mg/kg)组。苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织病理学变化;ELISA法检测小鼠血清中IL-6、TNF-α的水平;免疫荧光染色法观察小胶质细胞极化情况;Western blot法检测小鼠皮质组织TLR4、MyD88、NF-κB (P65)、p-NF-κB (p-P65)蛋白表达。 结果　体外实验表明,与CON组比较,CG在2.5~160 μmol/L浓度范围内单用或联用LPS对BV-2细胞无明显毒性(P>0.05),LPS组BV-2细胞上清液中的IL-6、TNF-α、NO水平增加(P<0.01);与LPS组比较,CG显著降低细胞上清液IL-6、TNF-α、NO水平(P<0.05或P<0.01)。体内实验表明,与CON组比较,LPS组小鼠海马区神经元细胞排列疏松紊乱、细胞核出现核固缩现象;血清中IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05或P<0.01);皮质组织iNOS/Iba1阳性细胞数量增多、CD206/Iba1阳性细胞数量减少(P<0.01),TLR4、MyD88、p-P65蛋白表达增加(P<0.05);与LPS组比较,CG改善小鼠海马组织病理学损伤,抑制血清IL-6、TNF-α水平(P<0.01);减少皮质中iNOS/Iba1阳性细胞数量、增加CD206/Iba1阳性细胞数量(P<0.05或P<0.01),显著下调TLR4、MyD88、p-P65蛋白表达(P<0.05)。 结论 　CG通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路改善小鼠神经炎症。

摘要: 目的　探究上感颗粒改善流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用机制。 方法 　经鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小鼠模型。实验分为正常对照组、模型组、阳性对照组和低、中、高剂量上感颗粒组,治疗7 d。记录小鼠的死亡情况,试验结束后测定小鼠体质量和肺湿重。苏木精/伊红(HE)染色观察小鼠肺组织的病理组织形态,酶联免疫吸附试验检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8和转化生长因子-β(TGF-β)水平,试剂盒法检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)炎症信号通路。蛋白免疫印迹检测TANK结合激酶1(TBK1)/干扰素调节因子(IRFs)信号通路。 结果　与模型组相比,上感颗粒和磷酸奥司他韦均降低了流感病毒H1N1感染小鼠肺湿重(P<0.05,P<0.001),减少了肺组织炎性细胞浸润,降低了炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8和TGF-β的水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低了肺组织SOD和GSH-Px的水平(P<0.05,P<0.01),提高了MDA水平(P<0.05,P<0.01)。此外,抑制了TLR4、MyD88和p38的mRNA水平(P<0.05,P<0.01)和TBK1/IRF3/7/NF-κB信号通路的蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。 结论 　上感颗粒能有效减轻流感小鼠肺损伤、肺部炎症和氧化应激,其机制可能与下调TLR4/NF-κB炎症信号通路有关。

摘要: 目的　比较猕猴海南亚种(Macaca mulatta brevicaudus)的体质量和血液生理生化指标,为后续实验动物培育提供参考。 方法 　本研究以陵水南湾猕猴自然保护区内的180只野生猕猴海南亚种(雌性和雄性)为对象,使用电子秤测量其体质量,同时采集猕猴血液样本,采用全自动血细胞分析仪检测血常规指标(RBC、HGB、WBC、PLT等),并用全自动生化分析仪测定生化指标(ALT、AST、GLU、BUN等)。数据分析通过SPSS 18.0软件进行描述性统计,并运用t检验比较不同性别和年龄段猕猴的体质量及血液指标差异。 结果 研究结果显示,在成年野生猕猴海南亚种中,雄性体质量显著高于雌性(P<0.05)。然而,雌性和雄性猕猴的全血细胞计数结果未见显著差异(P>0.05)。在血液生化指标方面,雌性和雄性猕猴海南亚种之间乳酸脱氢酶(LDH)和总胆红素(TBIL)水平差异显著(P<0.05),而其他生化指标则无显著差异。 结论 　本研究获得了野生猕猴海南亚种体质量和血液生理生化指标基础数据,为后续猕猴海南亚种实验动物化培育提供参考。

