摘要:从技术发展现状与行业规律来看，我认为NAMs技术在未来5~20年内均无法实现对实验动物学科与动物实验的替代，行业需高度关注技术发展，但无需过度焦虑。首先，当前NAMs技术仅能完成简单、快速的药物初筛工作，无法解决复杂生物系统的研究问题，药物在机体内的代谢、药效发挥、毒性反应等核心过程，涉及多器官、多系统的协同作用，无法通过体外NAMs模型完整模拟。其次，类器官等NAMs技术的发展，现阶段仍无法脱离实验动物的支撑，类器官培养所需的基底胶等核心材料仍来源于实验动物，其技术发展本身就依赖于实验动物学科的配套支撑，且核心原料供应链仍存在被“卡脖子”的风险。最后，NAMs技术对实验动物行业的冲击，并非体现在实验动物使用量或物种应用上，而是可能对行业从业者的岗位结构产生影响，AI等技术的应用将替代部分基础人力工作，行业从业者需主动提升专业能力，适应技术发展带来的行业变革。

摘要: 目的 麝香通心滴丸是治疗动脉粥样硬化(AS)的常用药物,本研究旨在探讨麝香通心滴丸治疗 AS 的作用机制。 方法 使用 ApoE^{- / -}小鼠联合高脂饮食复制 AS 动物模型,分为空白组、模型组、阳性药(PC)组、麝香通心滴丸低/ 中/ 高剂量(STDP-L / M/ H)组。 通过检测小鼠血清中 TC、TG、LDL-C 及 HDL-C 水平,以及观察主动脉组织油红 O 染色,验证麝香通心滴丸对 AS 小鼠的治疗作用;通过生化试剂盒检测主动脉中 SOD、GSH-Px 活性和 MDA 水平,观察麝香通心滴丸对 AS 小鼠氧化应激的影响;通过 ELISA 试剂盒检测主动脉中 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 表达水平,观察麝香通心滴丸对 AS 小鼠炎症的影响;通过 RT-qPCR 和 Westernblot 检测铁死亡以及 NRF2 / GPX4 通路相关蛋白的表达水平,观察麝香通心滴丸对 AS 小鼠铁死亡和 NRF2 /GPX4 通路的影响。 结果 麝香通心滴丸可降低 AS 小鼠的血清 TC、TG、LDL-C 水平(P<0. 01),升高 HDL-C水平(P<0. 01),减轻主动脉斑块沉积,增加小鼠主动脉中 SOD、GSH-Px 的活性(P< 0. 01),降低 MDA 水平(P<0. 05),降低 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 水平(P<0. 01)。 同时,麝香通心滴丸可调节铁死亡相关蛋白( FTL、Transferrin、Steap3)的表达(P<0. 05,P<0. 01),调节 NRF2 / GPX4 通路相关蛋白(NRF2、GPX4、HO-1、ACSL4)的表达(P<0. 05,P<0. 01)。 结论 本研究证明麝香通心滴丸可通过调控 NRF2 / GPX4 通路,抑制铁死亡,从而抑制氧化应激与炎症反应,改善动脉粥样硬化。

摘要: 目的 观察长蛇灸对“阳虚质”大鼠棕色脂肪组织(BAT)产热的影响,探索其改善阳虚质的机制。 方法 15 只 SPF 级 SD 大鼠随机分为正常组、模型组和长蛇灸组(每组 5 只)。 模型组和长蛇灸组通过趋热筛选及传代选育制备阳虚质模型,长蛇灸组造模后连续 15 d 接受长蛇灸治疗。 检测各组肛温、体质量、趋热性、冰水游泳时间和自发活动次数;ELISA 检测血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的水平;HE 染色观察肩胛区 BAT 脂滴形态;免疫组化与 Western blot 法检测BAT 中解偶联蛋白 1(UCP1)、PTEN 诱导激酶 1 (PINK1)、帕金森病相关蛋白(Parkin)表达。 结果 与正常组相比,模型组肛温、体质量、冰水游泳时间和自发活动次数降低(P<0. 01, P<0. 001),趋热性增加(P<0. 01),ACTH、CRH 水平降低(P<0. 01),BAT 脂滴数量减少、空泡增大,且 BAT 中 UCP1、PINK1、Parkin 的蛋白表达均下调(P<0. 001, P<0. 000 1)。 与模型组相比,长蛇灸组治疗后肛温、体质量、冰水游泳时间和自发活动次数上升(P<0. 05, P<0. 01),趋热性降低(P<0. 05),ACTH、CRH 水平升高(P<0. 01),BAT 脂滴数量增多、空泡变小,UCP1、PINK1、Parkin 水平升高(P<0. 05, P<0. 01, P<0. 001, P<0. 000 1)。 结论 长蛇灸可改善阳虚质大鼠症状和血清激素水平,其机制可能与激活 PINK1 / Parkin 通路促进线粒体自噬,增加 BAT 中 UCP1 表达促进产热有关。

