摘要: 目的 基于嘌呤能离子通道型受体 7(P2X7R)探讨冰水泳浴条件下高尿酸血症大鼠痛风性关节炎(GA)发作的机制。 方法 将 30 只雄性 SD 大鼠随机分成对照组( n= 6)、高嘌呤食饵+冰水泳浴组( n=12)、高嘌呤食饵组(n= 6)、冰水泳浴组(n= 6),高尿酸血症通过氧嗪酸钾联合酵母提取物灌胃塑造,冰水泳浴指在冰水混合物中进行 5 min 的耐力游泳,实验共持续 21 d。 尿酸酶法检测大鼠血清尿酸水平;比色法检测血清及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)水平;磷钼酸比色法检测血清三磷酸腺苷(ATP)水平;偏振光显微镜观察关节液尿酸盐结晶;实验期间每 2 d 测量右侧踝关节直径和足厚变化,计算肿胀指数;苏木素-伊红(HE)染色观察踝关节和滑膜组织的病理变化;ELISA 法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6 和肿瘤坏死因子(TNF)-α 水平;采用全自助血细胞分析仪检测静脉血中性粒细胞计数;蛋白免疫印记法(Western blot)检测滑膜组织中 P2X7R 蛋白表达水平;免疫组化法检测滑膜组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体 3(NLRP3)蛋白表达水平。 结果 与对照组相比,实验第 7、14、21 天,高嘌呤食饵+冰水泳浴组、高嘌呤食饵组血清尿酸水平均显著升高(P<0. 01 或 P<0. 05);与高嘌呤食饵+冰水泳浴组相比,实验第 7、21 天,高嘌呤食饵组血清尿酸水平显著降低(P<0. 01),实验第 7、14、21 天,冰水泳浴组血清尿酸水平显著降低(P<0. 01)。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组血清、肝脏 XOD 水平均显著升高(P<0. 01);与高嘌呤食饵+冰水泳浴组相比,高嘌呤食饵组、冰水泳浴组血清 XOD 水平均显著降低(P<0. 01),高嘌呤食饵组肝脏 XOD 水平显著降低(P<0. 05)。 与高嘌呤食饵+冰水泳浴组相比,高嘌呤食饵组第 7、14、21 天血清 ATP 均显著升高(P<0. 01 或 P<0. 05),冰水泳浴组第 14 天血清 ATP 水平显著升高(P<0. 01)。 高嘌呤食饵+冰水泳浴组观察到尿酸盐晶体。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组右侧踝关节肿胀指数在第 5、7、9、11、13 天显著升高(P<0. 01 或 P<0. 05)。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组足厚肿胀指数在第 5、7、9、11、13、15、17、19、21 天均显著升高(P<0. 01或 P<0. 05)。 HE 染色结果显示,高嘌呤食饵+冰水泳浴组踝关节腔内出现滑膜增生,可见炎性细胞浸润。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组血清 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均显著升高(P<0. 01);与高嘌呤食饵+冰水泳浴组相比,高嘌呤食饵组、冰水泳浴组血清 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均显著降低(P<0. 01)。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组中性粒细胞计数显著升高(P<0. 01);与高嘌呤食饵+冰水泳浴组相比,冰水泳浴组中性粒细胞计数显著降低(P<0. 01)。 与对照组相比,高嘌呤食饵+冰水泳浴组滑膜组织 P2X7R 和 NLRP3蛋白表达显著升高(P<0. 01 或 P<0. 05)。 结论 高血尿酸状态下给予冰水泳浴条件可导致 ATP 代谢失衡,促进尿酸水平升高及尿酸盐沉积,激活 P2X7R,通过 ATP-P2X7R-NLRP3 通路导致 GA 发作。