摘要: 目的　探讨hsa_circ_0004535对2型糖尿病(T2DM)合并代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)模型小鼠的影响。 方法 　选取48只SPF级健康Balb/c小鼠进行建模并分组,每组6只,对照组:正常饲料喂养; T2DM组:2型糖尿病高糖高脂饲料诱导的糖尿病模型;T2DM合并MAFLD组:非酒精性脂肪肝高糖高脂饲料诱导糖尿病合并脂肪肝模型;T2DM合并MAFLD+hsa_circ_NC组:建模4周后,尾静脉注射每只10 nmol hsa_ circ_NC;T2DM合并MAFLD +hsa_circ_0004535组:建模4周后,尾静脉注射每只10 nmol circ_0004535;T2DM合并MAFLD+miRNA_NC组:建模4周后,尾静脉注射每只10 nmol miRNA空白对照;T2DM合并MAFLD+ miR-1827 agomir组:建模4周后,尾静脉注射每只10 nmol miR-1827 agomir;T2DM合并MAFLD+miR-1827 antagomir组:建模4周后,尾静脉注射每只10 nmol miR-1827 antagomir。给予干预措施后每周测量体质量并记录;进行葡萄糖耐量和胰岛素耐受实验;测血脂、肝功能;计算肝指数、胰岛素抵抗指数;病理学指标(HE染色、油红O染色、免疫组化、TUNEL染色、Masson染色)检测肝炎症、脂肪沉积及纤维化程度。 结果　(1)注射hsa_circ_0004535组的动物体质量、肝重量、肝指数、胰岛素抵抗指数及生化指标均显著低于注射hsa_circ_NC组与T2DM合并MAFLD组(P<0.05)。(2)HE染色显示,T2DM合并MAFLD+circ_0004535组,脂肪变性空泡减少变小,炎性细胞浸润减少。油红O染色结果和HE染色结果相一致。(3)TUNEL染色显示,T2DM合并MAFLD+hsa_circ_0004535组TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。(4)Masson染色显示,T2DM合并MAFLD +hsa_circ_0004535组胶原纤维沉积显著减少(P<0.05)。 结论 　在T2DM合并MAFLD的动物模型中,hsa_ circ_0004535和miRNA-1827的表达在调控脂质代谢、胰岛素敏感性、炎症通路、肝细胞凋亡、肝纤维化相关通路方面发挥着重要作用。

摘要: 目的　探究布托啡诺调控基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)/C-X-C型趋化因子受体4 (CXCR4)通路对脂多糖诱导的软骨细胞损伤的影响。 方法 　体外培养人软骨细胞C28/I2,并分对照组(正常培养)、模型组(100 μmol/L脂多糖)、模型+低剂量布托啡诺组(100 μmol/L脂多糖+1 μmol/L布托啡诺)、模型+中剂量布托啡诺组(100 μmol/L脂多糖+2 μmol/L布托啡诺)、模型+高剂量布托啡诺组(100 μmol/L脂多糖+4 μmol/L布托啡诺)、模型+高剂量布托啡诺+NUCC-390组(100 μmol/L脂多糖+4 μmol/L布托啡诺+500 nmol/L CXCR4激动剂NUCC-390)。MTT法、ELISA法、流式细胞术、Western blot分别检测细胞活性、IL-6及TNF-α水平、细胞凋亡、凋亡及SDF-1α/CXCR4通路相关蛋白表达。 结果　相比较于对照组,模型组软骨细胞存活率、Bcl-2降低,TNF-α、IL-6、细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、SDF-1α、CXCR4升高(P<0.05);模型+低、中、高剂量布托啡诺组较模型组以上指标得到改善,而模型+高剂量布托啡诺+NUCC-390组与模型+高剂量布托啡诺组相比结果相反。 结论 　布托啡诺对脂多糖诱导的软骨细胞损伤的改善,可能与抑制SDF-1α/CXCR4信号通路有关。

摘要: 目的　探讨宫腔粘连大鼠模型的宫腔粘连程度分级评价方法。 方法 　双重损伤法建立宫腔粘连大鼠模型,利用HE染色和Masson染色对石蜡切片进行观察,比较大鼠子宫的形态变化、子宫内膜厚度、腺体及血管数目、宫腔面积及粘连程度,根据宫腔面积把大鼠切片分为三个等级进行比较分析。 结果　模型组大鼠平均宫腔面积及宫腔面积/内膜层面积的比值小于空白组大鼠(P<0.01);将宫腔面积/内膜层面积的比值分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三级,各等级之间具有显著差异(P<0.05,P<0.01)。 结论 　宫腔粘连大鼠宫腔面积/内膜层面积的比值可能反映宫腔粘连程度的分级差异,可作为宫腔粘连大鼠模型的分级评价标准之一,为宫腔粘连模型分级诊断提供借鉴意义。

