摘要:NAMs技术与实验动物研究分属不同专业领域，二者不存在本质上的冲突与对立，业内专业人士均清晰认知两类技术的优劣势与适用场景；国际上“替代论”的过度发酵，核心源于极端动物保护组织的舆论推动，而非技术发展的客观现状。从技术本质来看，两类技术完全可以实现协同融合发展，而非非此即彼的替代关系。一方面，应系统梳理两类技术的适用场景清单，明确哪些科研场景可优先应用NAMs技术，哪些复杂系统研究必须依赖动物实验，为政策制定与科研实践提供可落地的实操依据；另一方面，可通过人源化动物模型构建等方式，实现NAMs技术与实验动物研究的深度融合，同时需明确相关研究的伦理边界，尤其是神经类器官、生殖相关研究的伦理红线，保障科研工作的合规有序开展。

摘要: 目的 探索女性生殖系统小鼠人源性肿瘤组织异种移植(PDX)模型构建可行性及影响因素。 方法 收集2023 年3 月~2023 年10 月在首都医科大学附属北京妇产医院进行治疗的78 名女性生殖系统恶性肿瘤患者临床信息,留存肿瘤组织并移植到裸鼠或免疫缺陷小鼠进行PDX 模型构建和传代,观察至2024年6 月。 结果 在37 例具有明确结局的小鼠PDX 模型中,22 例(59. 46%)肿瘤组织成功植入小鼠,其中7 例(18. 92%)进一步成功传代并建立了稳定PDX 模型,15 例(40. 54%)失败。成功移植组与失败组在植入肿瘤分期、类型和分化程度方面无显著性差异P>0. 05)。对于宫颈癌组织(n= 19),移植和建模成功率分别为63. 2%(12/19)和15. 8%(3/19);对于子宫内膜癌组织(n= 10),移植和建模成功率分别为60. 0%(6/10)和10. 0%(1/10);对于卵巢癌组织(n=5),移植和建模成功率分别为80. 0%(4/5)和60. 0%(3/5)。新辅助化疗(NACT)后获取的肿瘤组织以及来自转移灶的肿瘤组织也成功用于PDX 模型的建立。 结论 利用女性生殖系统肿瘤构建小鼠PDX 模型具有可行性,对于化疗后或者转移部位肿瘤构建同样适用。

摘要: 目的 比较丙戊酸(VPA)不同暴露方式诱导不同性别的自闭症谱系障碍(ASD)小鼠在社交、情绪和认知行为上的差异,为 VPA 暴露诱导 ASD 模型中实验动物性别和诱导方式的选择提供依据。 方法 孕12. 5 d 小鼠腹腔注射 VPA(600 mg / kg)或等体积 0. 9%氯化钠溶液,所产子代分别设为 Preg VPA 组和 Preg 对照组;正常孕期分娩的新生 14 d 小鼠随机分为 SC VPA 组(颈部皮下注射 400 mg / kg VPA)、SC 对照组(颈部皮下注射等体积 0. 9%氯化钠溶液)、IP VPA 组(腹腔注射 400 mg / kg VPA)、IP 对照组(腹腔注射等体积0. 9%氯化钠溶液)。 观测给药后实验小鼠的死亡率、流产率;通过三箱社交实验、自我捋毛实验、旷场实验、Y迷宫自发交替实验、水迷宫实验,观察 VPA 不同暴露方式对不同性别小鼠社交、情绪和认知行为的影响。 结果 孕 12. 5 d 注射 VPA 后,孕鼠的死亡率为 50%,流产率为 25%,而新生 14 d 小鼠不管是皮下还是腹腔注射VPA 均无死亡。 三箱社交实验、自我捋毛实验和旷场实验 结果显示,和各对照组相比,无论使用哪种注射方式,雌、雄性的 VPA 小鼠均表现为社交障碍、社交新颖性障碍、重复刻板样行为及焦虑样行为。 Y 迷宫自发交替实验和水迷宫实验结果显示,Preg VPA 组及 SC VPA 组的雄性小鼠均表现出认知障碍,而 IP VPA 组的雄性小鼠有认知障碍趋势,但无显著性差异;而不同方式的 VPA 暴露后,雌性小鼠均无认知障碍。 结论 VPA 暴露的孕鼠死亡率和流产率较高,而新生 14 d 小鼠皮下或腹腔注射 VPA 无死亡。 Preg VPA 组和 SC VPA 组的雄性小鼠均诱发 ASD 样行为,表现为社交互动减少、重复性刻板行为和焦虑增加、认知功能障碍,而雌性小鼠不稳定。 IP VPA 组小鼠表现为轻微社交及社交新颖性障碍、轻度焦虑样行为,无显著学习能力障碍。

