摘要: 目的 探讨补肾温阳化瘀方调节 Notch1 / Twist1 信号通路介导的上皮-间质转化(EMT)治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用机制。 方法 SD 雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾温阳化瘀方高、低剂量组和地诺孕素组,采用自体移植法结合冰水浴构建肾阳虚型 EMs 大鼠模型,造模完成后补肾温阳化瘀方高、低剂量组分别给予补肾温阳化瘀方高、低剂量药液灌胃,地诺孕素组给予地诺孕素悬液灌胃,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续 21 d。 观察子宫和异位灶重量、体积和粘连程度;ELISA 测定血清中性激素的水平;免疫组织化学观察 E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin 及 Notch1 / Twist1 信号通路蛋白的定位与表达;Western blot 及 RT-qPCR 检测 E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin 及 Notch1 / Twist1 信号通路的蛋白及 mRNA 表达情况。 结果 与假手术组相比,模型组血清中 E₂ 、P、FSH、LH 含量显著升高( P<0. 05),子宫组织中 NCadherin、Vimentin、Notch1、Twist1 蛋白及 mRNA 水平显著升高(P<0. 01,P<0. 05),E-Cadherin 蛋白及 mRNA水平显著降低(P<0. 01)。 与模型组相比,补肾温阳化瘀方高、低剂量组及地诺孕素组异位灶体积及重量明显减小(P<0. 05,P<0. 01),E₂ 、P、FSH、LH 水平显著降低(P<0. 05),子宫及异位灶组织中N-Cadherin、Vimentin、Notch1、Twist1 蛋白及 mRNA 水平显著下降(P<0. 01,P<0. 05),E-Cadherin 蛋白及 mRNA 水平显著升高(P<0. 01)。 结论 补肾温阳化瘀方能显著抑制 EMs 疾病进展,其作用机制可能与下调 Notch1 / Twist1 信号通路的表达,从而调控 EMs 疾病上皮-间质转化进程有关。

摘要: 目的 探讨“三法三穴”推拿通过延缓失神经肌萎缩改善坐骨神经损伤(SNI)大鼠运动功能的机制。 方法 将 36 只雄性 SD 大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、推拿组,每组 9 只。 模型组、推拿组采用钳夹法建立 SNI 模型;假手术组仅暴露坐骨神经,不夹持。 于术后第 7 天起,对推拿组大鼠进行干预。 使用智能推拿手法模拟仪,依次于殷门、承山、阳陵泉施以点法、拨法及揉法。 各穴位每种手法操作 1 min,每天治疗 1 次。 完成 10 次干预后休息 1 d,随后继续进行为期 10 d 的相同干预;假手术组与模型组大鼠仅接受等时长的抓握固定处理;正常组维持常规饲养状态。 分别于造模前、干预 10 次、20 次后测量后肢抓力以评价肌力。 推拿 20 次结束后处死大鼠并取材,采用 HE 染色法观察大鼠右侧腓肠肌萎缩情况并测定肌纤维横径面积;RT-qPCR 技术检测右侧腓肠肌组织 CCNB1、CNTF、MEF2A mRNA 表达;Western blot 检测右侧腓肠肌组织PAX3、Desmin、HGF 蛋白表达;免疫荧光法检测患侧腓肠肌 MEF2C 的蛋白表达。 结果 与正常组、假手术组相比,模型组大鼠后肢抓力显著降低(P<0. 01);模型组大鼠肌纤维排列紊乱,肌细胞明显萎缩,横截面积显著降低(P<0. 01),CCNB1、CNTF、MEF2A mRNA 及 PAX3、Desmin、HGF、MEF2C 蛋白的表达低于正常组及假手术组(P<0. 05);与模型组相比,推拿组大鼠后肢抓力显著提升(P<0. 01),肌纤维虽有萎缩,但肌纤维排列有序,未见明显紊乱,横截面积显著升高(P<0. 01),CCNB1、CNTF、MEF2A mRNA 及 PAX3、Desmin、HGF、MEF2C蛋白的表达显著上调( P<0. 05)。 结论 “三法三穴” 推拿可促进 CCNB1、CNTF、MEF2A mRNA 及 PAX3、Desmin、HGF、MEF2C 蛋白的表达,促进肌卫星细胞增殖分化及修复神经损伤延缓失神经肌萎缩,改善 SNI 大鼠运动功能。