摘要: 目的 探究 Discs 大同源物相关蛋白 5(DLGAP5)在低氧性肺动脉高压(HPH)中的表达变化及其潜在临床价值。 方法 从 GEO 数据库下载非 HPH 患者和 HPH 患者的转录组数据,并对其用生物信息学分析以探索 DLGAP5 在两者中的表达情况。 收集 HPH 患者(n= 9)和非 HPH 患者(n= 4)的肺组织样本,通过蛋白质免疫印迹实验(Western blot)验证 DLGAP5 在不同肺组织的表达水平。 构建 Sugen5416 联合慢性缺氧(SuHx)动物模型(分为 HPH 大鼠模型组和正常组,每组 6 只),检测肺动脉平均压(mPAP),并应用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学( IHC) 染色和免疫荧光( IF) 染色等方法检测模型下肺血管重塑情况以及DLGAP5 在 HPH 中的表达。 最后采用差异基因富集分析探索 DLGAP5 调控 HPH 的下游信号通路。 结果DLGAP5 在 HPH 患者肺组织中表达显著上调(P<0. 01)。 相比正常组,SuHx 诱导的 HPH 大鼠模型组 mPAP明显升高(P<0. 0001)。 HE 染色和 IHC 染色结果表明,HPH 大鼠模型组的肺动脉中膜增厚,发生明显的血管重塑。 IF 染色结果显示,相比正常组,DLGAP5 在 HPH 大鼠模型组肺动脉中膜平滑肌细胞中表达增加(P<0. 0001),且主要分布在细胞质中。 差异基因富集分析表明 DLGAP5 可能通过影响细胞周期,特别是 G2/ M 期来实现对 HPH 的调控(P<0. 001)。 结论 DLGAP5 可能作为 HPH 的潜在新靶点,为 HPH 的诊断和治疗带来新的思路。

摘要: 目的 采用四维快速数据非依赖采集技术(4D-FastDIA),从差异蛋白的角度探讨理气通腑推拿法治疗功能性消化不良(FD)的作用机制。 方法 采用随机数字表法将 30 只大鼠划分成空白组、模型组和推拿组 3 个组,每组 10 只。 空白组正常喂养,模型组和推拿组采取夹尾+冰水+不规则饮食造模,造模成功后,推拿组进行理气通腑推拿手法操作,干预 14 d 后,评估各组大鼠的一般情况和胃肠动力,观察各种大鼠胃组织的病理变化,检测各组大鼠的蛋白表达含量。 结果 空白组大鼠毛发洁白浓密,柔顺有光泽,粪便成形无异味,精神状态好,活跃好动;模型组毛发黯淡凌乱,稀疏无光泽,粪便稀软有酸臭味,精神萎靡,活动度差,胃排空率和小肠推进率下降(P<0. 01);推拿组大鼠治疗后毛发恢复浓密有光泽,粪便成形无酸臭味,精神状态、活动度、胃排空和小肠推进率等皆有改善(P<0. 01)。 HE 染色结果显示 3 组大鼠胃黏膜未见明显炎性细胞浸润,胃组织病理学检测无明显差异;蛋白组学分析结果显示模型组与空白组相比,共有 263 个蛋白发生变化,推拿组与模型组相比,共有 237 个蛋白发生变化,其中模型组与空白组相比有差异而推拿可使差异趋势逆转的蛋白有 95 个,其中 16 个表达上调,79 个表达下调。 结论 理气通腑推拿法可以有效改善 FD,这可能与调节结构蛋白、平滑肌和细胞运动相关蛋白、蛋白质活性调节蛋白、代谢相关蛋白、信号转导与调节相关蛋白以及免疫与应激相关蛋白等有关。

摘要: 目的 基于营卫理论,探讨昼夜节律紊乱通过破坏下丘脑-杏仁核核心生物钟基因的分子振荡机制介导失眠的病理过程,为营卫失和致失眠生物钟基因紊乱的理论提供时空动态分子证据。 方法 将104 只 6 周龄雌性 ICR 小鼠按照每组 52 只随机分为正常组和模型组,模型组给予对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射 3 d,正常组给予等体积生理盐水腹腔注射。 通过行为学测试评估各组小鼠的入睡时间、睡眠时长和焦虑抑郁情绪;免疫荧光染色法观察各组小鼠不同时间点( 6:00、12:00、18:00、24:00) 周期昼夜调节因子 1(PER1)和隐花色素 1(CRY1)在下丘脑和杏仁核的入核表达情况;实时荧光定量逆转录 PCR(RT-qPCR)和Western blot 观察下丘脑和杏仁核的生物钟基因的信使 RNA(mRNA)和蛋白相对表达水平。 结果 与正常组比较,模型组小鼠入睡潜伏期增加、睡眠时长缩短(P<0. 01),糖水偏好减弱(P<0. 01),旷场实验理毛次数增加及中央区域探索距离增加( P<0. 01);与正常组比较,模型组小鼠不同时间点的核心生物钟基因 PER1、CRY1、昼夜节律运动输出周期蛋白(CLOCK)、脑和肌肉芳香烃受体核转位蛋白样 1(BMAL1)的 mRNA 水平和蛋白表达存在差异,下丘脑和杏仁核脑区基因表达水平结果不完全处于同一水平;模型组小鼠 PER1 和CRY1 在下丘脑的核内共定位峰值提前约 4 ~ 6 h,在杏仁核的核内共定位峰值与正常组完全相反,相差约12 h。 结论 失眠小鼠核心生物钟基因表达与营卫失调导致的昼夜节律紊乱相关,其机制可能与不同脑区核心生物钟基因出现昼夜节律震荡、相位偏移有关,可表现为 PER1 和 CRY1 入核形成复合物的相位前移。