摘要:实验动物中心作为高校理、工、农、医等学科发展和科研教学最重要的支撑平台,为师生提供了动物实验的场所。而实验动物中心的设施设备又是动物饲养环境等级和人员健康最重要的保障。本文通过云南大学实验动物中心近三年的设施设备实际运行维护和故障处理管理经验总结,深入剖析设备日常维保、故障处理、人员培训、安全管理以及运行效果评估等方面的实践经验,旨在为提升高校实验动物中心设备运行的稳定性、可靠性、高效性与节能减排提供全面的参考依据,确保实验动物中心安全高效运行。

摘要:N7-甲基鸟苷(m⁷G)修饰发生在真核生物的mRNA 5’帽、tRNA和rRNA的特定位置,广泛存在于生命的各个层面。m⁷G修饰异常参与调控基因的异常表达,是多种癌症的生物标志之一,在肿瘤诊断和治疗中有重要的应用潜力。本文综述了m⁷G修饰的生物学功能、调节机制及其潜在的临床应用,总结了m⁷G修饰异常的致癌功能及其与预后之间的关系,详细讨论了m⁷G异常修饰在调控多种肿瘤耐药中的作用和分子机制。

摘要:肌少症是骨骼肌质量及功能加速丧失的全身性疾病,导致跌倒、骨折等不良结局发生率增高。肌少症分为原发性与继发性两类,其中原发性肌少症与增龄密切相关,严重威胁老年人的健康生活。肌少症发病隐匿,在临床治疗中易被忽视。其发病机制复杂,涉及多个系统功能变化和病理改变,给相关研究带来诸多挑战。细胞模型能在可控条件下有效模拟疾病病理变化过程,有助于探究肌少症的病因及影响因素,为深入研究肌少症的作用机制提供重要途径。然而,在当前肌少症研究领域尚未有标准化的细胞模型,现阶段常用细胞模型包括蛋白质代谢干预、氧化应激、炎症反应干预等。本文对肌少症常用骨骼肌细胞类型及造模方法进行系统梳理及探讨,为后续实验研究进一步模拟肌少症的病理进程提供坚实基础和重要的方法学参考。

摘要:血管性认知障碍(VCI)是一类由血管危险因素和脑血管疾病引起的认知障碍综合征。血管损伤导致脑血流灌注不足引起炎症、氧化应激、细胞死亡、血脑屏障破坏和突触损伤等一系列病理生理过程,这与VCI密切相关。核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种强效抗氧化基因,由NFE2L2基因编码。研究表明, Nrf2可通过激活抗氧化反应元件表达,减少活性氧(ROS)的释放,减轻机体氧化应激、炎症反应,还能调控细胞程序性死亡,增强血脑屏障和突触可塑性,延缓VCI发病进程。因此,本文就近年来Nrf2在VCI中的作用及中医药靶向Nrf2防治VCI的研究进行综述,为VCI的治疗提供了新的思路和方法。

摘要:多发性硬化症(MS)的核心特性在于中枢神经系统的炎症性脱髓鞘变化,属于一种自我免疫性的病症,其显著的症状包括在大脑、视神经及脊髓内的髓鞘遭受破裂,并且轴突也会受到影响。目前疾病产生的原因及机理尚不明确,在遗传和环境因素的共同影响下,多种因素相互作用,可能通过自身免疫机制引发疾病。最新研究提示NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3),即NLRP3炎症小体,它的异常激活可能影响MS的发病。鉴于此,笔者通过查阅近十年的相关文献,综述了NLRP3的相关机制以及激活过程、NLRP3与MS间存在的联系,以期为MS的发生发展、相关治疗及作用机制的深入研究提供参考。

摘要:近年来,母体肥胖在子代心血管疾病发展中的作用引起了广泛的关注。不仅影响母亲健康,还可通过多种途径影响子代心血管系统发育,增加成年后患心脏病的风险。孕期高热量摄入导致孕妇肥胖,使胎儿暴露在宫内富营养环境中,促使心肌细胞适应性的调整脂肪酸、葡萄糖和酮体代谢等能源物质的摄取和消耗。近期研究表明,母体肥胖可以影响子代心肌代谢使其发生重构,心脏中的ROS增加,从而持续激活mTOR和Hippo通路,诱导心肌细胞增殖和肥大。另一方面,Hippo通路还可以作为心肌肥大的潜在治疗靶点。本综述的主要目的是概述母体肥胖如何通过影响胎儿期的心肌细胞代谢,进而促进子代心肌肥大的发展,探讨表观遗传学机制在调控心肌肥大的关键作用,同时讨论母体肥胖对后代心肌健康的远期效应。此外,本综述建议未来研究应放在深化代谢记忆、跨代遗传效应和早期生命干预策略方面。