摘要: 目的 基于炎症性肠病(IBD)的病理机制与核因子 κB(NF-κB)信号通路的过度激活及巨噬细胞 M1 型极化密切相关,利用比较研究探索 IBD 疾病过程中康复新液对 NF-κB 通路及巨噬细胞 M1 型极化的调节机制。 方法 通过硫酸葡聚糖钠(DSS) 诱导构建小鼠 IBD 模型,将 48 只 C57BL / 6 小鼠分为对照(Control)、模 型 ( Model)、 柳 氮 磺 吡 啶 ( SASP )、 康 复 新 液 低 剂 量 ( 5 mL / kg, KFX-L)、 康 复 新 液 中 剂 量(10 mL / kg,KFX-M)、康复新液高剂量(20 mL / kg,KFX-H)、NF-κB 抑制剂预处理(NF-κBi-pretreated)及 NF-κB抑制剂预处理+康复新液高剂量(NF-κBi-pretreated+KFX-H)组,共 8 组。 记录其疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)、组织病理学评分,同时还利用 RT-qPCR 法检测结肠组织 CD86、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、磷酸化 IκBα(p-IκBα)和 IL-1β 的 mRNA 表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测结肠组织 CD86、iNOS、p-IκBα 的蛋白表达水平,流式细胞术分析康复新液对疾病模型的影响。 结果 DSS 诱导成功构建了小鼠 IBD 模型,各项研究指标的测得值均在 Model 组最高(P<0. 05)。 药物干预后,除 SASP 组 CD86 下调程度较小并与 Model 组比较差异无统计学意义( P>0. 05) 外,各组的各项指标与 Model 组比较均显著降低( P<0. 05),而康复新液干预的 3 组中以 KFX-H 组的指标下调最为明显(P<0. 05),但 NF-κB 抑制剂与高剂量康复新液联合干预后并未明显增加疗效,各指标测得值与药物单独干预各组间的差异无统计学意义(P>0. 05)。 结论 康复新液、柳氮磺吡啶和 NF-κB 抑制剂对 DSS 诱导的 IBD 模型小鼠结肠炎症均具有保护作用,但其作用机制存在差异。 康复新液与 NF-κB 抑制剂可通过降低 IκBα 磷酸化水平抑制 NF-κB 通路活化,并下调巨噬细胞 M1 型极化,从而协同减轻肠道炎症反应;而柳氮磺吡啶对巨噬细胞 M1 极化的影响较弱。

摘要: 目的 探究 G2 / S 期应答相关蛋白 1 ( GTSE1) 对卵巢癌 卡 铂 耐 药 的 作 用 及 其 机 制。 方法 (1)Western blot 检测人卵巢癌细胞株 OVCAR3、OV3R-CBP 和 COC1 中 GTSE1 表达量。 (2)取 OV3RCBP 细胞,转染 si-NC 或 si-GTSE1,RT-qPCR 及 Western blot 检测细胞中 GTSE1 mRNA 及蛋白表达量。 分别给予 0、10、20、40、80 和 160 μmol / L 卡铂处理,比较 si-NC 和 si-GTSE1 的半数抑制浓度(IC50 )和耐药指数。 (3)分别给 予 OV3R-CBP 细 胞 70 μmol / L 卡 铂 ( CBP 组)、 70 μmol / L 卡 铂 + 10 μmol / L LY2109761 ( CBP +LY2109761 组)、70 μmol / L 卡铂+转染 si-NC(CBP+si-NC 组)、70 μmol / L 卡铂+转染 si-GTSE1(CBP+si-GTSE1组)、70 μmol / L 卡铂+转染 si-GTSE1+1 μmol / L XMU-MP-1(CBP+si-GTSE1+XMU-MP-1 组)处理。 Western blot检测 E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Yes 相关蛋白(YAP)和转录共激活因子 PDZ 结合基序(TAZ)蛋白表达量。 CCK-8 及流式细胞术检测细胞增殖抑制及凋亡情况。 结果 (1)人卵巢癌卡铂耐药细胞株 OV3R-CBP 组中 GTSE1 表达量高于 OVCAR3 组和 COC1 组(P<0. 05)。 (2)si-GTSE1 组的 GTSE1 mRNA 及蛋白表达量均低于 si-NC 组(P<0. 05)。 si-GTSE1 组的卡铂的 IC50 值和耐药指数均低于 si-NC 组(P<0. 05)。(3)与 CBP+si-NC 组相比,CBP+si-GTSE1 组的 YAP、TAZ 和 Vimentin 表达量均降低,细胞增殖抑制率、凋亡率、pYAP / YAP 和 pTAZ / TAZ 值及 E-cadherin 表达量均升高(P<0. 05)。 与 CBP +si-GTSE1 组相比,CBP +siGTSE1+XMU-MP-1 组的 YAP、TAZ 和 Vimentin 表达量均升高,细胞增殖抑制率、凋亡率、pYAP / YAP 和 pTAZ /TAZ 值及 E-cadherin 表达量均降低(P<0. 05)。 结论 沉默 GTSE1 可通过激活 Hippo-YAP / TAZ 通路抑制上皮间质转化,逆转 OV3R-CBP 细胞对卡铂的耐药性。