摘要: 目的 系统评估长期食用转 cry1Ab / cry2Aj 和 G10evo-EPSPS 基因玉米(双抗 12-5 玉米)对食蟹猴多代生殖与子代(包括 F1 代和 F2 代)早期发育的安全性。 方法 将 36 只性成熟食蟹猴( F0 代,6 雄 30 雌)随机分为常规饲料(CK)组、转基因玉米(GM)组及非转基因亲本对照玉米(Non-GM)组,按 1 ∶ 5 雄 ∶ 雌 进行后宫式繁殖。持续记录 F0 与 F1 代的生殖性能(怀孕、流产、出生及出生后死亡数),并对 F1 及 F2 代仔 猴进行新生仔猴外观、神经行为功能发育、体格发育及血液生理生化指标的系统检测。 结果 F0 代 GM 组怀 孕胎次(32 次)与 CK 组(26 次)、Non-GM 组(29 次)无显著差异P>0. 05);F1 代总体存活数(GM 组 19 只、 CK 组 20 只、Non-GM 组 14 只)组间差异无统计学意义(χ2 = 3. 141,P= 0. 237)。 F1 代繁殖性能及 F2 代存活情况组间同样未见显著差异(P= 1. 000)。 所有子代新生仔猴外观均未见畸形,神经行为功能发育评分、体格生长趋势及血液基础生理指标(24 项血常规、18 项血清生化)在 3 组间均无显著性差异P>0. 05)。 结论 长期食用双抗 12-5 玉米未对食蟹猴 F0 代生育能力及子代早期发育产生不良影响,为该类生物育种产品的食用安 全性提供了重要的非人灵长类动物实验依据。

摘要: 目的 探究黄芪甲苷(ASⅣ)调节缺口受体 1(Notch1) / 扭曲螺旋转录因子 1(Twist1)信号通路 对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响。 方法 将 SD 大鼠随机分为 Con(空白)组、Model(模型)组、L-ASⅣ(AS Ⅳ低剂量)组、H-ASⅣ(ASⅣ高剂量)组、MEBO(阳性药:湿润烧伤膏)组、DAPT(ASⅣ高剂量+Notch1 抑制剂 DAPT)组,每组各 15 只,除 Con 组外,均建立深Ⅱ度烧伤大鼠模型。 检测各组大鼠烧伤创面愈合率和含水率; 检测各组大鼠血清 IL-8、IL-18、IL-6 水平;检测各组大鼠烧伤创面组织病理、细胞凋亡变化;检测各组大鼠烧伤 创面组织碱性成纤维细胞因子(b-FGF)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板-内皮细胞 黏附分子(CD31)以及 Notch1 / Twist1 通路蛋白表达情况。 结果 与 Con 组比较,Model 组大鼠烧伤创面组织出现明显水肿状态,结构完整性受损且炎性细胞浸润,含水率、IL-8、IL-18、IL-6、细胞凋亡率、EGF、b-FGF 平均 荧光强度增加,VEGF、CD31 平均光密度值、Notch1、Twist1 蛋白表达降低(P<0. 05);与 Model 组比较,L-ASⅣ 组、H-ASⅣ组、MEBO 组大鼠烧伤创面组织水肿和炎性细胞浸润减轻,结构完整性恢复,创面愈合率、EGF、bFGF 平均荧光强度、VEGF、CD31 平均光密度值、Notch1、Twist1 表达升高,含水率、IL-8、IL-18、IL-6、细胞凋亡率 降低(P<0. 05);与 H-ASⅣ组比较,DAPT 组大鼠烧伤创面组织水肿和炎性细胞浸润加重,结构完整性破坏,创面愈合率、EGF、b-FGF 平均荧光强度、VEGF、CD31 平均光密度值、Notch1、Twist1 表达降低,含水率、IL-8、IL- 18、IL-6、细胞凋亡率升高(P<0. 05)。 结论 ASⅣ可能通过激活 Notch1 / Twist1 信号通路,促进深Ⅱ度烧伤大 鼠创面愈合。 【关键词】 黄芪甲苷;缺口受体 1 / 扭曲螺旋转录因子 1;深Ⅱ度烧伤;创面愈合