摘要: 目的 在低氧诱导的体外肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)模型上,观察 1, 4, 5-三磷酸肌醇 2 型受体(IP3R2) / 葡萄糖调节蛋白 75(GRP75) / 电压依赖性阴离子通道 1(VDAC1)轴调节线粒体钙(Ca²⁺)转运在细胞凋亡中的作用。 方法 将体外培养的大鼠 PASMCs 随机分为正常对照(NC)组、低氧组、四苯基丁酸(4-PBA)组。 采用 Ca²⁺免疫荧光探针测定 PASMCs 中内质网(ER)、细胞质及线粒体的 Ca2+浓度;透射电镜观察线粒体结构和形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)测定 Ca²⁺通路关键因子及线粒体分裂、融合蛋白的信使 RNA(mRNA)、蛋白表达水平。 结果 与 NC 组相比,低氧组 PASMCs 中 ER 和细胞质 Ca²⁺浓度增高,而线粒体 Ca²⁺浓度降低(P<0. 01),线粒体体积缩小,呈现肿胀状态,线粒体嵴结构紊乱,破裂增多,PASMCs 凋亡减少(P<0. 01),Ca²⁺转运通路关键因子 IP3R2、GRP75、VDAC1 和线粒体分裂蛋白 1(DRP1)mRNA 及蛋白表达水平上调(P<0. 01),而线粒体融合蛋白 2(MFN2)mRNA 及蛋白表达水平下调(P<0. 01)。 与低氧组相比,4-PBA 组 PASMCs 中 ER和细胞质 Ca²⁺浓度降低,而线粒体 Ca²⁺浓度升高(P<0. 01),线粒体结构恢复,IP3R2、GRP75、VDAC1 及 DRP1 mRNA、蛋白表达下降(P<0. 01),MFN2 mRNA、蛋白表达升高(P<0. 05 或 P<0. 01),PASMCs 凋亡增加(P<0. 01)。 结论 IP3R2 / GRP75 / VDAC1 轴调节低氧诱导的 PASMCs 线粒体 Ca²⁺转运,促进 PASMCs 细胞凋亡,为低氧性肺动脉高压的防治提供理论依据。