摘要: 目的 巴西苏木素是中药苏木的主要有效成分,通过体内外研究探讨其对膀胱癌的影响及可能的作用机制。 方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT) 法检测巴西苏木素对 T24 细胞和过表达 c-Fos 的 T24(T24-c-Fos)细胞的增殖抑制作用;细胞划痕和克隆形成实验检测巴西苏木素对两种细胞迁移及克隆形成能力的影响;RT-qPCR 和蛋白免疫印迹(Western blot)分别从 mRNA 和蛋白水平检测巴西苏木素对两种细胞中c-Fos、肿瘤坏死因子 α 诱导蛋白 3(TNFAIP3)、NF-κB 表达的影响;构建 T24 细胞和 T24-c-Fos 细胞膀胱原位移植瘤小鼠模型,采用巴西苏木素干预,60 d 后解剖并记录膀胱质量,HE 染色观察膀胱原位移植瘤组织形态,免疫组化、RT-qPCR 和 Western blot 检测膀胱原位移植瘤内 c-Fos、TNFAIP3 和 NF-κB 的表达水平。 结果 巴西苏木素抑制 T24 细胞和 T24-c-Fos 细胞的增殖、迁移及克隆形成能力(P<0. 05),与 T24 细胞相比,对 T24-cFos 细胞的抑制作用显著升高(P<0. 05);巴西苏木素在 mRNA 和蛋白水平均上调 T24 细胞和 T24-c-Fos 细胞中 c-Fos、TNFAIP3 的表达,下调 NF-κB 的表达,与相应空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0. 05),与 T24细胞相比,上述指标的变化程度在 T24-c-Fos 细胞中更为显著(P<0. 05);成功构建 T24 细胞和 T24-c-Fos 细胞膀胱原位移植瘤小鼠模型,巴西苏木素干预组膀胱质量均低于相应模型组(P<0. 05),巴西苏木素对 T24-cFos 细胞膀胱原位移植瘤的抑制作用显著高于 T24 细胞(P<0. 05);HE 染色结果显示各实验组膀胱结构消失,瘤细胞致密,核异型、核质比高,T24+巴西苏木素组和 T24-c-Fos+巴西苏木素组可见大量坏死细胞,细胞核固缩或溶解;免疫组化、RT-qPCR 和 Western blot结果显示巴西苏木素促进膀胱原位移植瘤中 c-Fos、TNFAIP3 的表达,降低 NF-κB 的表达,与 T24 细胞膀胱原位移植瘤相比,上述指标在 T24-c-Fos 细胞膀胱原位移植瘤中的变化程度更显著(P<0. 05)。 结论 巴西苏木素可能通过 c-Fos 上调 TNFAIP3 的表达,进而抑制 NF-κB 信号通路,发挥抗膀胱癌的作用。

摘要: 目的 探讨清热解毒扶正方—毒素清通过抑制 MEK/ ERK 通路调控中性粒细胞胞外诱捕网形成减轻肺炎的作用机制。 方法 采用气管滴注肺炎克雷伯杆菌,建立肺炎小鼠模型。 将小鼠分为空白对照组、模型组、头孢曲松组、毒素清低(low-dose DSQ)、高剂量(high-dose DSQ)组。 从一般情况、肺泡灌洗液细胞计数、肺组织病理等方面评价毒素清对肺炎小鼠的药效作用;试剂盒检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活力;ELISA 法测定肺组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6 蛋白水平变化;RT-qPCR 法测定肺组织 TNF-α、IL-6、IL-1β、淋巴细胞抗原 6 复合体位点 G(Ly6G)、MPO、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、瓜氨酸化组蛋白 H3(Cit-H3)、肽基精氨酸脱亚氨酶 4(PAD4)mRNA 的表达;免疫组化( IHC)观察 Ly6G、MPO、NE、Cit-H3 在肺组织切片中的表达;免疫荧光(IF)观察 NETs 在肺组织切片中的表达;Western blot 法检测肺组织 MEK、P-MEK、ERK、P-ERK、PAD4、Cit-H3 蛋白的表达。 结果 毒素清干预显著改善肺炎小鼠呼吸急促、体质量下降等症状;减轻肺组织炎症细胞浸润,降低肺组织 MPO 活性及 TNF-α、IL-6 水平(P<0. 05,P<0. 01);减少 Ly6G、MPO、NE、Cit-H3、PAD4 mRNA 及蛋白表达(P<0. 05,P<0. 01),抑制 NETs 形成,并降低 MEK/ ERK 通路磷酸化水平(P<0. 05,P<0. 01)。 结论 毒素清可能通过抑制 MEK/ ERK 通路减少 NETs 形成减轻肺炎。