摘要: 目的 探讨剪切力对人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)中血小板反应蛋白 4(THBS4)表达的剂量-时间依赖性关系,揭示其在血管重构中的潜在机制,以期指导临床心血管疾病的治疗。 方法 采用平行板流动装置对 HASMCs 加载 0、4、8、12 dyn / cm2 的剪切力,分别作用 6、12 h 时后,收集细胞。 采用 RT-qPCR 检测 THBS4 的 mRNA 的表达量;利用 Western blot 检测 THBS4 的表达水平;通过免疫荧光染色定位 THBS4 与活化的 Caspase8 的关系。 结果 THBS4 的 mRNA 和蛋白表达随着剪切力的增大而逐渐升高,并且随着时间延长表达量增加(P<0. 05)。 高剪切力组基因和蛋白表达量显著高于对照、低剪切力、中剪切力组(P<0. 05)。免疫荧光结果显示 THBS4 表达与活化的 Caspase8 表达位置一致,并且表达量也一致。 结论 剪切力时间梯度变化可以调控 HASMCs 中 THBS4 的表达,其表达量与剪切力的大小呈正相关,并具有时间依赖累积性。THBS4 可能参与剪切力作用下的 HASMCs 的凋亡调控。

摘要: 目的 探究醒脑开窍针刺调控嘌呤受体 P2X7(P2X7R) / 核苷酸结合寡聚化结构域样受体 3(NLRP3) / 白细胞介素 1β(IL-1β)通路对卒中后抑郁大鼠抑郁行为的影响。 方法 构建卒中后抑郁模型大鼠(通过检测血清指标证实其与卒中后非抑郁大鼠存在不同)并将其分为模型组、阳性对照(氟西汀)组、针刺组、通路抑制剂(CBBG)组、针刺+通路激活剂(针刺+BzATP)组,另取健康大鼠作为对照组。 检测各组大鼠抑郁样行为(糖水偏好度试验、旷场实验),血清中炎症因子和氧化应激因子水平(ELISA 法),海马组织病理变化(HE 染色、尼氏小体染色),海马组织中神经元凋亡情况(TUNEL 法),海马组织中 P2X7R、NLRP3、IL-1β、离子钙结合适配器分子 1( Iba-1)、B 淋巴细胞瘤- 2 蛋白( Bcl-2)、促凋亡蛋白( Bax)、活化的胱天蛋白酶 3(cleaved caspase3)蛋白表达量(Western blot 法)。 结果 与对照组比较,模型组大鼠糖水偏好度和旷场活动距离明显减少、脑组织发生明显的病理损伤,血清中炎症因子及丙二醛(MDA)含量、神经元凋亡占比显著增加,过氧化氢酶(CAT)活性明显降低,海马组织中 P2X7R/ NLRP3 / IL-1β 通路蛋白、Iba-1 和促凋亡蛋白表达量明显增加,抗凋亡蛋白表达量降低(P<0. 05);与模型组比较,氟西汀、针刺、CBBG 组大鼠糖水偏好度和旷场活动距离增加、海马组织病理损伤减轻、尼氏小体数量增多,血清中炎症因子及 MDA 含量、神经元凋亡占比下降,CAT 活性增强,海马组织中 P2X7R/ NLRP3 / IL-1β 通路蛋白、Iba-1 和促凋亡蛋白表达量降低,抗凋亡蛋白表达量增加(P<0. 05);与针刺组相比,针刺+BzATP 组大鼠抑郁行为加重、海马组织发生明显病理损伤、尼氏小体数量减少,机体发生炎症和氧化应激反应,P2X7R/ NLRP3 / IL-1β 通路蛋白、Iba-1 和促凋亡蛋白表达量升高,抗凋亡蛋白表达量下降(P<0. 05)。 结论 醒脑开窍针刺法可能通过调节 P2X7R/ NLRP3 / IL-1β 通路,减轻大鼠炎症和氧化应激反应、抑制神经元凋亡,从而改善大鼠海马组织损伤、发挥抗抑郁作用。