摘要: 目的 探讨红枣多糖(ZJP)对后肢悬吊(HU)模拟微重力小鼠免疫抑制及肠屏障损伤的防护作用。 方法 将雄性 ICR 小鼠随机分为对照组、HU 组、左旋咪唑组、ZJP 低、中、高剂量组(200、400、800 mg / (kg·d)),连续灌胃 14 d。 检测各组小鼠体质量、脾脏指数;苏木精-伊红(HE)染色及阿尔新蓝-过碘酸雪夫 (AB-PAS)染色观察脾脏和结肠组织结构;酶联免疫吸附(ELISA)测定血清中白细胞介素( IL)-1β、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、IL-10、免疫球蛋白(Ig)M、IgG;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠炎症(Tlr4、Nlrp3、Nos2、Il1b、Tnf)与紧密连接相关(Tjp1、Cldn1)基因表达。 结果 与 HU 组相比,ZJP 低、中剂量组脾脏指 数下降均改善(P<0. 05);ZJP 中剂量组降低 IL-1β(48. 15%,P<0. 001)、TNF-α(43. 21%,P<0. 05),ZJP 低剂量 组提升 IL-10 ( 83. 25%, P < 0. 05); ZJP 低、中、高剂量组分别提高 IgM ( 22. 54%、 15. 57%、 13. 44%) 与 IgG (262. 61%、307. 69%、230. 58%);ZJP 各剂量组均下调炎症基因(Tlr4、Nlrp3、Nos2、Il1b、Tnf)并上调紧密连接相关基因 Tjp1 与 Cldn1。 结论 ZJP 显著改善 HU 诱导的小鼠免疫功能抑制和肠屏障损伤,其作用可能与抑制 TLR4 / NLRP3 炎症通路、减少促炎反应、上调紧密连接蛋白相关基因表达及恢复免疫球蛋白水平有关。 本研究为 ZJP 在航天免疫防护及功能食品开发中的应用提供了实验依据。

摘要: 目的 本研究旨在培育载脂蛋白 E(ApoE) 基因敲除兔,探究其表型特征及繁育性能,建立 ApoE 基因敲除兔的育种技术体系。 方法 采用 CRISPR/ Cas9 基因编辑技术和胚胎移植技术构建 ApoE 基因 敲除兔,通过基因型筛选健康的 ApoE 基因敲除兔作为种兔,结合近交或回交方式进行选种扩繁,对 ApoE 基因敲除兔进行血常规、血脂生化检测和病理检查表型分析,并评估其繁殖性能,从而筛选出遗传稳定且表型明显的 ApoE 基因敲除兔。 结果 成功获得 ApoE ^-/-兔群体,正常饮食下,其总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)显著高于新西兰兔(WT)(P<0. 01),表现出脂质代谢紊乱和动脉粥样硬化的病理特征,其繁殖性能及生长发育与新西兰兔(WT)无显著性差异。 结论 本研究成功制备并筛选出遗传稳定、表型明显的 ApoE 基因敲除兔,建立了有效的育种技术体系,为心血管及相关代谢疾病的机制研究提供了重要的动物模型。