摘要: 目的 探讨环状八肽 OCP2 对高原缺氧小鼠心肌损伤的保护作用及潜在分子机制。 方法 将60 只 BALB/ c 小鼠随机均分为空白对照(Control)、缺氧模型(Model)、乙酰唑胺(ACZ)以及 OCP2 低、中、高剂量(OCP2-L / M/ H)组。 各组腹腔单次注射相应药物 10 min 后,置于模拟海拔 8 000 m 的低压氧舱内。 24 h 后采集心脏组织,用于心肌病理学观察、氧化应激及炎症因子水平检测,并测定缺氧诱导因子 1α(HIF-1α)、核因子 E2 相关因子 2(Nrf2)、过氧化物酶体增殖激活受体-γ 辅激活因子-1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)的蛋白表达量。 结果 与空白对照组相比,缺氧模型组心肌细胞出现排列紊乱、肿胀、染色变浅,病理评分显著增加(P<0. 01);过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量明显下降(P<0. 01),而丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)以及 HIF-1α、Nrf2 的表达水平均显著上升(P<0. 01);同时 PGC-1α 和 PPARγ 表达显著降低(P<0. 05 或 P<0. 01)。 相较于缺氧模型组,各 OCP2 剂量组的心肌病理评分显著降低(P<0. 05 或 P<0. 01),细胞肿胀及排列不齐等病变明显改善;SOD、CAT、GSH 水平以及 PGC-1α、PPARγ 蛋白表达均明显回升(P<0. 05 或 P<0. 01),而 TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA 及 HIF-1α、Nrf2 的表达均显著下降(P<0. 05 或 P<0. 01)。 结论 OCP2 对高原缺氧诱发的小鼠心肌组织损伤具有良好保护效应,其机制可能与其有效抑制 HIF-1α 活性、阻断 HIF-1α 与 Nrf2及 PPARγ / PGC-1α 信号轴之间的协同有关,从而最终抑制炎症因子释放并提升抗氧化能力。

摘要: 目的 本研究探讨沉默 JunB 对 C3H10T1 / 2 细胞向棕色脂肪细胞分化及其产热能力的影响。 方法 体外培养 C3H10T1 / 2 细胞,用小干扰 RNA (siRNA)瞬时转染建立 JunB 沉默模型,经 CCK-8 和 Westernblot 检测选取最佳 JunB-siRNA 组;采用鸡尾酒法诱导分化,分为空白对照(Control)组、诱导分化模型(DM)组、诱导分化模型+JunB 沉默(DM+JunB-siRNA)组;通过油红 O 染色分析脂滴形成;Western blot 和免疫荧光染色检测解偶联蛋白 1(UCP1)和过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活因子 1α(PGC-1α)蛋白表达;JC-1 试剂盒检测线粒体膜电位。 结果 JunB-siRNA 对细胞活力无显著影响(P>0. 05),JunB-siRNA Ⅰ沉默效果最佳(P<0. 001);沉默 JunB 后棕色脂肪细胞脂滴积累增加,UCP1、PGC-1α 表达上调(P<0. 05,P<0. 001),线粒体膜电位增强。 结论 JunB 沉默提高棕色脂肪细胞脂滴含量和产热能力,可能通过改善线粒体功能实现。