摘要: 目的 建立针对不同脱钙程度骨组织的多重特殊染色方法及图像处理方案。 方法 选取 10周龄 SD 大鼠 15 只,处死后取右侧股骨进行固定,随后分组进行不同程度酸脱钙处理。 制备石蜡切片后通过HE 染色评估脱钙程度,并进行甲苯胺蓝染色、番红 O-固绿染色及多重特殊染色,对比不同染色方式对不同脱钙程度骨组织形态结构的染色效果,并利用光谱提取拆分技术建立针对多重特殊染色图像的处理方案。 结果 在酸脱钙过度样本中,甲苯胺蓝染色和番红 O-固绿染色的效果欠佳,多重特殊染色方法经充分对比、评估后建立的染色方案可较好地展示酸脱钙过度样本的骨基质、软骨细胞及胶原结构。 复合图像经光谱处理后可还原为单一染料着色效果,从而提高定量分析的准确性。 结论 本研究建立的多重特殊染色方法可明显提升酸脱钙过度样本中骨基质、软骨及胶原的染色效果,该方案为骨代谢相关疾病的形态学研究提供新的技术支撑。

摘要: 目的 针对传统行为学实验装置的缺陷,设计一种智能化、集成化、精准化的行为学实验新型刺激装置,用于心理学实验项目“肾上腺素受体激动剂对习得性焦虑的易化作用”。 方法 行为学实验新型刺激装置集电/ 声刺激、可视观察、恒温控制及计算机操控于一体,核心组件包括操控系统、主微处理器、供电系统、电刺激器、噪声刺激器、恒温控制及可视观察箱,通过声音的条件刺激结合足部电击的非条件刺激诱发大鼠产生焦虑。 结果 解决了分散操作的弊端,实现了电刺激与噪声刺激的精确同步,确保了条件-非条件刺激的严格关联,可预设刺激序列使实验流程程序化,降低了人为操作失误的风险,实验可重复性显著提高,加深了学生对焦虑行为的科学认知,还可用于疼痛研究及其他行为学实验。 结论 行为学实验新型刺激装置一机多能,是传统医学专业课程以教学需求为导向,医工结合,推进课程建设,助力人才培养的有效探索。

摘要:汇总分析目前针刺干预脓毒症胃肠功能障碍的临床随机对照试验(RCTs)的结局指标的报告情况,总结归纳结局指标的类型、提出适当的建议以促进临床研究进展。 通过系统检索了 4 个中文数据库,3个英文数据库以及 1 个临床试验注册中心,筛选出针刺辅助治疗脓毒症胃肠功能障碍的 RCTs,并使用Cochrane 进行偏倚风险评价。 经过筛选最终纳入了 30 篇临床研究,其中,中文 28 篇,英文 2 篇,并提取到 39种结局指标,主要概括为 8 类:中医病证、临床有效率、胃肠功能、病情程度、影像学检查、血清学标志物、炎症指标、安全性。 多数研究存在的偏倚风险不明确、研究方法学质量相对不足、结局指标主次不分、结局指标使用不规范、缺乏针刺特色等问题。 鉴于此,本文中收集并归纳针刺治疗脓毒症胃肠功能障碍的核心结局指标,明确脓毒症胃肠功能障碍针刺治疗结局指标的局限性,明确研究缺陷并提升临床研究的方法学质量。