摘要:模式生物斑马鱼在生命科学研究中应用广泛,但在本科实验教学体系中的系统性构建与实践仍待深化。本研究基于本科生“科研导向、系统思维、创新能力”的培养需求,设计了以“抗疲劳”与“抗皱”功能评价为主题的斑马鱼综合实验课程。课程将行业团体标准(T / ZHCA 014-2022)及成熟的科研模型转化为适用于本科教学的综合性实验项目。通过引导学生全程参与实验设计、模型建立、数据采集与分析和学术报 告撰写,有效培养了其科学思维与实践能力。教学实践表明,该实验教学模式不仅显著提升了学生的实验操作技能、数据分析能力与团队协作精神,更实现了科研反哺教学、理论联系实际的教学目标。教学效果评估表明,学生在实验操作、数据分析及科研思维等方面的能力显著提升(P<0. 05),课程满意度达 95%以上。本模式为在本科阶段开展基于前沿模型生物的创新性实验教学提供了可复制、可推广的实践范例,是对本科教学质量工程的有益探索。

摘要:宫颈癌发病呈年轻化趋势,严重危害女性生命健康,目前针对该病仍缺乏显著有效的治疗方 案。为推进宫颈癌临床诊治的发展,筛选出符合宫颈癌病证特点的动物模型十分重要。总结现有宫颈癌动物模型,主要包括自发性宫颈癌、诱发性宫颈癌、移植性宫颈癌以及基因工程性宫颈癌等动物模型。基于宫颈癌中西医临床病证特点对各模型赋值进行分析,发现移植性宫颈癌动物模型的中西医吻合度相对较高,其中皮下移植法西医临床吻合度达 70%且最为常用,宫颈原位移植法中医临床吻合度达 68. 5%;自发、诱发性宫颈癌 模型造模成功率不高,模型间差异大,且吻合度不高,较少使用。总体来看,模型中医临床吻合度均较低,不利于宫颈癌的中西医结合诊治发展,故又提出施加中医致病因素、中医模型评判标准等建议,以期完善宫颈癌模 型发展,推动临床疾病研究。

摘要:慢性肾小球肾炎(CGN)是由多种病因引起的原发于肾小球的一种免疫性炎症性疾病。该病病情呈持续化进展,随着肾功能不断减退,最终可进展为尿毒症。西医治疗此病以控制高血压、降低尿蛋白、改善肾脏微循环等对症为主,虽可控制症状,但副作用多、疗效有限,难以完全满足临床需求。而中西医结合治疗不但能够有效减少副作用,且可提升疗效。研究发现 p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转化生长因子-β1 / Smad(TGF-β1 / Smad)、Toll 样受体 4 / 髓样分化初级反应蛋白 88 / 核因子 κB(TLR4 / MyD88 / NF-κB)、脂多糖结合蛋白/ 分化簇 14 / FBJ 鼠类骨肉瘤病毒癌基因同源物(LBP / CD14 / FOS)、单核细胞趋化蛋白-1/ CC 类趋化因子受体2(MCP-1/ CCR2)等多种关键信号通路均在 CGN 发病过程中发挥关键作用。 且中医药可通过多靶点、多途径的整合调节作用,干预上述关键信号通路的异常活化,从而发挥显著的抗炎、抗氧化、抗纤维化及改善局部微循环等治疗效果。基于中医药广泛的作用,中西医结合治疗在临床应用中表现出较高的安全性与良好的耐受性,逐渐成为现代治疗体系中的重要组成部分。

摘要:重度抑郁症(MDD)是一种高致残性、高复发率的精神障碍,其病理机制复杂,存在多种假说 (如单胺类神经递质失衡、神经炎症及神经可塑性障碍等)。然而,现有假说尚无法完全解释 MDD 的发病机制。近年来,星形胶质细胞与小胶质细胞在中枢神经系统中的作用备受关注,研究发现二者通过调控神经递质、神经炎症、突触可塑性及血脑屏障功能等参与 MDD 的发生发展。本文综述了星形胶质细胞、小胶质细胞及二者互作对 MDD 发生发展过程的影响。旨在深入研究两种胶质细胞及其互作与 MDD 发病机制的关系,为阐明 MDD 机制及开发新型抗抑郁药物提供潜在靶点,推动制定更有效的治疗策略。