摘要: 目的 探究分化抑制因子 1(ID-1)在乳腺癌中的表达、临床意义及靶向核因子-κB(NF-κB) / 含Src 同源 2 结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP2) / SMAD/ Src 信号通路调控人乳腺癌 MCF-7 细胞进展的分子机制。 方法 应用免疫组化检测 ID-1 在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达,并分析其临床意义;应用生物信息学分析 ID-1 与关键蛋白的相关性。 在体内实验中,选取 45 只雌性小鼠构建乳腺癌模型,分为 5 组各 9 只,分别为 Vivo-control 组、Vivo-BMP2 组、Vivo-ID-1 mimic + BMP2 组、Vivo-BMP2 + PHPS1 组、Vivo-ID-1 mimic +PHPS1 组;剥离 5 组小鼠肿瘤组织,进行观察称重处理;在体外实验中,将购买的人乳腺癌 MCF-7 细胞分为 7组,分别为 NC 组、BMP2 组、ID-1 mimic+BMP2 组、sulfasalazine+BMP2 组、ID-1 mimic+sulfasalazine+BMP2 组、BMP2+PHPS1 组、ID-1 mimic+BMP2+PHPS1 组,应用 Western blot 检测各组蛋白表达情况;划痕实验检测MCF-7 细胞的迁移情况;Transwell 实验检测 MCF-7 细胞侵袭情况。 结果 免疫组化结果显示 ID-1 在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0. 001);ID-1 的表达状态与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移和远处转移关系密切(P<0. 05);生物信息学相关性分析提示,在乳腺癌中,ID-1 与 BMP2、NF-κB、SMAD1 / 8、Src 均具有一定的相关性(P< 0. 05);体内实验结果表明,ID-1 可以促进乳腺癌的进展,而SHP2 被抑制后会减缓乳腺癌的进展(P<0. 05,P<0. 01);体外实验结果表明,SHP2 被抑制后可使得 ID-1、NF-κB、磷酸化(p)-SHP2、p-SMAD1 / 5 / 8、p-Src 蛋白表达明显下降(P<0. 05,P<0. 01),而 NF-κB 被抑制后同样使得 ID-1、NF-κB、p-SHP2、p-SMAD1 / 5 / 8、p-Src 蛋白表达降低(P<0. 05,P<0. 01);划痕实验结果显示,ID-1 和BMP2 均可促进 MCF-7 细胞的迁移能力,而 SHP2 或 NF-κB 被抑制后可明显降低 MCF-7 细胞迁移能力(P<0. 05,P<0. 01);Transwell 实验结果显示,ID-1 和 BMP2 均可提高 MCF-7 细胞侵袭能力,而 SHP2 或 NF-κB 被抑制后可明显减缓 MCF-7 细胞侵袭能力(P<0. 05,P<0. 01)。 结论 ID-1 可以通过激活 NF-κB/ SHP2 / SMAD/Src 信号通路进而促进乳腺癌 MCF-7 细胞的侵袭和迁移。

摘要:为比较兔脑浸液(TF)与脂多糖(LPS)诱导的家兔弥散性血管内凝血(DIC)模型在医学实验教学中的应用价值,本文从致病机制、建模技术、检测体系及教学应用方案设计等 4 个层面,对这两种经典模型进行系统性对比。 结果表明,TF 模型通过外源性凝血激活模拟急性创伤性 DIC,LPS 模型则通过内源性炎症-凝血级联反应模拟慢性感染性 DIC,两者在致病时相、指标特征和实验技能训练上具有互补性。 基于机制导向、技能分层及临床映射的教学优化策略,可有效提升学生对 DIC 复杂病理过程的理解与实践能力,从而为医学实验教学中 DIC 模型的选择与整合提供了理论依据和一套可行的教学设计方案。

摘要:猕猴是广泛应用于生物医药研究的实验动物。 猴 B 病毒(BV)是一种人畜共患的病原体,自然感染猕猴,猕猴感染率可高达 70% ~ 100%。 BV 感染在猕猴中通常表现为无症状或轻微症状,但一旦传播给人类可致严重脑脊髓炎和神经系统后遗症,感染病例的病死率超过 40%。 BV 还可在人体内长期潜伏,并在特定情况下重新激活,导致严重神经系统疾病。 大多数感染 BV 的患者都是动物护理人员、实验动物医师和实验室研究人员,人类感染 BV 的严重性使得 BV 感染成为与猕猴接触人员面临的主要人畜共患病问题。 目前,尚没有预防人感染 BV 的疫苗,也没有针对 BV 的特效抗病毒药物。 因此,通过职业健康安全管理落实预防措施,对暴露事件进行规范的应急处理,及时阻断或减少 BV 入侵,是降低人感染 BV 风险和病死率的关键策略。 本文综述了人感染 BV 病例的特点、BV 暴露人群职业健康安全管理措施、暴露后应急处理措施、暴露风险评估、暴露后预防以及暴露后随访要点,以期为实验动物机构和医疗机构在 BV 感染防治工作实践中提供有益参考。

摘要:生长停滞特异性蛋白 7(Gas7)属于生长停滞特异性蛋白家族成员之一,其在中枢神经系统内广泛表达,在大脑皮层、海马和小脑中表达更显著。 Gas7 的异常表达与多种神经系统疾病的发生和毒品成瘾密切相关,但其分子层面调控作用和机制还需要不断探索。 本文综述了 Gas7 在神经系统中的广泛功能,包括对神经系统的组织发生、神经细胞分化与成熟、细胞微管生长、细胞周期、神经元迁移、轴突导向、神经元线粒体自噬和修复以及神经突触可塑性等的重要调控作用,为理解神经系统疾病提供新视角,为开发新型治疗策略提供理论依据。