摘要:肝郁证是临床多种疾病的常见证型,大量研究表明长期慢性心理应激是肝郁证发生的主要诱因,其生物学机制与中枢多脑区形态和功能改变密切相关,相关证据散见于大量文献当中,有待进一步归纳和综述。 基于此,本文旨在综述肝郁证模型发病与海马、皮质、下丘脑、蓝斑、杏仁核等脑区的形态、功能和分子机制改变之间的关系。 分析发现,肝郁证模型病变多集中在海马和下丘脑,不同肝郁证模型的病变脑区也各不相同。 本文通过整理总结探讨不同肝郁证模型之间的共性生物学改变及特异性差异,为挖掘肝郁证的证候生物学基础及证候靶标等研究提供依据和方向。

摘要:脓毒症心肌损伤(SIMI)是脓毒症常见且病死率极高的严重并发症,其发病机制尚未完全阐明,涉及过度炎症反应、线粒体功能障碍、细胞凋亡与氧化应激等多重病理过程。 尽管目前临床以液体复苏、血管活性药物及抗炎等治疗为主要干预手段,但疗效有限且无法逆转表观遗传层面的病理性心脏重塑。 通过系统地对 DNA 甲基化、组蛋白修饰(如乙酰化、甲基化)及非编码 RNA 调控等表观遗传学修饰与 SIMI 的相关研究进行总结论述。 旨在为 SIMI 的早期预警、诊断、治疗及靶向药物开发提供新视角,改善 SIMI 患者的预后。

摘要:细胞程序性死亡是目前肿瘤治疗研究中的一个重要方向,其中铁死亡和双硫死亡作为两种新型的细胞死亡方式,在近年来受到广泛关注。 铁死亡是一种铁依赖性和过氧化物驱动的细胞死亡方式;双硫死亡是一种由于葡萄糖剥夺使得细胞内胱氨酸蓄积导致二硫化物应激引起的细胞死亡方式。 铁死亡和双硫死亡与肿瘤进展相关,最近研究表明激活铁死亡和双硫死亡可用来干预肿瘤的治疗。 SLC7A11 可同时调控铁死亡和双硫死亡,其高表达在正常葡萄糖环境中抑制铁死亡,在葡萄糖剥夺的环境中会促进双硫死亡。 因此,围绕 SLC7A11 的表达调控和其在肿瘤代谢重编程中的作用,探索联合诱导铁死亡与双硫死亡的协同治疗策略,为抗肿瘤治疗提供新的理论依据与临床思路。

摘要:类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的以慢性滑膜炎、血管翳形成为主的系统性自身免疫病。Wnt / β-连环蛋白(Wnt / β-catenin)信号通路作为 RA 治疗的关键靶点,近年来相关研究取得显著进展,但系统性综述和整合性分析仍显不足。 基于此,该文探讨了 Wnt / β-catenin 信号通路在 RA 病理进程中的作用机制,包括调控炎症反应、FLS 细胞增殖、细胞凋亡、骨破坏和血管生成途径,并总结了中药单体(酚类、萜类、醌类等)及中药复方(中成药类、复方类)调控 Wnt / β-catenin 信号通路治疗 RA 的最新研究进展,以期为 RA 的临床应用及新药研发提供理论依据和参考方向。

摘要:代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MASLD)是一种全球高发的慢性肝病,作为一种多因素导致的复杂疾病,MASLD 的具体发病机制尚未完全阐明。 炎症在 MASLD 的病理发展中具有核心作用,NLRP3 作为一个重要的免疫调节因子,在 MASLD 的炎症反应中扮演了至关重要的角色。 NLRP3 的过度激活会加剧肝脏的慢性炎症,并促进脂肪在肝脏的堆积。不仅如此,NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)的过度激活还会产生大量的活性氧(ROS)进而促进免疫反应细胞的激活,进一步加剧肝脏损伤。 因此,抑制 NLRP3炎症小体的活化已经成为治疗 MASLD 的新策略之一。 多项研究表明,中药提取物及复方能够通过抑制NLRP3 的活化,有效缓解 MASLD 的炎症反应,并且在 MASLD 的临床治疗中取得了显著的进展。 本文综述了NLRP3 信号通路在 MASLD 中的作用及中医药通过调控 NLRP3 炎症小体的活性改善 MASLD 的潜力,为MASLD 中医药防治提供参考。