摘要:肥胖症发病率在全球范围内呈现持续上升趋势,现已成为公共卫生领域的重大挑战。作为一种慢性代谢性疾病,肥胖症以低度炎症和代谢功能紊乱为主要特征,会显著增加多种并发症的风险。 当前,该领域的基础研究主要依赖临床前动物模型和二维(2D)细胞培养体系,然而这些模型存在着种属差异大、多变 量干扰性强、对人体真实微环境模拟效果能力有限等明显局限。 近年来,类器官技术作为三维(3D)体外模型 快速发展,为肥胖症的基础研究提供了新思路。 类器官技术可以高度还原人体组织复杂结构和生理微环境, 在模拟肥胖相关组织微环境、再现疾病动态演变和推动转化医学应用方面展现出独特价值。 本文主要对类器 官技术在构建肥胖症及其主要并发症模型中的作用进行了梳理,并探讨了类器官在肥胖症治疗中的应用,以期为肥胖症的机制研究和治疗策略开发提供新思路。

摘要:线粒体动力学失衡是指生理或病理状态下,线粒体分裂与融合之间的动态平衡被破坏,通常表现为分裂过程增强或融合过程受到抑制,并进一步引起线粒体在数量、形态及功能上的异常。其中,线粒体碎片化是线粒体动力学失衡最核心的特征,该特征已在多种癌症中被广泛报道。肝脏作为人体代谢的核心器官,肝细胞里富含线粒体,线粒体动力学失衡在肝癌的发生、进展及治疗抵抗中都有重要作用。本文旨在系统综述线粒体动力学失衡在肝癌中的分子机制及其在诊断、治疗与预后评估中的临床应用价值。围绕这一主题,本文总结了线粒体动力学失衡的核心调控机制,涉及 DRP1、FIS1 和 MFF 等分裂相关蛋白,OPA1、MFN1、 MFN2 等融合相关蛋白,以及miR-761、GNPAT、HBV 等上游信号调控分子;探讨线粒体动力学作为新型生物 标志物在肝癌早期诊断、风险分层及预后评估中的应用潜力;并分析线粒体动力学在介导化疗、靶向治疗及免 疫治疗抵抗中的作用机制与相应干预策略;此外,也综述了线粒体动力学失衡通过调控免疫细胞功能影响肿 瘤微环境,以及在促进肝癌转移中的临床意义。最后,本文总结了线粒体动力学相关研究对肝癌精准诊疗的重要贡献。同时,也指出了当前临床转化面临的挑战。展望未来,需要深化机制研究以突破技术瓶颈,同时加强临床验证,从而推动该领域朝着个体化治疗的方向发展。

摘要:抑郁症的器官交互作用机制研究是当前神经科学领域的热点。 骨骼作为机体重要的内分泌器官,其分泌的骨源性因子———羧化不全骨钙素( ucOCN)、脂质运载蛋白 2( LCN2)、Dickkopf 相关蛋白 1 (DKK-1)等释放入血后,不仅能够通过血液循环作用于肾上腺和下丘脑等器官,还可穿透血脑屏障进入脑部, 通过调节神经内分泌(糖皮质激素、促肾上腺皮质激素释放激素等)的水平、各脑区神经递质(5-羟色胺、多巴 胺等)的合成与释放、血液金属离子(铁离子、镁离子等)的浓度,以及 PGC-1α/ Ⅲ、FNDC5 / BDNF 和 GSK-3β/ β-catenin 等信号通路的传导,影响海马和前额叶等脑区的结构重塑和功能可塑性改变,从而参与抑郁症的发 病或症状的改善。研究证实,运动可显著改善抑郁,其机制与骨源性因子 ucOCN、LCN2、DKK-1 等表达增加, 进而调节神经内分泌、神经递质和相关基因表达等密切相关。 当前研究多聚焦部分因子单独作用机制,缺少 较为全面的综述分析。因此,本文通过梳理现有研究成果总结关键问题,对骨源性因子促进运动改善抑郁症的机制进行分析与探讨,从而对骨内分泌功能进一步阐明,以期为探究抑郁症的发病机制及为运动抗抑郁干预措施提供新的理论视角。