摘要: 目的 本研究旨在评估冻干熊胆粉对干酵母诱导大鼠发热模型的解热效果,深入阐明其潜在的作用机理。 方法 选取 SPF 级雄性 SD 大鼠,采用随机数字表法将其划分为正常组、模型组、冻干熊胆粉低剂量组(0. 027 g / kg)、冻干熊胆粉高剂量组(0. 054 g / kg)、阿司匹林组(0. 05 g / kg)。 采用干酵母背部皮下注射来制造发热模型,测定并记录造模后连续 8 h 的体温与基础体温的差值(ΔT);计算肺脏指数;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β( IL-1β)、白细胞介素-6( IL-6)、5-羟色胺(5-HT)、前列腺素 E2( PGE2)、环磷酸腺苷( cAMP)、环氧化酶- 2(COX-2) 浓度;采用苏木精-伊红(HE)染色技术,系统评估肝脏、肺脏及下丘脑的组织病理学改变;同时应用蛋白质免疫印迹(Western blot)法,定量分析下丘脑中 Toll 样受体 4(TLR4)、髓样分化因子 88(MyD88)、核因子-κB p65 亚基(NF-κB p65)及其磷酸化形式(p-NF-κB p65)、IL-6 的表达水平。 结果 相较于正常组,模型组大鼠 ΔT 显著升高(P<0. 01),且肺脏指数、血清 TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2、PGE2、cAMP、5-HT 含量及下丘脑中 TLR4、MyD88、p-NF-κB p65 /NF-κB p65、IL-6 的蛋白表达量均呈现显著上调趋势(P<0. 05 或 P<0. 01)。 相较于模型组,冻干熊胆粉的低剂量与高剂量干预均能显著抑制大鼠 ΔT、肺脏指数、血清炎症因子( TNF-α、IL-1β、IL-6)及发热介质(COX-2、PGE2、cAMP、5-HT) 含量(P<0. 05 或 P<0. 01),Western blot 结果显示冻干熊胆粉显著抑制下丘脑组织中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65 / NF-κB p65、IL-6 蛋白表达水平(P<0. 05 或 P<0. 01)。 组织病理学检查结果显示冻干熊胆粉低、高剂量组均能减轻干酵母诱导的肝脏、肺脏及下丘脑组织炎症损伤。 结论 冻干熊胆粉对干酵母诱导的发热具有较好的解热作用,其退热作用或源于对 TLR4 / MyD88 / NF-κB 信号级联反应的抑制。

摘要:标准化是控制实验动物和动物实验质量、提高实验动物科学研究水平的根本保证,标准化对实现实验动物机构规范化管理和运行起着重要的引领性作用。 构建实验动物标准体系是有效指导实验动物标准化工作科学发展的重要方法。 本文在分析山西省实验动物标准化工作现状的基础上,构建了涵盖来源控制、饲养管理、质量控制、动物实验、福利和科技伦理的体系框架结构,提出山西省实验动物标准体系建设完善的建议及实施策略,为山西省实验动物标准建设工作提供指南。

摘要:针对传统《比较医学》课程教学中存在的“重理论轻实践” “评价形式单一”等不足,《实验动物疾病模型》课程以成果导向教育(OBE)理念为核心,构建“三维一体”教学模式:理论-虚拟-实践融合教学、多维度动态评估、动物福利、思政全程渗透。 本研究通过引入虚拟仿真实验、案例库建设、伦理辩论赛等创新形式,强化学生科研设计能力与动物福利意识,为培养具有创新能力和人文关怀的生命科学人才提供新范式。

摘要:阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性发展神经退行性疾病,主要临床特征为记忆力减退、认知功能障碍、语言功能失调及后期行为能力丧失,因其发病机制复杂,尚无有效治疗药物。 异常的表观遗传修饰与AD 的发生发展密切相关,组蛋白甲基化是重要的表观遗传修饰之一,通过动态调控染色质结构和基因转录参与 AD 病理过程,对 Aβ 斑块形成、tau 蛋白高磷酸化、神经炎症、突触可塑性及神经元死亡等发挥重要调节作用。 中药在防治 AD 方面具有独特优势,研究表明中药及其有效成分可调控组蛋白甲基化改善 AD,主要表现为减少 Aβ 与高磷酸化 tau 蛋白的生成、缓解神经炎症反应、修复突触可塑性损伤、增加神经元存活等。 本文基于国内外研究现状对组蛋白甲基化在 AD 中的关键作用和中药及其有效成分干预研究进行综述,为中药的研发和应用提供新的思路。