摘要:脑缺血再灌注损伤(CIRI)是脑卒中后神经功能恶化的关键病理环节,其发生机制与氧化应激、炎症反应等密切相关,并最终导致神经元严重损害。 近年来,介导内源性保护作用的核因子 E2 相关因子2 / 血红素加氧酶-1(Nrf2 / HO-1)信号通路受到了广泛关注。 该通路通过调控抗氧化、抗炎及抗凋亡等过程,在维持细胞氧化还原稳态中发挥着核心作用。 本文旨在深入探讨 Nrf2 / HO-1 信号通路在 CIRI 中的激活机制及其多向性保护作用,并基于此分析靶向该通路的治疗潜力,为开发新型神经保护药物提供理论依据,以期优化临床治疗策略、改善患者预后。

摘要:心力衰竭是全球范围内高发病率和高病死率的疾病,人工智能(AI)在心血管领域的应用越来越广泛。 本文基于 AI 在心力衰竭预测方面的现状,总结了 AI 技术与临床诊察手段方面结合的应用及其研究进展。 AI 通过学习超声心动图的参数评估心脏结构并对心力衰竭做出预测;AI 建立的心电图模型在心力衰竭的预测中表现出极高的准确度;AI 发现的新型生物标志物和遗传基因能够指导心力衰竭的预测和高风险人群筛选,还能通过对其他疾病特征的学习识别心力衰竭风险。 AI 技术对心力衰竭的预测具有便捷、可靠、效率高的优点,为其提供了新的可能性与挑战,并能够为临床专家的决策提供参考。

摘要:干燥综合征(SS)是一种慢性自身性免疫性疾病,其发病机制较复杂,总体治疗效果不太理想。SS 发病与机体免疫系统紊乱密切相关,免疫细胞作为免疫系统的主要组成部分,可通过调节淋巴细胞浸润、免疫炎症反应、上皮细胞增殖等影响 SS 的发病。 miRNA 在机体转录过程中发挥关键作用,可调节免疫反应、代谢紊乱、细胞活动等,广泛参与 SS 的发生发展和预后转归。 研究发现,miR-31-5p、miR-100-5p、miR-125b 等可调控 p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、Janus 激酶/ 信号转导和转录激活因子( JAK/ STAT)等信号通路,调节巨噬细胞、树突状细胞、T 淋巴细胞以及 B 淋巴细胞等免疫细胞,减轻炎症反应,改善腺体功能,发挥抗 SS 作用。 本文通过对相关文献进行总结和分析,从 miRNA 调节免疫细胞治疗 SS 的具体机制方面进行论述,以期为 SS 治疗提供思路和参考。

摘要:环鸟苷酸腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路是先天免疫系统中重要的 DNA 识别与信号传导机制,广泛参与免疫系统相关疾病的发生与发展。 然而,在炎症性肺病中,该通路的过度激活可能引发慢性炎症和组织损伤,进而加重疾病。 cGAS 通过将腺苷三磷酸(ATP)和鸟苷三磷酸(GTP)转化为环鸟苷酸腺苷酸(cGAMP),激活 STING 通路,进而触发 I 型干扰素( IFN)的产生,参与免疫反应、细胞衰老和炎症过程。 本文系统地总结了 cGAS-STING 信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、肺纤维化等炎症性肺病中的作用,回顾了 cGAS-STING 相关抑制剂研究的最新进展,为深入理解炎症性肺病的发病机制及靶向治疗策略提供了新思路。

摘要:乳腺癌是女性常见的癌症之一,化疗作为其综合治疗的重要手段之一,常引发诸多不良反应,其中癌因性疲乏(CRF)为常见的不良反应之一。 目前,CRF 的发病机制尚未明确,缺乏可靠诊疗方法。 肠道屏障功能损伤被认为是 CRF 重要发病机制之一,而益生菌可通过修复肠道屏障与调节免疫、炎症反应减轻CRF 症状。 本文综述了益生菌干预乳腺癌术后化疗患者 CRF 的研究进展,旨在为临床提供新的辅助治疗思路。