摘要:急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 是临床常见的危重症疾病之一。 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在其发病机制中扮演双重角色,既是重要的免疫防御机制,也是导致肺组织损伤的关键因素。 NETs的形成过程,即 NETosis,受到组蛋白修饰的精密调控。 本综述系统阐述了组蛋白瓜氨酸化、乙酰化、甲基化等关键修饰在 ARDS 中调控 NETosis 的具体分子机制,进一步探讨了不同修饰间的交叉对话及其在 ARDS 炎症网络中的交互作用,并展望了以肽基精氨酸脱亚胺酶 4(PAD4)抑制剂为代表的靶向组蛋白修饰-NETosis 通路治疗 ARDS 的转化前景与挑战,旨在为该领域的研究提供新的思路与理论依据。

摘要:卵巢储备功能减退(DOR)是一种常见的妇科疾病。 随着晚婚晚育趋势的加剧,其发病率呈上升且年轻化趋势,严重影响女性生育能力及生活质量。 目前西医治疗 DOR 主要依赖激素替代及辅助生殖技术,但存在副作用大、治疗成本高等问题。 中医药在改善 DOR 方面具有多靶点、多途径的优势,能有效调节激素水平、促进卵泡发育,且安全性高,已成为临床重要补充治疗手段。 磷脂酰肌醇 3-激酶/ 蛋白激酶 B(PI3K/Akt)信号通路是调控卵巢颗粒细胞增殖、凋亡、自噬、氧化应激的核心通路,其异常激活或抑制与 DOR 发生发展密切相关。 本文综述了 PI3K/ Akt 通路在 DOR 中的作用机制,包括细胞凋亡、炎症反应、自噬及氧化应激等方面,并总结中药单体(如山奈酚、姜黄素)和复方(如育麟方、毓麟护坤汤)通过调控该通路改善 DOR 的最新研究进展,为中医药精准干预 DOR 提供理论依据。

摘要:焦虑症是临床常见的精神障碍疾病, 发病机制仍不明确, 目前临床常用的抗焦虑药物起效慢、副作用明显, 给家庭和社会带来沉重负担。 且药物研发进程缓慢, 其核心瓶颈在于缺乏能精准模拟人类焦虑症特征的动物模型。 而急性应激是诱发焦虑症的关键因素, 可还原焦虑症发病的起始环节, 急性应激动物模型为探究焦虑症发病机制、 抗焦虑药物筛选提供关键载体。 本文系统阐述了急性应激的概念、 急性应激致焦虑动物模型的制备方法、 模型有效性的测试技术、 潜在生物学机制、 临床意义及该领域的应用方向与未来展望, 旨在为焦虑症的基础研究、药物研发及临床预防提供理论参考和实验依据。

摘要:减重手术是治疗肥胖症的重要方法之一。 然而,接受减重手术的肥胖症患者常面临微量营养素不足的风险。 微量营养素缺乏会对人体产生较为广泛的不良影响,严重时可能会危及患者的生命。 充足的微量营养素不仅有利于患者术后减轻体重、减少内脏脂肪、改善代谢健康,还会对患者的肝功能、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)等指标产生积极影响。 本文从减重手术患者微量营养素不足的现状和微补充策略两大方面进行阐述,以期能为减重手术患者微量营养素不足的筛查、补充和预防提供参考。

摘要:重症肌无力(MG)是获得性神经-肌肉传递障碍的难治性神经系统疾病,主要表现为骨骼肌波动性无力和易疲劳,发病率呈逐年上升趋势,且在老年群体中尤为明显。 常规西医治疗能够改善和减轻多数患者的临床症状,但存在不良反应大、复发率高、减量或停药困难等问题。 因此,寻找更加安全有效的治疗方案是亟待解决的现实问题,中医药治疗 MG 历史悠久,疗效显著。 MG 属于中医“痿证”范畴,病机主要与脾胃气虚等相关。 补中益气汤是健脾益气的基础方,多项研究证实其通过调节机体免疫、增加骨骼肌力量、调节肠道菌群、抑制炎症等作用机制改善 MG 症状。 近年来开展了大量有关补中益气汤治疗 MG 的研究,由此,本文结合 MG 发病机制,对补中益气汤治疗 MG 的作用及机制进行综述,以期为该方临床应用和后续深入研究提供科学依据。